APLICACIONES EN BIOLOGÍA CELULAR

Estudiar el procedimiento para producir anticuerpos monoclonales e

indagar sobre sus aplicaciones en salud e investigación
La especificidad de los anticuerpos es una herramienta muy útil en la investigación de la función de proteínas particulares. La marcación de
anticuerpos con moléculas fluorescentes o con oro coloidal permite la localización de proteínas en la célula mediante microscopía de
fluorescencia o electrónica, respectivamente. También son utilizados para detectar proteínas en experimentos bioquímicos mediante
inmunoprecipitación o inmunoblot. Acoplados a una matriz, pueden ser utilizados para aislar proteínas desde un extracto celular. Si el antígeno se
encuentra en la superficie celular se pueden utilizar anticuerpos para aislar células que poseen un determinado antígeno mediante la
captura de las células que tienen unido un anticuerpo.
• Los anticuerpos contra proteínas en estudio se producen generalmente inyectando conejos varias veces con la proteína
purificada. El anti-suero que se obtiene contiene una mezcla heterogénea de anticuerpos, cada uno producido por un clon
de células secretoras de anticuerpos (linfocitos B).
• Estos anticuerpos reconocen varios sitios antigénicos (epítopos) en la molécula de interés, pero también pueden reconocer
las impurezas presentes en la preparación de la proteína que se inyectó. Este problema muchas veces entorpece los
ensayos por un efecto de trasfondo que no es deseado en los experimentos.
• En 1976 se solucionó el problema de la heterogeneidad al desarrollarse una técnica que ha revolucionado el uso de
anticuerpos como herramientas en biología celular y abrió nuevas posibilidades de uso en el diagnóstico y tratamiento de
enfermedades.
• El principio del procedimiento es propagar un clon de células productoras de anticuerpos de manera que se pueda obtener
un anticuerpo homogéneo en grandes cantidades. El problema práctico es que los linfocitos B sólo viven un tiempo
limitado en cultivo. Para solucionar el problema se logró fusionar linfocitos B productores de anticuerpos con células
inmortales derivadas de un tumor de células B y luego seleccionar las células híbridas que tienen la doble capacidad de
producir un anticuerpo específico contra una molécula de interés y crecer indefinidamente en cultivo. Estos llamados
hibridomas se propagan como clones individuales, cada uno de los cuales provee una fuente permanente y estable de un
sólo tipo de anticuerpo (monoclonal). Este anticuerpo reconocerá sólo un epítopo en la superficie de una proteína. Además
de solucionar los problemas de la heterogeneidad, otra gran utilidad de los anticuerpos monoclonales es que se pueden
obtener incluso utilizando preparaciones muy impuras de la proteína de interés. El procedimiento de selección posterior
permite aislar los clones que están produciendo anticuerpos contra la proteína en estudio e incluso utilizar estos
anticuerpos en su aislamiento.

La reacción antígeno-anticuerpo (Ag-Ac) es una de las reacciones moleculares angulares en la respuesta inmunitaria del organismo. El concepto se refiere a la
unión específica de un anticuerpo con un antígeno para inhibir o demorar su toxicidad.
Técnica de inmunohistoquímica
¿Qué son?
• Anticuerpos humanos generados en ratones transgénicos
• Anticuerpos humanos generados en fagos

• Los fagos son virus que infectan bacterias de forma específica. Los bacteriófagos, como el resto de virus conocidos, se encuentran en una zona
intermedia entre los organismos vivos y la materia inerte
Anticuerpos humanos generados en ratones
transgénicos
• APLICACIÓN CLINICA DE LOS ANTICUERPOS MONOCLONALES