Método común de extracción

Solventes: inversión de tiempo

y reactivo

Incompatible c/ propósito de
cosecha de uva en punto
óptimo
Nvos. métodos
Responsables
Gradiente pH
de color
Antocianinas Mezcla de disolventes
Extracción líquida presurizada
Fluidos supercríticos
[ANT] p/determinar
momento de cosecha. Sin
embargo, no son los
Extracción asistida por
únicos compuestos. microondas (EAM)

+ eficiencia,
-t extracción,
Estudios previos con fenoles - disolvente
Variable más importante: disolvente +automatización.
Materia prima:
B
Variedad: Tintilla de Rota Optimización
Obtención manual del hollejo Software Minitab v10.0
Homogenización Diseño factorial fraccional (2 2-6).
Congelación -20°C Se llevaron a cabo 16 extracciones (X
duplicado)
A
Extracción

C
Variables: Método de referencia
Disolvente: MeOH:H2O (50-80%)
Agitación magnética
T: 50-100 °C
MeOH: Ác. fórmico (95:5)
t: 5-20 min 2 ml/g de piel
P: 100-500 W t: 5h
Volumen de disolvente: 25-50 ml T: ambiente

Extractor de micrrondas
Mod. Ethos 1600 D
Análisis HPLC
 Estudios previos p/establecer estabilidad a T:
2g muestra+25 ml MeOH:H2O (5:5)
Estabilidad t: 20 min
P: 500 W

Figura1. Recuperación de 11 antocianinas cuantificadas en el extracto a diferentes temperaturas.

Fuente: Lizaid et al., 2011.

1, delfinidin-3-glucósido; 2, cianidin-3-glucósido; 3, petunidin-3-glucósido; 4, peonidin-3-glucósido; 5, malvidin-3-

glucósido; 6, peonidin-3-acetilglucósido; 7, malvidin-3-acetilglucósido; 8, malvidin-3-p-coumaroilglucósido; 9,
malvidin-3-cafeilglucósido; 10, petunidin-3-p-cumaroilglucósido; 11, malvidin-3-cumaroilglucósido.
 Desarrollo del método

Tabla1. Condiciones y resultados de las extracciones basadas en el diseño experimental

factorial fraccional

Fuente: Lizaid et al., 2011.

Variables:
Disolvente: MeOH:H2O (50- t: 5-20 min
80%) P: 100-500 W
Agitación magnética Volumen de disolvente: 25-50 ml
T: 50-100 °C
 Antocianinas de tipo glucósido
Variables que más influyeron: composición disolvente y t

Fig. 2 Principales efectos en la recuperación de compuestos tipo glucósido.

Fuente: Lizaid et al., 2011.
 Antocianinas derivados de acilo
Variables que más influyeron: composición de disolvente y T

Fig. 3 Fig. 2 Principales efectos en la recuperación de antocianinas derivados de acilo

Fuente: Lizaid et al., 2011.

Interacción más relevante de la T con volumen de extracción:

Si T ↑, el % de recuperación ↓, cuando el volumen de extracción es de 50

ml, no así con 25 ml (efecto contrario).

Se comprobó estabilidad con 25 ml, debido a que al utilizar 50 ml se

suministraba mayor energía.

Se decide optimizar la variable más significativa, composición del

disolvente y t extracción (favorece extracción en ambos casos, debe ser
optimizado).

Se fija el resto de variables en condiciones más favorables:

Agitación
T: 100 °C
P: 500 W
Vol de extracción: 25 ml
 Optimización de la composición del disolvente

Ensayos con [MeOH] de 20, 30, 40 y 50%

Fig. 4 Recuperación de 11 antocianinas cuantificadas en el extracto usando diferentes

concentraciones de metanol
Fuente: Lizaid et al., 2011.
 Optimización del tiempo de extracción

Se ensayaron tiempos de 2.5, 5, 7.5, 10, 15 y 30 min

Fig. 5 Recuperación de 11 antocianinas cuantificadas en el extracto a diferentes tiempos de extracción

Fuente: Lizaid et al., 2011.

Entre 5 y 15 min no hay diferencia significativa

Método final de extracción

1
2 g de hollejo

2 Disolvente: MeOH:H2O
40%

3
T: 100°C

5
P: 500 W

6
 25 ml de disolvente

7
5 min

8
c/ agitación
Comparación con método tradicional

Tabla 2. cuantificación de antocianinas utilizando el método desarrollado (EAM) y el

método de referencia.

Fuente: Lizaid et al., 2011.

Liazid A., Guerrero R.F. , Cantos E., Palma M. and Barroso C. G. (2011).
Microwave assisted extraction of anthocyanins from grape
skins. Journal Food Chem. 124: 1238-1243