ENZIMOLOGIA

CURSO DE BIOLOGIA CELULAR Y MOLECULAR

KINESIOLOGIA
2019
Sistema Organizado
Múltiples funciones
Interacciona con su medio
Consume nutrientes y elimina desechos
Obtiene y utiliza energía
pH constante
Temperatura constante
Presión constante
 Calor

Función
Reacciones químicas acopladas e interconectadas,
organizadas en vías específicas,
tanto de degradación (catabolismo), como de
Síntesisis (anabolismo),constituidas por múltiples
etapas,y sometidas a diferentes mecanismos de Desechos
regulación.
CO2, urea, amonio, etc
Obtención y utilización de energía química
para la realización de funciones vitales específicas,
incluyendo la síntesis de sus constituyentes
Nutrientes, Oxígeno
Proteínas, carbohidratos, grasas
 +

Calor

Reacción catalizada
Energía

P Complejo enzima-sustrato
Coordenada de la reacción
A B C D E F A B C D E F

X* Y* Z* A B C D E F

A B C D E F P* Q* R*

X X

A A
B B
E E

Z Z
D C D C W
 e1 e2 e3 e4 e5
A B C D E F

Propiedades fundamentales de las enzimas

Especificidad

Eficiencia catalítica

Regulación

Las velocidades de las reacciones enzimática deben variar de acuerdo a

Variaciones en las concentraciones de los sustratos

Variaciones en los requerimientos de los productos

Dado que la reacción ocurre en el sitio activo de la enzima, la máxima velocidad se

alcanzará cuando toda la enzima esté saturada con su sustrato
 Enzimas en Medicina

Patologías: Anemias producidas por deficiencias enzimáticas,

Efermedades del almacenamiento del glucógeno
Albinismo, etc

Diagnóstico: Pruebas analíticas (glicemia, actividades enzimáticas en suero)

Terapéutica: Corrección de deficiencias (Ej. lactasa)

Enzimas como blancos terapéuticos (Hipertensión, SIDA, etc)
 Algunos ejemplos de enzimas de importancia diagnóstica

Enzima Niveles plasmáticos elevados en

Fosfatasa ácida Cáncer prostatico

Fosfatasa alcalina Raquitismo, cáncer de hueso

Alanina aminotransferasa Hepatitis, ictericia

Aspartato aminotransferasa Infarto al miocardio

Amilasa Pancreatitis aguda

-Glutamil transferasa Hepatitis, daño hepático alcohólico

Complejo enzima-sustrato

Unión del sustrato

Catálisis

Algunas enzimas requieren,

adicionalmente, algún tipo de
cofactor, que puede ser
orgánico o inorgánico. Los
tipo orgánico son derivados de
vitaminas y se definen como
coenzimas. Los de tipo inorgánico
son iones metálicos ( iones de manganeso,
cobre,magnesio, etc).
 actividad enzimática
La actividad enzimática depende del
estado de ionización de los grupos que
participan en el proceso catalítico
(unión del sustrato y su posterior
transformación en los productos de la
reacción)

pH óptimo
pH

La actividad enzimática es
determinada por los efectos de la
actividad enzimática

temperatura sobre la velocidad de

reacción y sus efectos estructurales
sobre la proteína enzima. En la parte ascendente
de la curva, predominan los efectos cinéticos (la velocidad
aumenta con la temperatura), mientras que en
la porción descendente, priman los efectos estructurales
(la velocidad disminuye con la temperatura).

Temperatura
 IONES METALICOS

En algunas reacciones enzimáticas participan iones metálicos, tanto monovalentes

como Na+ o K+ y, especialmente, bivalentes como Mg2+, Mn2+, Ca2+, Zn2+, Ni2+,
Cu2+, Fe2+. En algunos casos, un complejo sustrato-metal es el verdadero sustrato
de la enzima.

Los iones metálicos pueden favorecer una reacción enzimática, mediante:

 localización del sustrato en la orientación apropiada en el sitio activo

 polarización de enlaces susceptibles

 estabilización de un intermediario de carga negativa

 participación en procesos de óxido-reducción

Coenzima Vitamina Funciones

NAD, NADP Niacina oxido reducciones

FMN, FAD Riboflavina oxido reducciones
TPP Tiamina transferencia de aldehido
PLP Pirodixina transferencia de grupos amino
Biotina Biotina carboxilación dependiente de ATP,
transferencia de carboxilo
Tetrahidrofolato Acido fólico transferencia de un carbono
Coenzima A Acido pantoténico transferencia de acilos
Cobalamina| Cobalamina reacomodaciones intramoleculares,
transferencia de metilos
Acido lipoico No es vitamina oxidación de hidroxialquilo a partir
de TPP y transferencia subsiguiente
como acilo
 Coenzima

AX Co Co BX
e1 e2

A CoX CoX B

Grupo prostético

MX Co NX
e
M CoX N
 glucosa amino ácidos

piruvato

ácidos grasos Acetil-CoA cuerpos cetónicos

colesterol

triglicéridos fosfolípidos Hormonas esteroidales

eicosanoides

CO2 + H2O + energía (ATP) sales biliares

 Vmax
v

Vmax [S] Vmax/2 Vmax [S]n

v = v =
Km + [S] (S0.5)n + [S]n

0
0 S0.5
[S]
Condición: Saturación Semi-saturación
[S] para lograrla infinita igual a Km o S0,5
Velocidad asociada Vmax Vmax/2
Si Km = [S] Vmax
o v=
Si SO.5 = [S] 2
 Vmax
+ v

+
Vmax/2

_
_
0
0 S0.5
[S]
En el rango indicado,
la cooperatividad le otorga a la enzima
una mayor sensibilidad a las variaciones
en las concentraciones del sustrato,
reflejado por un mayor Δv
como respuesta a un mismo Δ[S]
 S s S s s S s s S s s
s s s

Afinidad
por el sustrato
 Enzima e1
Sitio Activo Sitio Activo

Sitio alostérico Sitio alostérico

e1
A B C D E F G H
 Sitio alostérico

Sitio activo Sitio activo

 Efector positivo (activador)
Sitio alostérico

Efector negativo (inhibidor)

 Inhibidores de la acción enzimática
E + S ES E+P
+ +
Kis y Kii
I I
Constantes de equilibrio para la
disociación del respectivo complejo
Kis Kii (EI o ESI)

EI + S ESI
Inhibidor se une sólo a E Inhibidor se une a E y ES
Inhibidor se une sólo a ES

Competitivo Incompetitivo Mixto

Vmax No varía Disminuye Disminuye
Km Aumenta Disminuye Aum, Dism, No varía
 Vmax

velocidad

Glucoquinasa

Vmax

Hexoquinasa

[Glucosa], mM
Km Hex So.5 Gluc