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V 24-48 horas
V No > Tº de la ambiental
V descalcificacion: EDTA
V Puentes metilo cruzados
compuestos calcicos.
V Incubacion con calor 100º C buferes de
citrato o EDTA.
V Enzimas proteoliticas, sin calentamiento.
V Protease-induced epitope retrieval.
(inmunofluorescencia)
V Heat-induced epitope retrieval
Inmunomarcación de membrana: CD31 en células
plasmáticas reactivas. E-caderina en carcinoma mamario ductal
infiltrante. CD117 en seminoma clásico. CD138 en mieloma de
células plasmáticas. Distrofina, marcación submembranal en
músculo esquelético (cortesía Dra. B de `eón). EMA membrana y
acentuación paranuclear en linfoma anaplásico de células grandes.
CD15 positivo granular en región paranuclear. CD30, células de
Reed-Sternberg con marcación membranosa y paranuclear.
`infoma no Hodgkin difuso de células grandes con
matriz
fibrilar y formación de pseudosrosetas. Izquierda H&E,
derecha
CD20. Nótese como las células se agregan formando
´pseudorosetasµ
y las membranas son marcadas con CD20.
V ¢ !"#$ %""$
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V En la evaluación de las
inmunomarcaciones son importantes
dos elementos:
V ï
(intrínseco) y
V ÿ
X u
del tejido y su preservación
antigénica.
X `os factores analíticos (extrínsecos) son los
elementos externos al tejido que pueden
controlarse en el laboratorio
V Negativo: total negatividad o menos del
50% cells diana, <intnsidad q el control.
V Positivo(+):
>50% =o> intensidad q el control.
V Realizarlos sobre la misma laminilla o
despegar zonas deseadas, y transferirlos
a otros portaobjetos.