TOXICIDAD EN

PECES
Andres Felipe Pinto Arias 41142081
Laura Alejandra Castañeda 41151275
Juan Sebastián Suárez Castañeda 41162084
Diapositiva de análisis de proyecto 5
 “
Guia de la OCDE para
Prueba de productos
químicos
 Principio

Diapositiva de análisis de proyecto 5

Los peces se exponen a

la sustancia de ensayo
preferiblemente durante
un período de 96 horas.
Las mortalidades son
registradas a las 24, 48,
72 y 96 horas y la (LC50)
cuando sea posible.
 Validez de la prueba

Diapositiva de análisis de proyecto 5

Cualquier desviación de los criterios de validez
En los controles, la
La medición mortalidad no debe y la directriz debe ser informada.
analítica de las ser >10% (o 1 pez,
concentraciones de si se analizan <10
prueba es peces de control) al
obligatoria final de la
exposición

La concentración de
En todos los
oxígeno disuelto
recipientes de
debe ser ≥60% del
prueba durante
valor de saturación
toda la exposición
del aire
Descripción del
método
 Equipos y recipientes

Diapositiva de análisis de proyecto 5

Se puede usar cualquier
vaso, acero inoxidable u
➔ Medidor de oxígeno otros recipientes
químicamente inertes.
➔ Medidor de pH
➔ Medidor de luz
Para productos químicos
➔ Equipos adecuados para el control de la de prueba volátiles, se Los tubos para
deben tomar medidas dosificación deben estar
T°. hechos de material inerte
específicas adicionales
➔ Equipo para determinar la dureza del (OCDE, 2018)
agua.
➔ Equipos para determinar el (COT) y /o la
(DQO)
Al probar productos
➔ Equipo para la determinación de la [C] del Las dimensiones de los
químicos de prueba
recipientes deben ser
producto de prueba en la sln de prueba difíciles, se debe
adecuados para
consultar el Documento
➔ Equipo para mantener la T° del agua y el mantener a los peces
de orientación No. 23
libres de estrés.
contenido de O2 (OCDE, 2019).
Los recipientes de prueba
➔ Depósitos de material químicamente inerte
deben colocarse al azar en
el área de prueba y
protegerse de
perturbaciones no
deseadas.
 Selección de especies
Diapositiva de análisis de proyecto 5
Requisitos reglamentarios
• Productos químicos industriales, Edad y tamaño del pez
farmacéuticos, biocidas o
fitosanitarios, etc.
Los peces deben ser juveniles y originarse
de la misma fuente y población para
garantizar la uniformidad. El pez debe ser
Escenarios de exposición ambiental de la misma edad (si se desconoce, se
• Especies de agua fría (<20°) , puede estimar a través del tamaño) y
templada o cálida (18°-22°), tener una apariencia normal.
agua dulce o estuarios/peces
marinos.
 Anexo 2

Diapositiva de análisis de proyecto 5

Diapositiva de análisis de proyecto 5
Pimephales
Danio rerio Cyprinus carpio
promelas

Lepomis
Oryzias latipes Poecilia reticulata
macrochirus
 Tenencia de los peces
Diapositiva de análisis de proyecto 5
Inmediatamente antes del comienzo de la
prueba. La tenencia de pescado debe
realizarse en las siguientes condiciones:

 Fotoperiodo: apropiado para la especie.

 Temperatura: apropiada para la especie.
 Concentración de oxígeno: al menos 80%
del valor de saturación del aire.
 Alimentación: 3 veces/semana o diariamente
hasta 24-48 h antes de que comience la
exposición. Se puede dar de comer a la
saciedad.
 Medio de prueba

Diapositiva de análisis de proyecto 5

La calidad del agua se considera buena, si los peces sobrevivirán durante la cría,
la aclimatación y las pruebas sin mostrar signos de estrés. La dureza y el pH
totales deben estar dentro del rango óptimo para las especies de peces
seleccionadas.
Procedimiento
 Condiciones de exposición
Diapositiva de análisis de proyecto 5
Duración: 96 horas.
Temperatura: la temperatura del
agua no debe diferir en más de 2
° C entre los recipientes de
prueba o entre días sucesivos en
cualquier momento durante la
exposición.
Carga: para peces de agua
dulce, se recomienda una carga
Luz: intensidad de 10-20 μE / m2
/ s, 540-1000 lux o 50-100 ft-c
máxima de 0,8g de pescado de (niveles ambientales de
peso húmedo /L laboratorio).
Concentración de oxígeno: no
menos del 60% del valor de
saturación del aire. La aireación
Alimentación: ninguna.
se puede utilizar siempre que no
conduzca a una pérdida de la
sustancia de prueba.
Perturbación: las perturbaciones,
como la vibración o el ruido
excesivos, que pueden cambiar
el comportamiento de los peces
deben evitarse o reducirse en la
medida de lo posible.
Diapositiva de análisis Manejo
de proyecto
de los peces5
Número
 Al seleccionar el rango de [C] de prueba
Considerar todas las fuentes de información como las
predicciones dentro del dominio de aplicabilidad.
7 Peces
 En caso de que dichos datos no estén disponibles
Se debe considerar una prueba de detección de rango con
peces, preferiblemente con la misma especie. En este caso,
Distribución No réplica en uso de la [Cumb]
aleatoria tanque de prueba
 No es un requisito obligatorio
Identificar una [Cmax] - 0% de mortalidad ni una [Cmin] -
100% de mortalidad.
[C] de prueba [C] de control
 Para la prueba definitiva
Se utilizan al menos 5 (C] en una serie geométrica con un
factor que preferiblemente no exceda 2.2.
 Controles
Diapositiva de análisis de proyecto 5

La frecuencia de las determinaciones analíticas y mediciones

se recomienda hacer inmediatamente en muestras frescas
 Observaciones y registro

Diapositiva de análisis de proyecto 5

Se realizan 2 observaciones - 24h del
Los peces se consideran Los peces sobrevivientes de El tamaño individual, debe
estudio, 3h entre observaciones.

Sacrificio:

Medición de peces:
Mortalidad:
muertos si no hay los grupos de tratamiento medirse antes del inicio de
movimiento visible se sacrifican al final de la la exposición en al menos
En los días 2 a 4 de la prueba, todos los exposición, los peces de una submuestra de 10
control sobrevivientes no peces del tanque.
buques con peces vivos deben requieren la eutanasia, pero
no se deben usar en otra
inspeccionarse 2 veces/día (mañana y prueba.
tarde). Se observan mortalidades y
anomalías visibles con respecto al
equilibrio, apariencia, comportamiento
ventilatorio y Se registran los
comportamientos de natación. Si es
posible, se pueden informar signos
clínicos adicionales.
 Datos e informes

Diapositiva de análisis de proyecto 5

Sustancias mono
constituyentes
Prueba química
Sustancias
multiconstituyentes

Prueba del pez Nombre y tamaño

Informes de
prueba

Condiciones de la
prueba

Resultados
 “
Prueba de toxicidad aguda en
peces, Agua dulce y marina
 Especies usadas

Diapositiva de análisis de proyecto 5

La trucha arcoiris
 Agua dulce
Diapositiva de análisis de proyecto 5

Salmo salar Pez luna azul Bagre de canal Trucha de arroyo

Carpa común Salmón coho Carpita cabezona

 Agua salda
Diapositiva de análisis de proyecto 5

Pejerrey del Carnero cabeza Pejerrey

Atlántico de oveja plateado
 Principio

Diapositiva de análisis de proyecto 5

Determinar las curvas de

concentración-respuesta para la
mortalidad de peces. Las LC50 y los
intervalos de confianza del 95%
para cada especie probadas las 24,
48, 72 y 96 h en un sistema
estático.
 Prueba de rango o prueba de límite
Diapositiva de análisis de proyecto 5

Las pruebas definitivas pueden ser renunciadas si las pruebas de

límite con al menos 30 organismos muestran que los niveles de
LC50 son >1,000 mg/L, se puede analizar cuando las [C]
ambientales estimadas sonno se espera que exceda los 100
mg/L(ppm)
 Información de la sustancia de prueba
Diapositiva de análisis de proyecto 5

El material a ser probado debe ser de grado técnico a menos

que la prueba está diseñada para evaluar una mutación, mezcla
o efluente. El grado de pureza debe registrarse para
ingredientes técnicos y mezclas. El porcentaje de cada impureza
debese informará y los porcentajes deben sumar 100 %.
 Validez de la prueba

Diapositiva de análisis de proyecto 5

Control máximo permitido o que

solvente la mortalidad de control es del
10% (o 1 mortalidad si 7 a 10 peces de
control son utilizados) por un período de
prueba de 96 h. Si la prueba continúa
más allá de las 96 h, la mortalidad
adicional máxima permisible es del 10
por ciento.
Descripción del
método
 Equipos

Diapositiva de análisis de proyecto 5

Tanques de
material
Equipo para químicamente
Aparato adecuado
determinar la inerte y adecuado
para el control de la
dureza del agua, para la capacidad
temperatura
etc. para permitir los
niveles de carga
recomendados
Diapositiva de análisis de proyecto 5
Agua superficial o subterránea limpia, agua de mar (para estuarios o especies
marinas), y el agua reconstituida son aceptables como dilución agua. El agua
clorada no debe usarse porque algunas formas de La cloración son difíciles de
eliminar adecuadamente. Si agua del grifo des clorada se utiliza, luego se debe
realizar un análisis diario de cloro. Reconstituido o se prefiere agua natural.

El análisis químico del agua utilizada en las pruebas debe incluir lo siguiente
elementos reductores y limitaciones en las concentraciones máximas basadas en
menos pruebas bianuales
Diapositiva de análisis de proyecto 5
 La salinidad debe ser de

Diapositiva de análisis de proyecto 5 20 ± 5 ppt para las

especies estuarinas.

En las pruebas de flujo

La dureza debe oscilar
marino, la salinidad debe
entre 40 y 180 mg / L
registrarse en el inicio de
como CaCO 3 para
la prueba, el día 4, y si se
especies de agua dulce.
extiende, los días 7 y 14.

Se debe medir la dureza

o salinidad del agua,
según corresponda al
comienzo de cada
prueba.
Diapositiva de análisis de proyecto 5
El agua destilada debe usarse en making
soluciones madre de la sustancia de
prueba. Si el vol existente es superior al
10% del vol de la solución de prueba, se
debe usar agua de dilución. Si un
portador, es decir, un solvente y/o En las pruebas de flujo
dispersante, es absolutamente necesario La dureza debe oscilar marino, la salinidad debe
para disolver la sustancia de prueba, la entre 40 y 180 mg / L registrarse en el inicio de
cantidad utilizada no debe exceder el como CaCO3 para la prueba, el día 4, y si se
volumen mínimo. especies de agua dulce extiende, los días 7 y 14

La salinidad debe ser de Se debe medir la dureza o

20 ± 5 ppt para las salinidad del agua, según
especies estuarinas. corresponda.Al comienzo
de cada prueba
Diapositiva de análisis de proyecto 5
Si el volumen de existencias es superior
100% por ciento del volumen de la
solución de prueba, se debe usar agua
de dilución. Si un portador, es decir, un
Los disolventes preferidos son solvente y / o dispersante, es
dimetilformamida, trietilenglicol,metanol, absolutamente necesario para disolver la
acetona o etanol. Se debe evitar el uso sustancia de prueba, la cantidad utilizada
de solventes si es posible no debe exceder el volumen mínimo

Las concentraciones de solvente

seleccionadas deben mantenerse
constantes en el control de solventes y
todas las soluciones de prueba. La
concentración de solvente en alta Este
nivel de tratamiento debe usarse en el
control del solvente.
Diapositiva de análisis de proyecto 5
Si el volumen de existencias es superior 100% por ciento del volumen de la solución de prueba, se debe
usar agua de dilución. Si un portador, es decir, un solvente y / o dispersante, es absolutamente necesario
para disolver la sustancia de prueba, la cantidad utilizada no debe exceder el volumen mínimo.

El pH debe medirse en cada réplica al comienzo de la prueba y cada 24 h a partir de entonces.

El pH debe controlarse en pruebas de prueba bajas, medias y altas cocentraciones y debe permanecer>
6.0 y <8.0 para pruebas de agua dulce y> 7.5y <8.5 para pruebas marinas.

El pH puede ajustarse en soluciones stock para que coincida con el pH de dilución de agua si el cambio
de pH no afecta la estabilidad del compuesto en agua. Se pueden usar HCl y NaOH para este ajuste si se
justifica.

El pez debe ser de tamaño normal y apariencia para su edad. Todos los peces deben ser de la misma
edad, Los peces capturados pueden ser utilizados para satisfacer las pautas de prueba si el tamaño,
edad, y se satisfacen los requisitos de fuente
Diapositiva de análisis de proyecto 5
 Datos e informes

Diapositiva de análisis de proyecto 5

El acumulativo el porcentaje de
mortalidad para cada período de
exposición se representa frente a
la concentración en papel
logarítmico. Luego se emplean
procedimientos estadísticos
normales calcular el LC50 para el
período de exposición apropiado.
Límite de confianza se debe
incluir su (CI) con p = 0,95 para
los valores calculados de LC50
 Referencias

Diapositiva de análisis de proyecto 5

OECD (2019), Test No. 203: Fish, Acute Toxicity Test, OECD Guidelines for the Testing of
Chemicals, Section 2, OECD Publishing, Paris,
https://doi.org/10.1787/9789264069961-en

EPA (2016). Ecological Effects Test Guidelines OPPTS 850.1075

Fish Acute Toxicity Test, Freshwater and Marine. Retrieved from
https://www.regulations.gov/document?D=EPA-HQ-OPPT-2009-0154-0035
Gracias