Ciclo de Krebs y glucolisis

CICLO DEL ÁCIDO CÍTRICO (O CICLO DE KREBS)

 
El ciclo del ácido cítrico es el modo
• habitual de degradación oxidativa en
organismos eucariontes y procariontes.
El ciclo consiste en una serie de 8
reacciones, donde se oxidan el grupo
acetilo, de Acetil-CoA a dos moléculas
de CO2. De las 8 reacciones, 4 son
oxidaciones, en las cuales la energía es
eficientemente conservada, en forma
de coenzimas reducidas, NADH Y
FADH2, para usarla a posteriori en la
producción de ATP.
 Reacción 1: Formación de citrato.

La primera reacción del ciclo es la condensación del Acetil-CoA con Oxalacetato (4 Carbonos) por acción de la citrato
sintasa para producir Citrato (6 Carbonos). En esta etapa el grupo metilo del Acetil-CoA se une al carbonilo del
Oxalacetado (C2), formando el intermediario Citril-CoA, que inmediatamente se hidroliza para dar Citrato y CoA libre
(que puede formar más Acetil-CoA). La hidrólisis del enlace tioester de alta energía, es fuertemente exergónica, por lo
tanto esta reacción es irreversible. Que esta reacción posea un ∆G.
.
Reacción 2: Isomerización del citrato.

Los siguientes dos pasos del ciclo implican reestructurar el citrato a un isómero que se oxide con mayor facilidad.
La aconitasa convierte el alcohol terciario en uno secundario (oxidable), para ello, primero se deshidrata
generando un doble enlace cis y luego de hidrata con un grupo alcohol en el carbono 2.
Reacción 3: Primera descarboxilación oxidativa del
isocitrato

En esta primera oxidación del isocitrato (recordar que posee 6 Carbonos) se genera la primera molécula CO2
y α-cetoglutarato (que posee 5 Carbonos) por acción de la isocitrato deshidrogenasa. Esta enzima tiene
como cofactor a NAD+ que actúa como aceptor de los electrones de alta energía generados en esta etapa
para dar NADH. Esta es la Segunda reacción irreversible del ciclo y la principal reguladora del mismo.
Reacción 4: Segunda descarboxilación oxidativa del α-cetoglutarato

A través del complejo enzimático α-cetoglutarato deshidrogenasa (formada por 3 enzimas análogas a las del
complejo enzimático piruvato deshidrogenasa, y que requieren los mismos cofactores TTP, NAD+, FAD, ácido
lipoico y Co-A), se produce la segunda descarboxilación del α-cetoglutarato para dar succinil-CoA con la
formación de una nueva molécula de NADH a partir de NAD+. Al igual que en el Acetil-CoA, en el succinil-CoA
el enlace tioester formado es de alta energía.
Reacción 5: Formación de GTP a partir de Succinil-CoA

En esta etapa la energía del enlace tioester del Succinil-CoA se aprovecha para llevar a cabo la fosforilación a
nivel de sustrato de GDP y generar GTP, Succinato y regenerar la Coenzima A. La enzima que actúa en esta etapa
es la Succinil-CoA Sintetasa. De aquí en mas no se producirán mas descarboxilación, solo resta oxidar el succinato
hasta oxalacetato y reiniciar el ciclo.

Obtener GTP es equivalente a obtener ATP:

 Reacción 6: Oxidación del Succinato a Fumarato

La Succinato deshidrogenasa es la única enzima que no se encuentra en la matriz mitocondrial, sino que
es una enzima integral de la membrana interna de la mitocondria. Esta forma parte de la cadena de
transporte de electrones. Esta oxidación implica la formación de un doble enlace, proceso que genera
electrones de alta energía, pero de energía menor que los que se requieren para reducir al NAD+, por ello esta
enzima emplea como cofactor al FAD para obtener FADH2.
Reacción 7: Hidratación del Fumarato

La Fumarasa cataliza la hidratación del doble enlace del fumarato para obtener malato. La Fumarasa,
igual que la succinato deshidrogenasa también estereoespecífica, solo cataliza la hidrólisis del fumarato
(no maleato) para formar el isómero L-Malato.
 Reacción 8: Oxidación de malato a oxalacetato

Es la última reacción del ciclo de Krebs e implica la última oxidación para obtener el oxalacetato a partir de Malato con
la reducción de una molécula más de NAD+ por acción de la enzima Malato deshidrogenasa, es una reacción irreversible, y
muy exergonica, por lo que el poco oxalacetato que se produce es inmediatamente captado por la citrato sintasa para
producir la condensación con el Acetil-CoA.
De esta forma se mantiene bajas las concentraciones de oxalacetato (alrededor de 10-6M), la reacción de
deshidrogenacion del malato se hace termodinámicamente posible y el ciclo avanza.
Regulación del ciclo de Krebs

El ciclo del ácido cítrico presenta 3 puntos de regulación, en las enzimas que catalizan las reacciones irreversibles

Citrato sintasa.

Isocitrato
deshidrogenasa

α-cetoglutarato
deshidrogenasa
 Carácter anfibólico del ciclo de Krebs

Las reacciones catapleroticas son aquellas que emplean intermediarios del ciclo de Krebs como precursores
biosintéticos. Por ejemplo el α-cetoglutarato y el y el oxalacetato son precursores de los aminoácidos aspartato y
glutamato por simple transaminación. A partir de estos dos aminoácidos se generan otros aminoácidos así como
nucleótidos puricos y pirimidicos. El oxalacetato puede convertirse en glucosa en la gluconeogénesis y el succinil-CoA
es un intermediario en la síntesis del anillo porfirinico del grupo hemo. Las reacciones que producen los
intermediarios del ciclo de Krebs se denominan reacciones anapleroticas.
 Es la ruta metabólica encargada de oxidar la
GLUCOLISIS glucosa con la finalidad de obtener energía
para la célula.

 Consiste en 10 reacciones enzimáticas

consecutivas que convierten a la glucosa
en dos moléculas de piruvato, el cual es
capaz de seguir otras vías metabólicas y
así continuar entregando energía al
organismo.

 Esta ruta se realiza tanto en ausencia

como presencia de oxígeno, definido
como proceso anaeróbico en este caso.
 FUNCIONES DE LA GLUCOLISIS

La generación de moléculas de alta energía (ATP y NADH) como fuente de energía celular en
procesos de respiración aeróbica (presencia de oxígeno) y fermentación (ausencia de oxígeno).

La generación de piruvato que pasará al ciclo de Krebs, como parte de la respiración aeróbica.

La producción de intermediarios de 6 y 3 carbonos que pueden ser utilizados en otros procesos

celulares.
Etapas de la glucolisis
Paso 1: HEXOQUINASA
• La primera reacción de la glucólisis es la
fosforilación de la glucosa, para activarla
(aumentar su energía) y así poder utilizarla en
otros procesos cuando sea necesario. Esta
activación ocurre por la transferencia de un grupo
fosfato del ATP, una reacción catalizada por la
enzima hexoquinasa, a cual puede fosforilar
(añadir un grupo fosfato) a moléculas similares a
la glucosa, como la fructosa y manosa. Las
ventajas de fosforilar la glucosa son 2: La primera
es hacer de la glucosa un metabolito más
reactivo, mencionado anteriormente, y la
segunda ventaja es que la glucosa-6-fosfato no
puede cruzar la membrana celular -a diferencia
de la glucosa- ya que la carga negativa que le
proporciona el grupo fosfato a la molécula hace
que sea más difícil atravesarla. De esta forma se
evita la pérdida de sustrato energético para la
célula.
Paso 2: Glucosa-6-P isomerasa
• Este es un paso importante,
puesto que aquí se define la
geometría molecular que
afectará los dos pasos críticos en
la glucólisis: El próximo paso,
que agregará un grupo fosfato al
producto de esta reacción, y el
paso 4, cuando se creen dos
moléculas de gliceraldehido que
finalmente serán las precursoras
del piruvato.
Paso 3: Fosfofructoquinasa
• Fosforilación de la fructosa 6-fosfato en el
carbono 1, con gasto de un ATP, a través
de la enzima fosfofructoquinasa-1 (PFK1).
También este fosfato tendrá una baja
energía de hidrólisis. Por el mismo motivo
que en la primera reacción, el proceso es
irreversible. El nuevo producto se
denominará fructosa-1,6-bisfosfato. La
irreversibilidad es importante, ya que la
hace ser el punto de control de la
glucólisis. Como hay otros sustratos aparte
de la glucosa que entran en la glucólisis, el
punto de control no está colocado en la
primera reacción, sino en esta.
Paso 4: Aldolasa
• La enzima aldolasa (fructosa-1,6-
bisfosfato aldolasa), mediante una
condensación aldólica reversible,
rompe la fructosa-1,6-bisfosfato
en dos moléculas de tres carbonos
(triosas): dihidroxiacetona fosfato
y gliceraldehído-3-fosfato. Existen
dos tipos de aldolasa, que difieren
tanto en el tipo de organismos
donde se expresan, como en los
intermediarios de reacción.
Paso 5: Triosa fosfato isomerasa
• Puesto que solo el gliceraldehído-3-fosfato
puede seguir los pasos restantes de la
glucólisis, la otra molécula generada por la
reacción anterior (dihidroxiacetona-fosfato)
es isomerizada (convertida) en
gliceraldehído-3-fosfato. Esta reacción posee
una energía libre en condiciones estándar
positiva, lo cual implicaría un proceso no
favorecido, sin embargo al igual que para la
reacción 4, considerando las concentraciones
intracelulares reales del reactivo y el
producto, se encuentra que la energía libre
total es negativa, por lo que la dirección
favorecida es hacia la formación de G3P.
Regulacion

• El efecto Pasteur: El efecto Pasteur es la visualización del poder que posee el O2 en la fermentación mediada por levadura,
que fue descubierto por Luis Pasteur al observar la relación entre la tasa de fermentación y la existencia de aire. Él determinó que
estas tenían una relación inversa, y además observó que en condiciones aeróbicas, las células de levadura aumentaban y la
fermentación disminuía.

• De esta manera, el efecto Pasteur fue una de las primeras observaciones que alguien realizó al proceso de la glucólisis de manera
indirecta, pero observando que el metabolismo primario de glucosa se podía realizar con presencia o ausencia de oxígeno, y que en
este último ocurre la fermentación alcohólica.

Regulacion del sustrato: La membrana plasmática de las células es impermeable a la glucosa. Para
llevarla dentro de ella utiliza transportadores especiales llamados GLUT, de los cuales hay diferentes tipos y
algunos especializados para cada célula.

Regulación hormonal: Al aumentar la glucosa en la sangre, después de una comida, las células beta del
páncreas estimulan la producción de insulina, y esta a su vez aumenta la actividad de la glucoquinasa en los
hepatocitos.
Las concentraciones altas de glucagon y las bajas de insulina disminuyen la concentración intracelular de fructosa-
1,6-bisfosfato. Esto trae por consecuencia la disminución de la glucólisis y el aumento de la gluconeogenésis.
Regulación de la actividad enzimática

La hexoquinasa es un punto de regulación poco importante, ya que se inhibe cuando hay mucho G-6P en
músculo. Es un punto poco importante ya que el G-6P se utiliza para otras vías.

La piruvatoquinasa se regula distintamente según el tejido en el que trabaje, pero en hígado se inhibe en
presencia de ATP y Acetil Coenzima-A (Acetil-CoA), y se activa gracias de nuevo ante la F-1,6-BP y la
concentración de fosfoenolpiruvato.

La fosfofructoquinasa-1 es la enzima principal de la regulación de la glucólisis, actúa como una llave de agua, si
está activa cataliza muchas reacciones y se obtiene más fructosa-1,6-bisfosfato, lo que permitirá a las enzimas
siguientes transformar mucho piruvato. Si está inhibida, se obtienen bajas concentraciones de producto y por lo
tanto se obtiene poco piruvato.
Gracias