2.7.

Inhibidores
Enzimáticos
 ¿Qué son?
 Las enzimas pueden ser reguladas por otras moléculas que aumentan o
bien disminuyen su actividad. Las moléculas que aumentan la actividad de
una enzima se conocen como activadores, mientras que aquellas que
disminuyen la actividad de una enzima se llaman inhibidores.
 Hay muchas clases de moléculas que bloquean o promueven la función
enzimática y que la afectan por distintas rutas.
 La unión de un inhibidor puede impedir la entrada del sustrato al sitio
activo de la enzima y/u obstaculizar que la enzima catalice su reacción
correspondiente. La unión del inhibidor puede ser reversible o irreversible. 
 Inhibidores Reversibles
 Los inhibidores reversibles se dividen en grupos de acuerdo con su comportamiento
de unión.
 1.-Un inhibidor puede unirse a una enzima y bloquear la unión del sustrato, por
ejemplo, al pegarse al sitio activo. Esto se conoce como  inhibición
competitiva porque el inhibidor "compite" con el sustrato por la enzima. Es decir,
solo el inhibidor o bien el sustrato puede estar unido a la enzima en un momento
dado.
 Si un inhibidor es competitivo, disminuirá la velocidad de reacción cuando no hay
mucho sustrato, pero si hay mucho sustrato, este "ganará". Es decir, la enzima de
cualquier forma puede alcanzar la velocidad máxima de reacción siempre que haya
suficiente sustrato. En ese caso, casi todos los sitios activos de casi todas las
moléculas de enzima estarán ocupadas por el sustrato en lugar del inhibidor.
 El inhibidor forma un complejo enzima-inhibidor equivalente al complejo enzima-sustrato:

 Como hay un equilibrio, entonces la rapidez de ambas reacciones se iguala:

R1 = R-1
por lo que:
k1[ E ][ I ] = k-1[ EI ]
de aquí que:
donde KI es la constante de disociación de EI (o constante de inhibición). Esta constante se usa para
describir cuán fuerte se une el inhibidor a la enzima.
 De acuerdo a esta expresión,

por lo que [ EI ] es directamente proporcional a [ I ] e inversamente proporcional a K I. 

O sea, a mayor valor de KI , más débil la unión del inhibidor con la enzima, el complejo EI se disocia
fácilmente, y el foco activo vacante puede estar disponible para unirse a su sustrato.
No hay reacción productiva mientras el inhibidor se une a la enzima,por lo que la actividad de la enzima
declina.
El efecto del inhibidor competitivo en la actividad enzimática se revierte por un aumento en la
concentración del sustrato: a altas concentraciones todos los focos activos se combinan con el sustrato
y la actividad enzimática se normaliza.
La Vmax se mantiene constante con o sin inhibidor competitivo. Sin embargo, cuando está presente el
inhibidor Km aumenta y Vmax nunca se alcanza:
Por la gráfica de Lineweaver Burk observamos que, como la inhibición competitiva no
afecta la Vmax: el intercepto en "y" (1/Vmax) es identico para todas las posibles
concentraciones del inhibidor competitivo; todas la líneas intersectan el el mismo
punto en el eje de "y":

vo = Vmax[S]/Km.
 Como la rapidez inicial es proporcional a Vmax/Km, la presencia del inhibidor afecta
la pendiente de la línea de la gráfica de Lineweaver-Burke, que es precisamente el
recíproco de Vmax/Km,o sea,(Km/Vmax). El valor de la pendiente aumenta. También
hay un aumento en Km según aumenta [ I ].
 Aumentando [ I ] causa un aumento en Km/Vmax. Por lo tanto, en la inhibición
competitiva se afecta la pendiente pero no hay efecto en Vmax.
 2.-En la inhibición no competitiva, el inhibidor no bloquea la unión del sustrato
con el sitio activo, sino que se pega a otro sitio y evita que la enzima haga su
función. Se dice que esta inhibición es "no competitiva" porque el inhibidor y el
sustrato pueden estar unidos a la enzima al mismo tiempo.
 Si un inhibidor es no competitivo, la reacción catalizada por la enzima jamás llegará
a su velocidad de reacción máxima normal, incluso en presencia de mucho sustrato.
Esto se debe a que las moléculas de enzima que están unidas al inhibidor no
competitivo están "envenenadas" y no pueden hacer su función,
independientemente de la cantidad disponible de sustrato.
 La unión del inhibidor afecta la configuración tridimensional de la enzima y
bloquea la reacción. Este tipo de inhibidor no compite directamente con el
sustrato para unirse a la enzima (no afecta la unión ES), por lo tanto, este tipo
de inhibición no es reversible cuando aumenta la concentración del sustrato.
 Esta inhibición disminuye la Vmax según aumenta [ I ], pero no afecta Km (la
enzima puede unirse al sustrato):

 Esto implica que se afecta la pendiente Km/Vmax y el intercepto en "y" en la

gráfica de Lineweaver Burk:

 Las líneas de diferentes [ I ] intersectan en puntos distintos en "y". Sus

pendientes son diferentes, pero es el mismo Km en todos los casos (intersectan
el mismo punto en "x").
 Inhibicion Incompetitiva: el inhibidor se combina sólo con ES (no con la
enzima), por lo que el inhibidor ejerce su efecto sólo a altas concentraciones de
sustrato en las que hay gran cantidad de complejo enzima-sustrato (ES). Por lo
tanto, variando la [S] no afecta o evita la unión con el inhibidor. Por otro lado, es
evidente que el sustrato y el inhibidor se combinan con la enzima en lugares
diferentes.
 A bien baja concentración de sustrato ( [S]--->0), la enzima está libre (E).
Como el inhibidor no se combina con E, éste no afecta la velocidad, asi
como tampoco la pendiente Km/Vmax, por lo que las pendientes son
independientes de la concentración del inhibidor. Sólo se afectan los
interceptos en "y" (1/Vmax) y en "x" (-1/Km) . Como resultado se obtienen
una serie de líneas paralelas cuando se usan diferentes concentraciones del
inhibidor.
 Inhibidores Irreversibles
 El inhibidor se une covalentemente a la enzima, casi siempre a un grupo de
la cadena lateral de los aminoácidos en el foco activo. La enzima queda
inactiva permanentemente.
 Los inhibidores irreversibles suelen contener grupos funcionales reactivos
como mostazas nitrogenadas, aldehídos, haloalcanos o alquenos.
 Reaccionan con un grupo químico de la enzima, modificándola covalentemente. 
 Sus efectos dependen del tiempo de actuación del inhibidor.
Bloquean unión al sustrato
Inhiben actividad
 Por lo general son altamente tóxicos.
 Casi todos los inhibidores enzimáticos irreversibles son sustancias tóxicas (naturales
o sintéticas).
Penicilina inhibe la síntesis de la pared bacteriana
Aspirina inhibe la síntesis de PG
 Gases nerviosos: diisopropil fluorofosfato (DIFP), inhiben neurotransmisores Hg2+,
Pb2+ , CN- , As
 Por ejemplo, la aspirina o ácido acetilsalicílico (ASA) inhíbe
irreversiblemente la acción de la sintetasa de prostaglandina:

 Algunas prostaglandinas producen dolor e inflamación. Al quedar

bloqueada su síntesis se reduce la inflamación y se alivia el dolor.