Centro de Estudios Tecnológico Industrial y de Servicios

no. 48 “General Venustiano Carranza”

Exposición 11 de noviembre del 2019

Pruebas de identificación de
susceptibilidad y resistencia
INTEGRANTES
*Xavier Alonso Carrazco Zertuche Prof. Q.F.B. Emma Berenice Herrera
*Regina Azucena Cepeda Piña Ramírez
*Vanessa Lizeth Cepeda Coronado
*Paulina Sarahi Vega Lopez
*Alejandra Marisol Alacantar Tobanche 3 A T.L.Q.
*Carlos Coboch Flores
*Alan Alejandro Barraza Guzman
*Ana Maria Arias Quiroz
Índice
3. ¿Qué es identificación?
4. Resistencia y Susceptibilidad
5. Tres dominios
6. Antibiograma
7. Discos de difucion
8. Pruebas de identificación de susceptibilidad y resistencia
9. Prueba Bacitracina
10. Prueba en bilis esculina
11. NOVOBIOCINA
12. Resistencia en altas concentraciones de sal
13. Prueba de la resistencia a la actidiona
14. Prueba de la arilsulfatasa
15. Prueba de la catalasa
16. Prueba de azul de metileno
17. Referencias

Planteamiento del problema

¿Qué es identificación?

Se entiende por identificación de microorganismos al conjunto de

técnicas y procedimientos que se aplican para establecer la identidad de
un microorganismo. Cada microorganismo tiene diferentes reacciones
cuando se les enfrentan diferentes reactivos, con estas pruebas
podremos decir casi con exactitud de que género y qué especie es.
 Resistencia y Susceptibilidad

Resistencia: La resistencia es una de las capacidades físicas básicas, particularmente aquella que
nos permite llevar a cabo una actividad o esfuerzo durante el mayor tiempo posible. Una de las
definiciones más utilizadas es la capacidad física que posee un cuerpo para soportar
una resistencia externa durante un tiempo determinado.

Susceptibilidad: Susceptible indica la probabilidad que algo suceda, está vinculado a aquello
capaz de ser modificado o de recibir impresión por algo o alguien
 TRES DOMINIOS

*Bacteria: Las bacterias son

microorganismos procariotas que presentan
un tamaño de unos pocos micrómetros

*Archaea: son organismos unicelulares

carentes de núcleo (procariontes)

*Eukarya: organismos formados por

células con núcleo verdadero
 Antibiograma

Las pruebas de sensibilidad bacteriana se llevan a

cabo mediante el antibiograma que sirve para
medir la sensibilidad de una cepa bacteriana a uno
o varios antibióticos. La determinación de la Concentración Mínima
Inhibidora (CMI) es la medida de la sensibilidad
de una bacteria a un antibiótico.
1.- Difusión en agar: Disco placa y E test
2.- Dilución: Medio sólido y Medio líquido
(micro/macrodilución)
3.- Mecanizados y Automatizados

E test

E test
 Discos de difusión

1. Seleccionar las colonias

2. Preparar una suspensión del inóculo
3. Estandarizar la suspensión del inóculo
4. Inocular la placa
5. Colocar discos de antimicrobiano
6. Incubar la placa
7. Medir las zonas de inhibición
8. Interpretar los resultados
Cómo Aplicar los Discos de Antimicrobianos
Coloque los discos con los agentes antimicrobianos dentro de los 15
minutos continuos a la inoculación de la placa MHA. Los discos
pueden ser colocados uno a uno o con un dispensador de discos
multi-canal como se observa en la Figura siguiente:
Pruebas de identificación de susceptibilidad y
resistencia
Procedimiento Imagen
Prueba de la Con un asa estéril toma una o dos
colonias de estreptococo α-
Optoquina hemolíticos.
La sensibidad de la optoquina es una medida de
la fragilidad de la membrana celular bacteriana. Descargar aproximadamente en 1/3 de
La optoquina (clorhidrato de etilhidrocupremia) placa de agar sangre.
se utiliza en una solución acuosa de 1/4000 para
impregnar los discos quedando al final en ellos
5µg de optoquina. Haz un par de estrías en los 2/3
restantes (para tener colonias aisladas
y poder trabajar con ellas si fuera
necesario).

Ejemplo de aplicación Incuba a 37ºC durante 24 horas en una

atmósfera de 5% de CO2
La prueba de la Optoquina (P)
se utiliza para la diferenciación
Fundamento:
de Streptococcus pneumoniae
Streptococcus pneumoniae y Stretococcus viridans Son cocos Gram positivos
(sensible) de otros
que en agar sangre presentan colonias α-hemolíticas. La optoquina inhibe el
estreptococos α- hemolíticos
crecimiento de Streptococcus pneumoniae, mientras que otros estreptococos o
no son inhibtdos o bien presentan una zona pequeña de inhibición alrededor
del disco.
 Prueba Bacitracina
Procedimiento Imagen

Esta prueba puede utilizarse

Seleccionar 3-4 colonias para el estudio
como diagnostico presuntivo en la identificación de
Streptococcus beta hemolítico del grupo A de
Lancefield, ya que, a diferencia de la mayoría de los
estreptococos, suelen ser sensibles a bajas
concentraciones de bacitracina. Con asa bacteriológica o hisopo
esteril,estriar la mitad de la caja para
obtener una siembra pareja o uniforme

Ejemplo de aplicación
*Identificación presuntiva de los Colocar un disco de Taxo A y con unas
estreptococos B-hemolíticos del pinzas flameadas presionar el disco
suavemente para que se adhiera al agar
grupo A Lancefield
Incubar de modo invertido

Fundamento:
Se basa en qué ciertas bacterias son sensibles
a la bacitracina
Prueba en bilis esculina
Procedimiento Imagen
Solubilidad en bilis. Se basa en la capacidad
de determinadas especies bacterianas de lisarse en Se prepara 1 ml de
presencia de sales biliares, las mas utilizadas de las suspensión densa en
cuales son el taurocolato y el desoxicolato de sodio. solución fisiológica de un
Ambas provocan un descenso de la tensión cultivo puro.
superficial, que, unido a la actuación de enzimas
Se divide en dos partes
autoliticos, destruyen la célula.
iguales en tubos
separados.

Se siembra con asa en punta

en el medio con solución salina
Fundamento: Soluble cuando se observa un
aclaramiento del tubo con desoxicolato
Se incuba la muestra a 35
respecto al de la solución fisiológica
Insoluble cuando no hay diferencia de turbidez grados celsius
Ejemplo de aplicación
entre ambos tubos
 NOVOBIOCINA
Sensible: inhibición del desarrollo
con un diámetro mayor o igual a 16
mm.
Procedimiento Imagen
Sembrar una placa de agar Mueller
Hinton con un hisopo embebido en una
suspensión de la cepa o colonia de
bacterias a estudiar.

Tomar el disco de Novobiocina y aplicar

la cepa en el centro del medio de cultivo
Staphylococcus R
Micrococcus S

Incubar las placas

Fundamento
se basa en qué diferentes tipos de
microorganismos son sensibles a la
novobiocina Identificar prueba
 Resistencia en altas concentraciones de sal NaCl

Procedimiento Imagen

Existen microorganismos que

Seleccionar las colonias
pueden coexistir en altas
cantidades de NaCl
Colocar el agar salado manitol y realizar
estrias

Incubar muestra

Identificar
 PRUEBA DE LA RESISTENCIA A LA ACTIDIONA
Procedimiento Imagen

• Esta prueba se utiliza para Seleccionar colonias para el estudio

poner de manifiesto la
capacidad de crecimiento de
ciertas levaduras en medios
con actidiona.
Con asa bacteriológica o hisopo
esteril,estriar la mitad de la caja para
obtener una siembra pareja o uniforme
Se considera la prueba positiva cuando se observa
crecimiento en el medio. Cuando hay inhibición del
crecimiento se considera la prueba como negativa. Incubar de modo invertido

Fundamento:Esta practica se utiliza para

identificar resistencia y susceptibilidad de
levaduras a la actidiona
Idenificar
 PRUEBA DE LA ARILSULFATASA

Procedimiento Imagen
Esta prueba se utiliza principalmente para diferenciar Seleccionar las colonias
ciertas especies de Micobacterias de crecimiento
rápido, capaces de producir suficiente enzima Colocar el agar
arilsulfatasa como para dar la prueba positiva en tres
días, como ocurre con las especies M. fortuitum y M. Incubar muestra
chelonei.
Pone de manifiesto si la micobacteria posee esta Identificar
enzima.

Ejemplo de aplicación:
M. fortuitum y M. chelonei.
PRUEBA DE LA CATALASA
Procedimiento Imagen

Colocar el portaobjeto en
la mesa de trabajo

Colocar una gota de H2O2

Añadir con una asa una

colonia de la bacteria en
estudio

POSITIVO:Formaciòn de burbujas
NEGATIVO:No se forman burbujas
 PRUEBA DE ROJO DE METILO

Se utiliza para la identificación de

existencia en diversos ácidos
 Referencias

• PRUEBA DE LA TUBERCULINA.. (2004, 4 julio). Recuperado 10 noviembre, 2019, de

http://www.fcq.uach.mx/phocadownload/DOCENCIA/MATERIAL-DE-
ESTUDIO/micobacterias/diagnostico/diagnostico.html

• Alba Marina Rueda Olivar. (2019). cocos gram positivo. 2019, Noviembre 10, de LinkedIn Corporation Sitio web:
https://es.slideshare.net/Albamarina7/cocos-gram-positivos-31650030

• https://www.significados.com/susceptible/

• https://slideplayer.es/slide/11783667/

• https://vdocuments.site/sensibilidad-a-la-bacitracina.html

• http://www.fcq.uach.mx/phocadownload/DOCENCIA/MATERIAL-DE-
ESTUDIO/micobacterias/diagnostico/diagnostico.html

• http://www.fcq.uach.mx/phocadownload/DOCENCIA/MATERIAL-DE-
ESTUDIO/micobacterias/diagnostico/diagnostico.html

• https://es.slideshare.net/Albamarina7/cocos-gram-positivos-31650030