ENZIMAS Y

COENZIMAS

LICDA. RITA PÉREZ DE LÓPEZ

Al finalizar el tema el estudiante estará en
la capacidad de:

Comprender las características generales

de las enzimas, coenzimas y cofactores;
la importancia de su función en el
mantenimiento de la vida .

Identificar las enzimas por su

clasificación.

Conocer la importancia de los

mecanismos de reacción enzimática.
CATALIZADORES
Moléculas que aceleran la velocidad de
reacciones químicas

Inorgánicos: Fe,
Cu, Hg+
TIPOS DE
CATALIZADORES
Orgánicos: Enzimas
PROPIEDADES DE LOS
CATALIZADORES
Se necesitan en mínimas cantidades

No sufren alteraciones irreversibles

durante la catálisis

Carecen de efecto sobre la termodinámica

y el equilibrio químico de las reacciones
CATALIZADORES ORGÁNICOS
Incrementan la velocidad de la reacción de
106-1012 veces

Se localizan dentro de las células, donde la

temperatura, pH y concentración salina son
apropiadas para su actividad

Son muy específicas en relación a los

reactantes y la reacción que catalizan
CATALIZADORES ORGÁNICOS

Los únicos productos de la reacción que

catalizan son los que se requieren (no hay
subproductos)

La actividad de estos catalizadores puede

ser regulada para satisfacer las
necesidades celulares en un momento
dado
TIPOS DE CATALIZADORES
ORGÁNICOS
ENZIMAS: moléculas de naturaleza
proteica capaces de catalizar reacciones
químicas

RIBOZIMAS: moléculas de ARN con

capacidad catalítica
CARACTERÍSTICAS DE LAS
ENZIMAS
Son proteínas globulares con una
conformación tridimensional específica,
determinada por la secuencia de los
aminoácidos que la conforman

Como el resto de proteínas, poseen

dominios (áreas especializadas con
funciones específicas)
ENZIMAS
Las enzimas son
proteínas que
catalizan reacciones
químicas en los seres
vivos.
Ello hace posible que
en condiciones
fisiológicas tengan
lugar reacciones que
sin catalizador
requerirían
condiciones extremas
de presión,
temperatura o pH.
CARACTERÍSTICAS DE LAS
ENZIMAS

La enzima posee un dominio conocido

como SITIO ACTIVO, en el cual se realiza
la catálisis

A este sitio se unen SUSTRATOS

(moléculas que van a ser transformadas
en productos)
CARACTERÍSTICAS
DEL SITIO ACTIVO
ENZIMAS ALOSTÉRICAS
Algunas enzimas poseen además del sitio
activo, uno o más dominios conocidos
como SITIO ALOSTÉRICO

Aquí se fijan moléculas llamadas

modificadores alostéricos:
positivos (aumentan actividad enzimática)
negativos (disminuyen actividad enzimática)
Activador alostérico: Inhibidor alostérico:
favorece la unión del impide la unión del
sustrato sustrato
 ENZIMAS ALOSTÉRICAS
 Su importancia radica, en
SITIO ACTIVO
que son puntos clave
para la regulación de las
vías metabólicas

 Las moléculas
modificadoras cambian la
conformación
tridimensional del sitio
activo o catalítico
MODIFICADOR
ALOSTÉRICO
SITIO ALOSTÉRICO
COMPONENTES DE LA ENZIMA
La enzima per se es quien realiza la
catálisis

Algunas enzimas necesitan de una

molécula adicional para realizar la
catálisis, llamadas complejos
Holoenzimáticos

Se llama Apoenzima a la parte

proteica y Cofactor a la molécula no
proteica de una Holoenzima
HOLOENZIMAS

APOENZIMA APOENZIMA APOENZIMA

COENZIMA GRUPO
PROSTÉTICO ION
METÁLICO

HOLOENZIMA: complejo constituido por

apoenzima (parte proteica) y por
cofactores (ion metálico),coenzima, grupo
prostético.
En la figura siguiente podemos observar una molécula de
hemoglobina (proteína que transporta oxígeno) y su coenzima (el
grupo hemo). El grupo hemo es un ejemplo típico de grupo
prostético que lo podemos encontrar en algunas proteínas.

APOENZIMA + GRUPO PROSTETICO = HOLOENZIMA

FUNCIÓN DE LAS COFACTORES
Los cofactores participan activamente con las
enzimas durante la catálisis

Las coenzimas pueden o no sufrir cambios

durante la catálisis, por ello también se les
conoce como cosustratos

Su presencia es fundamental, sin ellos no puede

ocurrir la reacción bioquímica
COFACTORES
Puede ser de tres tipos
Coenzima: sustancia orgánica no
proteica, puede separarse de la parte
proteica de la enzima; muchas se
derivan de las vitaminas
Grupo prostético: sustancia orgánica
unida covalentemente a la apoenzima,
ej: Hemo, FAD+ Y FMN
Ión metálico activador: K+, Fe2+, Fe3+,
Cu2+, Co2+, Zn2+, Mn2+, Mg2+, Ca2+, y Mo3+
 ENZIMA CON COFACTOR

La diferencia entre un cofactor y un grupo prostético, como el

grupo hemo, es que este último está unido de manera
covalente a la enzima, mientras que el cofactor puede ser
removido de la misma con relativa facilidad.
EJEMPLOS DE COENZIMAS Y VITAMINAS
RELACIONADAS
Coenzima Vitamina Reacción química
relacionada
NAD+, NADP+ Niacina Óxido-reducción

FAD Riboflavina (B2) Óxido-reducción

Tiamina Tiamina (B1) Transferencia de grupo

pirofosfato aldehído
Coenzima A Pantoténico Transferencia de grupo acilo

Tetrahidrofolato Folato Transferencia de Carbono

Biotina Biotina Carboxilación

Piridoxal fosfato Piridoxal (B6) Transaminación

NEMOTECNIA DE LAS VITAMINAS DEL
COMPLEJO B

TENGO TIAMINA B1
ROTA LA RIBOFLAVINA B2
NARIZ NIACINA B3
POR PIRIDOXINA B6
ANDAR ACIDO FOLICO B9
CORRIENDO CIANOCOBALAMINA B12
BAJO EL BIOTINA B8
AGUA ACIDO PANTOTENICO B5
Elemento Enzima Activada
Zn++ Deshidrogenasas, anhidrasa carbónica, ARN y ADN
polimerasas.

Mg++ Fosfohidrolasas, fosfotransferasas, fosfatasas.

Mn++ Arginasas, peptidasas, quinasas.

Mo Nitratorreductasa, nitrogenasa.

Fe2+, Fe3+ Citocromos, catalasas, ferredoxina, peroxidasas,

nitritoreductasa.

Cu2+ Citocromo oxidasa, tirosinasa, ácido ascórbico oxidasa.

Ca2+ 1,3 b glucasintetasa.

K+ Piruvato fosfoquinasa, ATPasa.

Co Vitamina B12 encontrada en microorganismos y animales,

pero no en plantas. Importante en la fijación simbiótica
de nitrógeno.

Ni Ureasa.
 Enfermedades
VITAMINAS FUNCIONES
carenciales
C (acido Coenzima de algunas peptidasas. Interviene
Escorbuto
ascórbico) en la síntesis de colágeno
Coenzima de las descarboxilasas y de las
B1 (tiamina) Beriberi
enzimas que transfieren grupos aldehídos

Dermatitis y lesiones en
B2 (riboflavina) Constituyente de los coenzimas FAD y FMN
las mucosas

B5 (acido Fatiga y trastornos del

Constituyente de la CoA
pantoténico) sueño
Constituyente de las coenzimas NAD y
B3 (niacina) Pelagra
NADP
Interviene en las reacciones de
B6 (piridoxina) Depresión, anemia
transferencia de grupos amino
Coenzima en la transferencia de grupos
B12 (cobalamina) Anemia perniciosa
metilo.
Coenzima de las enzimas que transfieren
Biotína grupos carboxilo, en metabolismo de Fatiga, dermatitis
aminoácidos.
 SISTEMAS MULTIENZIMÁTICOS
 Conjunto de enzimas que participan en
una secuencia de reacciones (vía
metabó lica)
 El producto de la enzima A se convierte
en sustrato de la enzima B, y así
sucesivamente hasta el producto final
SISTEMAS MULTIENZIMÁTICOS
Ayudan a incrementar la velocidad del
metabolismo celular

Son muy frecuentes en las células

Ejemplos:
Enzimas de la glucó lisis
Enzimas de la b-oxidació n
Enzimas de la cadena respiratoria
 ISOENZIMAS
Enzimas con funció n bioló gica similar, pero
diferente estructura química

Podemos observar su existencia en funció n de:

tipo de tejido: la lactato deshidrogenasa presenta
isozimas distintas en mú sculo y corazó n

compartimiento celular donde actú a: la malato

deshidrogenasa del citoplasma es distinta de la de la
mitocondria.

etapas del desarrollo del individuo: algunos

enzimas de la glucó lisis del feto son diferentes de las
mismas enzimas en el adulto.
Importancia Biomédica de las Enzimas
Ciertas enfermedades (errores congénitos
del metabolismo) se deben a anormalidades
en la síntesis de enzimas determinadas por
genes.
Cuando las células son lesionadas(Ej.
Trastornos de la circulació n sanguínea o
inflamació n) ciertas enzimas pasan al
plasma.
La medició n de su actividad es parte integral
del diagnó stico de cierto numero de
trastornos médicos importantes.
PROENZIMAS O ZIMÓGENOS
Algunas enzimas se sintetizan como
proteínas sin actividad bioló gica

Sufren hidró lisis de algunos de sus

aminoá cidos para activarse

Muchas enzimas digestivas se secretan

como zimó genos y se activan en el tubo
digestivo

Ej.: quimotripsinó geno → quimotripsina

MECANISMO DE REACCIÓN
Cuando ocurre una reacció n, los
sustratos se convierten en productos:
S P
Las moléculas que van a reaccionar
deben alcanzar un nivel de energía
mayor denominado estado de
transición
A partir de allí, procede la reacció n.
MECANISMO DE REACCIÓN

Energía de activación
sin enzima

Energía de activación
con enzima
 La acció n de los catalizadores consiste,
precisamente, en disminuir la Ea . Las enzimas
son catalizadores especialmente eficaces, ya
que disminuyen la Ea aú n má s que los
catalizadores inorgá nicos. Por ejemplo, la
descomposició n del agua oxigenada (H2O2)
para dar H2O y O2 puede ocurrir sin catalizador,
con un catalizador inorgá nico (platino), o con
una enzima específica (catalasa). Las
respectivas Ea para cada proceso son 18, 12 y 6
Kcal./mol. Así, se puede calcular que el platino
acelera la reacció n 20.000 veces, mientras que
la catalasa la acelera 370.000 veces.
MECANISMO DE REACCIÓN
La interacció n entre el sitio activo de la
enzima y el sustrato específico, favorece
la formació n del estado de transición
disminuyendo la energía de activació n

Por esta razó n la velocidad de la

reacció n es mayor

El sustrato se convierte en producto, y

es liberado de la enzima
MECANISMO DE REACCIÓN
Cada sustrato actú a como una llave,
y el sitio activo es la cerradura en la
que encaja esa llave.
Cuando el sustrato se convierte en
producto, ha sido modificado
químicamente y no encaja con el
sitio activo, así que es liberado
MECANISMO DE REACCIÓN
Acciones que realiza la enzima para
acelerar la velocidad de reacció n:
Orienta a los sustratos para que se
enfrenten a los á tomos correctos y
formen enlaces
Los grupos R pueden hacer má s reactivos
a los sustratos
Inducen la deformació n del sustrato
Cambia la forma de la enzima (SITIO
ACTIVO) cuando se une el sustrato
MECANISMO DE REACCIÓN
ENZIMÁTICA
CINÉTICA ENZIMÁTICA
La cinética enzimática estudia la velocidad de las
reacciones catalizadas por enzimas.

Las reacciones enzimáticas se caracterizan por

un efecto de saturación

La saturación se debe a que todos los sitios

activos de las enzimas están ocupados

Saturados los sitios catalíticos, aunque se

aumente la concentración de sustrato la
velocidad de reacción no aumenta linealmente
CINÉTICA ENZIMÁTICA
Las enzimas actú an en un rango de pH
y temperatura ó ptimos, si se cambian
estas condiciones la velocidad no es
efectiva porque sufre desnaturalizació n

Ejemplos: enzimas del estó mago

requieren pH á cido, mientras que las
enzimas del intestino requieren pH
bá sico para su actividad catalítica
 FOSFATASA ALCALINA

1 2 3 4 5 6 7 8 9 10
pH
 

Figura: efecto del cambio en el pH en la actividad de

algunas enzimas.
CINÉTICA ENZIMÁTICA
Las enzimas poseen grupos ionizables
(carboxilos -COOH; amino–NH2; tiol -SH;
imidazol, etc.) en las cadenas laterales de
sus aminoá cidos

Segú n el pH del medio, estos grupos

pueden tener carga eléctrica positiva,
negativa o neutra

Existe un pH en el cual la conformació n

será la má s adecuada para la actividad
catalítica. Este es el llamado pH óptimo.
CINÉTICA ENZIMÁTICA
En general, el incremento de temperatura
acelera las reacciones químicas

Las reacciones catalizadas por enzimas

siguen esta ley general

Sin embargo, por tratarse de proteínas, se

empiezan a desnaturalizar a partir de cierta
temperatura por arriba de su valor ó ptimo
ACTIVIDAD ENZIMÁTICA
Actividad máxima Actividad máxima
de la enzima de la enzima

Desnaturalización Desnaturalización
de la enzima de la enzima
LAS ENZIMAS Y LA DIGESTIÓN
En 1882 se introdujo el concepto del complejo
enzima-sustrato como intermediario del
proceso de catálisis enzimática. En 1913, Leonor
Michaelis (foto de la izquierda) y Maud Menten
(foto de la derecha) desarrollaron esta teoría y
propusieron una ecuación de velocidad que
explica el comportamiento cinético de los
enzimas.
ECUACIÓN DE MICHAELIS-MENTEN
 Modelo que explica la mayoría de reacciones catalizadas por
enzimas

 La enzima se combina reversiblemente con su substrato para

formar el complejo enzima-sustrato (ES) que se rompe para
formar el producto, así se regenera la enzima

 Para una molécula de sustrato se muestra a continuación:

k1 k2
S + E ES P + E
donde: S = substrato
E = la enzima
ES = complejo enzima substrato o complejo de Michaelis y Menten
K1 y k2 = constantes de velocidad de la reacción.
ECUACIÓN DE MICHAELIS-MENTEN
 La ecuació n de Michaelis y Menten describe como varía la
velocidad de reacció n con la concentració n de sustrato:

Vmax S 
v0 
Km   S 
donde:
v0 = velocidad inicial de la reacció n
Vmax = velocidad má xima
Km = constante de Michaelis y Menten= (k1+ k2)/k1

S = concentració n de sustrato

INTERPRETACION
La ecuació n de Michaelis y Menten explica el
grado de afinidad de la enzima por el sustrato

Mientras mayor sea la afinidad, má s

rá pidamente ocurre la reacció n.

Un valor numérico pequeñ o de Km refleja una

alta afinidad de la enzima por su substrato
porque a una baja concentració n del mismo, la
enzima ha desarrollado ya la mitad de la
velocidad má xima.
REGULACIÓN DE LA
ACTIVIDAD ENZIMÁTICA
Las actividades enzimá ticas pueden
regularse para cubrir las
necesidades celulares

Pueden existir:
Activaciones, aumentan el trabajo
de la enzima
Inhibiciones, disminuyen el
trabajo de la enzima
INHIBICIÓN ENZIMÁTICA
Existen dos tipos principales de inhibición:
Inhibición competitiva
La molécula inhibidora es muy parecida
al sustrato y compite por el sitio activo
El malonato inhibe a la enzima
succinato deshidrogenasa cuyo
sustrato normal es el succinato
Las sulfas compiten con el PABA de las
bacterias
INHIBICIÓN COMPETITIVA
Inhiben la reacción catalizada por la enzima
“transpeptidasa” la cual favorece la integridad
de la pared celular.
 RESISTENCIA A ANTIMICROBIANOS

 La resistencia
de algunas
bacterias a los
antibióticos
como uno de
los problemas
de salud
pública más
graves a nivel
mundial.
INHIBICIÓN NO COMPETITIVA
Inhibición No Competitiva
La molécula inhibidora no se parece al
sustrato, y se une a la enzima en un
sitio alejado del sitio activo, un sitio
regulador o alostérico.
En la inibición alostérica, la unión de la
molécula a la enzima, hace que la
conformación de esta se altere y ya no
reconoce al sustrato
INHIBICIÓN NO
COMPETITIVA
INHIBICIÓN ENZIMÁTICA

Las inhibiciones pueden ser

Reversibles: se elimina la molécula
inhibidora y se activa la enzima

Irreversible: la molécula inhibidora no

es eliminada y la enzima no se activa
INHIBICIÓN IRREVERSIBLE
El inhibidor forma un enlace covalente con las
enzimas cerca del centro activo

El fluorofosfato de di-isopropilo (DFP) o gas

nervioso, forma un complejo con la enzima
acetilcolinesterasa, evita la transmisión de impulsos
nerviosos, y provoca parálisis (sarina y malatión)
SARINA (usado en el ataque terrorista en Tokio en
1995) y el MALATION (insecticida).

La acetilcolina (neurotransmisor) comienza a

acumularse en los centros de transmisión (neuronas,
ganglios, uniones neuromusculares), ya no se
transmiten órdenes a los músculos lisos ni estriados.
INHIBICIONES ENZIMÁTICAS
OTROS TIPOS DE REGULACIÓN
La fosforilación también puede regular a
las enzimas, algunas se activan y otras se
inactivan
Existe también la inhibición por
retroalimentación, quiere decir que
cuando existe suficiente producto, este
inhibe a la enzima para que no se
produzca más, es una manera
importante de mantener la homeostasis
 en una célula.
NOMENCLATURA DE LA COMISIÓN ENZIMÁTICA

El nombre de cada enzima puede ser

identificado por un código numérico,
encabezado por las letras EC (enzyme
commission), seguidas de cuatro números
separados por puntos. El primer número
indica a cual de las seis clases pertenece
el enzima, el segundo se refiere a
distintas subclases dentro de cada grupo,
el tercero y el cuarto se refieren a los
grupos químicos específicos que
intervienen en la reacción.
 Ejemplo la ATP glucosa
fosfotransferasa (glucoquinasa)
se define como EC 2.7.1.2. El
número 2 indica que es una
transferasa, el 7 que es una
fosfotransferasa, el 1 indica que
el aceptor es un grupo OH, y el
último 2 indica que es un OH de
la D-glucosa el que acepta el
grupo fosfato.