CRECIMIENTO EN MEDIOS DE CULTIVOS

CON CRECIMIENTO DE GRUPOS

MICROBIANOS PROPIOS DE LECHES
Alberth Andreyth Muñoz Monaityama
Pedro Alejandro Moncada Velandia
Carlos Andrés Henao Vega
 Agar SPC
• El agar SPC es un medio de cultivo sólido, no selectivo, diseñado para la
cuantificación de la carga microbiana aerobia presente en muestras de
aguas de consumo, aguas residuales, bebidas lácteas, entre otros
alimentos.

• El medio agar SPC está compuesto por extracto de levadura, tripteína,

glucosa, agar y agua destilada.

• Como el medio no contiene inhibidores, las bacterias pueden

desarrollarse sin ningún tipo de restricciones, por ello es ideal para el
recuento general de colonias.

•  La técnica de cuantificación en placa busca determinar por lo general la

cantidad de bacterias del tipo mesófilas aerobias, es decir, aquellas que
se desarrollan en temperaturas entre 25 y 40°C, con una temperatura
óptima de crecimiento a 37°C.

• Cabe destacar que en ocasiones puede interesar cuantificar la cantidad

de bacterias psicrófilas presentes en los alimentos, estas bacterias son
aquellas que se desarrollan a bajas temperaturas (< 20C) y son las
responsables de que los alimentos se descompongan más rápido, aun
estando en nevera.
 CALDO BILIS VERDE BRILLANTE
Este medio está recomendado para el recuento de coliformes totales y
fecales, por la técnica del número más probable.
Fundamento, la peptona aporta los nutrientes necesarios para el
adecuado desarrollo bacteriano, la bilis y el verde brillante son los
agentes selectivos que inhiben el desarrollo de bacterias Gram
positivas y Gram negativas a excepción de coliformes, y la lactosa es el
hidrato de carbono fermentable. Es una propiedad del grupo coliformes,
la fermentación de la lactosa con producción de ácido y gas.
Incubación:
• Para coliformes totales: en aerobiosis, a 35 - 37 °C durante 48 horas.
• Para coliformes (fecales): en aerobiosis, a 44,5 - 45,5 °C durante 24 horas

Interpretación del crecimiento se evidencia por la presencia de turbidez en

el medio de cultivo.
Se utiliza en el tubo de Durham. Si las bacterias
• La fermentación de lactosa con producción de ácido y gas en 48 horas,
fermentan la lactosa aparece gas en el tubo invertido
indica la presencia de coliformes.
(gas+) Esta reacción es producida por el grupo
•Positivo: turbidez y presencia de gas. Puede existir viraje del color del medio coliformes
de cultivo al color amarronado o amarillo.
•Negativo: ausencia de turbidez y/o gas.
 Agar EMB
• El agar EMB es nutritivo por la presencia de peptona que
favorece el desarrollo microbiano, selectivo para el crecimiento
de bacterias Gram negativas.

• La diferenciación se presenta entre organismos capaces de

utilizar la lactosa y/o sacarosa y aquellos que son incapaces de
hacerlo.

• Las cepas que utilizan la lactosa poseen un centro oscuro con

periferia azulada o rosada, mientras las que no lo hacen son
incoloras.

• Los indicadores de eosina y azul de metileno ejercen un efecto

inhibitorio sobre una amplia variedad de bacterias Gram
positivas. Formación de No hay formación de
coliformes de E. coli coliformes de E. coli
• Cepas de E. coli y Citrobacter spp presentan un característico
brillo metálico.

• Tiempo de incubación de 18 a horas a una temperatura de 35-37

°C.
 Prueba de Indol
• El indol es uno de los productos de degradación del aminoácido triptófano, la
presencia de la enzima triptofanasa en la bacteria provoca la hidrólisis del
aminoácido y su desaminación, produciendo indol, ácido pirúvico y amoníaco.

• La prueba del indol se basa en la formación de un colorante rojo oscuro cuando

el indol liberado reacciona con el 4-dimetilaminobenzaldehído.

• La producción de indol es una característica importante en la identificación de

muchos microorganismos, especialmente E. coli (+) de entre otras
enterobacterias.

• Para la detección de indol, los microorganismos deben cultivarse aeróbicamente

en un ambiente libre de glucosa con abundante triptófano.

• Si la bacteria posee la enzima triptofanasa, al añadir al medio las gotas del

reactivo de Kovacs, se producirá un anillo de color rojo cereza en la superficie
del caldo y la prueba será considerada positiva.

• Si esto ocurre después de 24 horas la prueba se considera completa, pero si es

negativo deberá incubarse otras 24 horas y repetirse la prueba.
 AGAR OGY

•  El extracto de levadura por su alto contenido en vitaminas

proporciona excelentes condiciones de crecimiento a una
amplia variedad de microorganismos. El cloranfenicol inhibe el
desarrollo de la flora acompañante.

• La glucosa es la fuente de energía. Este medio de cultivo se

utiliza casi siempre para la técnica de vaciado en placa.
Después de esterilizar el medio de cultivo

• Después de incubar durante 4 días a 25 °C, se realizar la

cuenta de colonias de levaduras y mohos. 
Formando líderes para la construcción de un
nuevo país en paz