ENZIMAS

CONCEITOS GERAIS

CONCEITO
As enzimas so protenas especializadas em catalisar reaes biolgicas, ou seja aumentam a velocidade de uma reao qumica sem interferir no processo. Elas esto associadas a biomolculas, devido as suas extraordinria especificidade e poder cataltico.

CLASSIFICAO
1. Oxidoredutases (reaes de oxidao-reduo ou transferncia de eltrons Desidrogenases e Oxidases) 2.Transferases (transferem grupos funcionais como amina, fosfato, acil, carboxil Quinases e Transaminases) 3.Hidrolases (reaes de hidrlise de ligao covalente - Peptidases) 4.Liases (catalisam a quebra de ligaes covalentes e a remoo de molculas de gua, amnia e gs carbnico Dehidratases e Descarboxilases) 5.Isomerases (reaes de interconverso entre ismeros ticos ou geomtricos - Epimerases) 6.Ligases (catalisam reaes de formao de novas molculas a partir da ligao entre duas pr-existentes, sempre s custas de energia - Sintetases)

Mudana da conformao da enzima induzida pela ligao com o substrato. O exemplo mostra a hexoquinase antes (a)e depois (b) de se ligar ao substrato, a glicose. A molcula da enzima consta de dois domnios, que se aproximam, encaixando o substrato.

CINTICA DA CATLISE ENZIMTICA

A cintica enzimtica a parte da Enzimologia que estuda a velocidade das reaes enzimticas bem como os fatores que a influenciam.

No grfico podemos observar o efeito da concentrao do substrato na taxa de uma reao catalisada por uma enzima que com o aumento na concentrao do substrato, a taxa de reao torna-se essencialmente independente da concentrao do substrato e aproxima-se assintoticamente a uma taxa constante, onde a enzima tida como estando saturada com o substrato.

PONTO DE SATURAO
Todas as enzimas apresentam o efeito da saturao, porm variando consideravelmente no que diz respeito concentrao requerida para produzi-lo.
Equao que nos permite demonstrar como a velocidade de uma reao varia em funo da concentrao do substrato.

V max[ S ] V = Km [S ]
0

Enzima Catalase Hoxoquinase Quimiotripsina H2O2 Glicose Frutose

Substrato

Km (mM) 25 0,15 1,5 2,5 12,0 32 122 9,0 0,12 2,0 57 0,025 0,018 0,9 0,1 0,04 4,0

N-benzoltirosinamida N-formiltirosinamida N-acetiltirosianamida Gliciltirosinamida HCO3Glutamato a-cetoglutarato NH4+ NADox NADred Aspartato a-cetoglutarato Oxalacetato Glutamato

Anidrase carbnica Glutamato desidrogenase

Aspartato amininotransferase

MECANISMO DA AO ENZIMTICA
a. Enzima como catalisador b. Inibio Enzimtica b.1. Inibio Reversvel b.1.1. Inibio Reversvel Competitiva b.1.2. Inibidor Reversvel no Competitivo c. Inibio Irreversvel d. Cofatores

a. Enzima como catalisador

O princpio de catalisador diminuir a energia de ativao. A enzima se liga a uma molcula de substrato em uma regio especfica denominada stio de ligao. Esta regio um encaixe que apresenta um lado envolvido por cadeias de aminocidos que ajudam a ligar o substrato, e o outro lado desta cadeia age na catlise.

Tanto a enzima quanto o substrato sofrem conformao para o encaixe. A enzima no aceita simplesmente o substrato, o substrato distorcido para conformao exata do estado de transio, denominado encaixe por induo, proposto por Koshland (1958).

b. Inibio Enzimtica b.1. Inibio Reversvel

Existem vrios modos que esto envolvidos com ligao no covalente, eles diferenciam quanto ao mecanismo pelo qual diminuem a atividade enzimtica e como eles afetam na cintica da reao.

b.1.1. Inibio Reversvel Competitiva

Uma molcula apresenta estrutura semelhante ao substrato da enzima que se liga para realizar a catlise, ela poder aceitar esta molcula no seu local de ligao, mas no pode levar ao processo cataltico, pois ocupando o stio ativo do substrato correto. Portanto o inibidor compete pelo mesmo local do substrato. O efeito da reao modifica o Km, mas no altera a velocidade.

b.1.2. Inibidor Reversvel no Competitivo

b.1.2. Inibidor Reversvel no Competitivo

Ocorre quando um molcula ou on pode se ligar em um segundo local na superfcie enzimtica (no no stio ativo). Isto pode distorcer a enzima tornando o processo cataltico ineficiente. O inibidor no competitivo pode ser uma molcula que no se assemelha com o substrato, mas apresenta uma grande afinidade com a enzima. o mecanismo inverso do inibidor competitivo, porque inibe a ligao do complexo ES e no da enzima livre. O efeito da reao modifica a velocidade e o Km permanece constante.

c. Inibio Irreversvel

c. Inibio Irreversvel
Algumas substncias se ligam covalentemente s enzimas deixando-as inativas. Na maioria dos casos a substncia reage com o grupo funcional no stio ativo bloqueando o local do substrato, deixando a enzima catalticamente inativa. Inibidores irreversveis podem ser extremamente seletivos pois so semelhantes ao substrato. So muito utilizados como resduos, os quais apresentam grupos de tomos que se configuram semelhantemente ao estado de transio que se ligam ao substrato.

d. Cofatores
Para alguns tipos de processos biolgicos, apenas a cadeia protica no suficiente, por isso a protena requer uma molcula denominada cofator a qual pode ser uma pequena molcula orgnica, denominada coenzima ou um on metlico. Os cofatores so geralmente estveis em temperatura alta. A catlise ativa enzima-cofator denominada holoenzima, quando o cofator removido, se mantm a protena, a qual catabolicamente inativa e denominada apoenzima.