PREPARACIÓN DE

MEDIOS DE CULTIVO
EQUIPOS E INSTRUMENTOS DE
LABORATORIO DE
MICROBIOLOGÍA.
PLACAS PETRI
 Es un recipiente de
cristal o plástico, con
una cubierta de la
misma forma.

 Se emplea en
microbiología para el
cultivo de bacterias,
mohos y otros
microorganismos.
ASAS DE DRIGALSKI

 Se utilizan para la
extensión de
microorganismos sobre
la superficie de un
cultivo en una placa
petri.
PIPETAS.

 Las pipetas se emplean

para medir el volumen
de un líquido, se
fabrican de vidrio y
diferentes tamaños.

 Pueden tener una o dos

marcas de enrase.
PROPIPETA.

 La propipeta es un
dispositivos que se usan
para succionar y verter
líquidos a través de una
pipeta, son de diversas
formas y por lo general
se fabrican de plástico o
goma.
 MICROPIPETA.

 La micropipeta puede
transferir volúmenes
variables de unos pocos
mililitros o microlitros
de un líquido en forma
exacta.
MATRAZ DE AFORO.
 Un matraz de aforo es
un recipiente de fondo
plano con forma de
pera que tiene un
cuello delgado.

 El cuello tiene una

línea de enrase que
indica el volumen de
un líquido.
AUTOCLAVE ESTERILIZADOR.
 Es un recipiente de
presión metálico que
permite trabajar a alta
presión para realizar
una cocción o
esterilización con
vapor de agua.
 La presión elevada
permite temperaturas
superiores a los 100 °C.
BALANZA ANALÍTICA.
 Instrumento que se utiliza para medir masa de un
cuerpo en comparación con la de otros cuerpos, tiene
una precisión comprendida entre 0,1 y 0.05 mg, y carga
máxima entre 50 y 200 gr.
ORBITAL SHAKER
 Dispositivo que se emplea
para agitar líquidos o
pulpas en forma circular,
dispuesto en matraces
Erlenmeyer.
 MICROSCOPIO ÓPTICO.

 Microscopio basado en
lentes ópticos, utiliza
luz o fotones y se
emplea en diversas
áreas como la
microbiología, la
química, entre otras
tantas. Puede ampliar
un objeto hasta 1000
veces.
 MICROSCOPIO DE FLUORESCENCIA
 La imagen observada es el
resultado de la radiación
electromagnética emitida
por las moléculas que han
absorbido la excitación
primaria y reemitido una
luz con mayor longitud de
onda.
 Se usa para detectar
sustancias con
autofluorescencia.
CENTRÍFUGA
 Una centrífuga es una
máquina que pone en rotación
una muestra para acelerar por
fuerza centrífuga la
decantación o sedimentación de
sus componentes o fases
(generalmente una sólida y una
líquida), en función de su
densidad.
 Existen diversos tipos de estos,
comúnmente para objetivos
específicos.
TUBOS DE ENSAYO

 Permite contener
pequeñas muestras
líquidas y realizar
reacciones en pequeña
escala
TUBOS EPPENDORF
 Es un pequeño contenedor
cilíndrico de plástico, con un
fondo cónico y típicamente
una tapa unida al cuerpo del
tubo para evitar su
desprendimiento.

 Son empleados por ejemplo

en centrifugación
ESTUFA DE SECADO
 La estufa de
secado es un
equipo que se
utiliza para secar
y esterilizar
recipientes de
vidrio y metal en
el laboratorio.
BOMBAS PERISTÁLTICAS
 Las bombas peristálticas son
típicamente usadas para
bombear fluidos limpios o
estériles, o para bombear
fluidos.
CAMPANA DE FLUJO LAMINAR
 Una campana de flujo
laminar es un recinto
que emplea un
ventilador para forzar el
paso de aire a través de
un filtro y proporcionar
aire limpio a la zona de
trabajo libre de
partículas de hasta 0.1
micras.
CELDA PERTROFF-HAUSER
 Se utiliza para el
recuento de células
vivas y muertas
presentes en una
muestra.
RECUENTO DE BACTERIAS
Método utilizado : Petroff Hausser

Ecuación 1: Concentración de células

PREPARACIÓN DE MEDIOS
DE CULTIVO LÍQUIDOS
 Cultivo y crecimiento de microorganismos

1.- Los requerimientos nutricionales

2.- Medios de cultivo:composición y preparación
3.- Obtención de cultivos puros
4.- Mantenimiento y conservación de los microorganismos
5.- Cultivo y colecciones de cultivo
6.- Definición de crecimiento
7.- Métodos para medir el crecimiento microbiano
8.- Curva de crecimiento
9.- Factores físico-químicos que influyen en el crecimiento
 1.- Requerimientos nutricionales
• Macronutrientes.

• Carbono

• Nitrógeno

• Fósforo

• Azufre

• K+

• Ca2+

• Mg2+

• Na+

• Fe2+ y Fe3+
• Micronutrientes (g/L)

a) Cobalto
b) Cinc
c) Molibdeno
d) Manganeso
e) Cobre

•Factores de crecimiento

a) Aminoácidos
b) Vitaminas:
- p-aminobenzoico. Ácido fólico. Ácidos nucleicos
- Biotina (B8): Ácidos grasos
- Niacina: NAD
- Riboflavina: FAD y FMN
- Piridoxina (B6): transformaciones de aa
- Tiamina (B1)
- Cobalamina (B12): Síntesis de desoxirribosa
Tipos nutricionales según la fuente de carbono y energía
2.- Medios de cultivo: composición y preparación
COMPOSICIÓN DE MEDIOS DE CULTIVO
 Agregar la cantidad de reactivo, según receta

Disolver en agua destilada y llevar a autoclave.

Sacar matraces y materiales del autoclave, proceder a inocular

Llevar matraces a orbital shaker

SEGUIMIENTO DE CULTIVOS EN MATRACES
 pH

 Eh

 Observación microscopio

 Observación matraces, ejemplo turbidez.

Clasificación de los microorganismos de acuerdo a su tolerancia al O2

a) Aerobios estrictos
b) Anaerobios estrictos
c) Anaerobios facultativos
Diluciones seriadas y siembra en placa

0.1 ml 0.1 ml