Possibilidades de um sistema de produção de

carne in vitro

John Kotowski
Thays Cordeiro
Introdução

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BENEFÍCIOS DA CARNE
● A carne fornece vários nutrientes essenciais
indisponíveis em fontes vegetais:

● Ácidos graxos;
● Ômega-3;
● Vitamina B12;
● Ferro.

Estrutura vitamina B12

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Produção de carne in vitro
● https://www.youtube.com/watch?v=_GgP6jo5DTM

Diferenciação
Crescimento e
Amadurecimento 4
● 35% será cultivada em laboratório;
● 25% são opções veganas.
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Objetivos de um sistema de produção de carne in vitro
● Efeitos negativos consideráveis da produção pecuária

● Os métodos atuais de produção de carne são uma importante fonte de poluição e um consumidor significativo de
combustíveis fósseis, terras e recursos hídricos.

● A produção mundial de carne está contribuindo entre 15% e 24% do total das
emissões atuais de gases de efeito estufa (Criação de pastagem).

● Além do fato de que a produção de carne bovina requer 15500 m3/tonelada de

água. E frango requer 3918 m3/tonelada.

● Não há lógica em contribuir com culturas básicas para a produção ineficiente

de carne, pois aves, suínos e bovinos requer 2 kg, 4 kg e 7 kg de grãos,
respectivamente ( Há muita gente passando fome no mundo).

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Informações sobre o artigo

● Autores: Isha Datar e Mirko Betti

● Canadá
● Fator de impacto: 4,085
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Objetivo da revisão
● Fazer um levantamento sobre alguns fatores variáveis na produção de carne in vitro:

Controle e Tipos de
Manipulação células
Tipos de
Biorreator
andaime

Condições de Cultura
● Limitações à metodologia
● Perspectivas futuras 8
metodologia básica
Os métodos citados no artigo têm um conjunto comum de elementos.
Cada proposta emprega o crescimento de
mioblastos ou células miossatélites em uma
proteína do tipo andaime em um meio de cultura
em suspensão dentro de um biorreator.

● Van Eelen et al. (1999) propôs crescimento

de miócitos em uma malha de colágeno

● Edelman et al. (2005) sugeriu camadas de

colágeno na forma de andaime

Os produtos desses métodos não possuem a estrutura do tecido muscular nativo e, portanto,
só poderiam ser utilizados em produtos à base de carne processada - FINA camada de
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miócitos ( não é 3D) pela limitação de difusão.
tipos de células
● A carne in vitro no artigo é definida como uma cultura de tecido muscular principalmente esquelético

O tecido muscular estriado esquelético constitui a maior parte da musculatura do corpo dos vertebrados,
formando o que se chama popularmente de carne. Essa musculatura recobre totalmente o esqueleto e está presa aos
ossos, daí ser chamada de esquelética.

os tipos de células destinadas a criar esse tipo de tecido são ...

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tipos de células
● Durante o desenvolvimento embrionário, a formação
de tecido muscular começa com mioblastos
mononucleados.

● Os mioblastos se fundem em um miotubo

multinucleado.

● Após o nascimento, o número de núcleos por fibra

muscular são mantidas mínimas, exceto em casos
que necessitam de reparação ou regeneração.

● Nestes casos, as células miossatélites são

responsáveis por gerar novas miofibras ou
contribuindo com mionúcleos adicionais aos já
existentes (reparo e regeneração do tecido
muscular existente)

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tipos de células
● CÉLULAS MIOSSATÉLITES - As células miossatélites são uma proporção muito pequena (1–5%) da
população celular de tecido muscular, e essa porcentagem.

● A porcentagem desses tipos de célula depende da composição das fibras musculares e da idade do
organismo. À medida que um organismo envelhece, o potencial regenerativo de sua população de células
miossatélites também diminui rapidamente.

resultado
● As células que oferecem potencial de regeneração com
miofibras mais longas e uma maior densidade de células
musculares devem ser escolhidas para o trabalho in-
vitro, principalmente a partir de recém-nascidos

● (MAIOR QUANTIDADE DE CÉLULAS

MIOSSATÉLITES) 12
tipos de células
As duas opções viáveis de células analisadas foram …
Células-tronco embrionárias (ES)
Seu potencial regenerativo ilimitado elimina a
necessidade de colher mais células de embriões mas ...
o lento acúmulo de mutações genéticas ao longo
do tempo pode determinar um período máximo de
proliferação
Células Miossatélites
Embora as células miossatélites possuam a
desvantagem de ser um tipo de célula de tecido
muscular raro com potencial regenerativo limitado, Bach
et al. (2003) indicam que elas são a fonte preferida de
mioblastos primários porque recapitulam mais a
miogênese do que as linhas celulares miogênicas
imortais
Células-tronco adultas
As células miossatélites são um exemplo de
célula-tronco adulta com potencial de múltiplas
linhagens.
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tipos de células - capacidade replicativa
● Um Sistema de Produção de Carne in Vitro requer
muitas divisões celulares para o tecido muscular da
cultura em massa, mas a maioria das células possui um
número finito de divisões na cultura antes da morte
celular natural; esse número é denominado limite de
Hayflick.

“ é o número de vezes que uma célula

consegue se dividir antes que o
encurtamento do telômero seja crítico a
ponto de impedir novas divisões”

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tipos de células - capacidade replicativa
O comprimento do telômero corresponde, portanto, ao número de divisões das quais um tipo de célula é capaz. Isso
explica por que uma fonte de recém-nascidos é melhor para a colheita de células miossatélites.

as células ainda possuem telômeros longos

CONSEGUEM SE MULTIPLICAR

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tipos de andaime
● O conceito atual de andaimes na bioengenharia tecidual tenta reproduzir pelo menos parcialmente as funções da
matriz que a célula teria.
● O papel desempenhado pelo scaffold em tecidos artificiais é análogo às funções da matriz e está associado às suas
funções arquitetônicas, características biológicas e mecânica.

NO CASO ESTUDADO : Um andaime ideal teria uma grande área de superfície para crescimento do tecido, seja flexível
para permitir a contração, maximize o nível médio difusão e ser facilmente dissociado da cultura da carne.

*** Um andaime que imita de perto a situação in vivo é o melhor

exemplo: andaimes constituídos de colágeno

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condições de cultura
● Meios de Crescimento:

Soro Bovino
Mioblastos

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condições de cultura Ultroser G
● Meios de Crescimento:

Soro Meio isento

comercial de soro
Mioblastos

● Reduz os custos operacionais e variabilidade do processo;

● E diminui a fonte potencial de agentes infecciosos.
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Ultroser G
● Possui componentes necessários para o crescimento de células
eucarióticas:
○ Vitaminas
○ Hormônios
○ Proteínas

● Maturação;
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Contração
● Músculo esquelético;
Evitando atrofia
○ Diferenciação e morfologia saudável das miofibras;
● In vivo inervado;
● In vitro desnervado;
● Contração mecânica externa;
● Estimulação elétrica:

○ Viável em larga escala;

○ Induz contração internamente;

○ Ajuda na diferenciação e formação de sarcômeros.

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biorreatores
● É necessário haver perfusão adequada de oxigênio durante a semeadura e o
cultivo de células no andaime.

● Os portadores de oxigênio podem ser suplementados ao meio para manter alta

concentrações de oxigênio em solução, semelhantes às do sangue.

a) biorreatores que aumentam o transporte de massa entre o meio de cultura e as

células.

b) o uso de transportadores de oxigênio para imitar o suprimento de oxigênio fornecido

pela hemoglobina

Carreadores : Versões modificadas da hemoglobina e

aqueles que são quimicamente inertes, os
perfluoroquímicos produzidos artificialmente (PFCs).

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 biorreatores

Um possível esquema de produção de carne in vitro: (1) O meio é formulado e mantido em um tanque de alimentação antes
de ser depositado (2) no biorreator que contém o sistema de andaimes. O fluxo permite que as células previamente isoladas
e expandidas sejam semeadas (3) no andaime dentro do biorreator. Durante o processo de cultura, o meio é
constantemente oxigenado em um circuito externo de fluido (4). Quando a cultura é concluída, o meio pode ser reciclado (5)
e reformulado, enquanto o andaime e o tecido cultivado são removidos do biorreator (6). O processo final envolve a
separação do tecido do andaime para posterior processamento (7). 22
limitações da metodologia
Conjunto de processos que os sistemas
biológicos utilizam para se manterem em
O desenvolvimento de Carne in Vitro é dificultada pelas seguintes fatores :
equilíbrio

a) o tecido importante é cultivado na ausência de regulação homeostática

b) o processo precisa ser realizado em larga escala

A falta de homeostase afeta o valor nutricional pois

muitas vezes outros sistemas orgânicos estão envolvidos
na absorção e distribuição de nutrientes no organismo
vivo.

A cultura de tecidos em larga escala é um conceito crucial

para o desenvolvimento da tecnologia, mas ainda é
inexplorado no campo da engenharia

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limitações da metodologia - vALORES NUTRICIONAIS
● Logo, além de possuir alto teor de proteínas, a carne é uma fonte exclusiva de vários
nutrientes essenciais, ou seja, é necessário que um produto à base de carne cultivado
in vitro atenda, se não exceder, o valor nutricional dos produtos à base de carne
tradicionais para ser competitivo no mercado.

CASO NÃO SINTETIZADOS PELAS CÉLULAS MUSCULARES … DEVEM SER

SUPLEMENTADOS

EXEMPLO : VITAMINA B12 - sintetizada exclusivamente por certas espécies de bactérias

colonizadoras do intestino e, portanto, é encontrada apenas em produtos alimentícios de
origem animal.

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limitações da metodologia - vALORES NUTRICIONAIS
EXEMPLO : FERRO

O ferro na carne está presente como o íon Fe (II) na forma altamente

biodisponível do heme, o grupo protético encontrado na mioglobina.

Para fornecer ferro para as células em crescimento em uma forma

biodisponível, os íons Fe (III) ligados à proteína transferrina plasmática
de ligação terão que ser suplementados ao meio de cultura.

*** O Fe2+ é a forma iônica do ferro melhor absorvida pelo

intestino humano e, consequentemente, sendo a carne rica
nessa forma iônica

*** os níveis de transferrina devem ser monitorados de perto, com o

objetivo de permitir a disponibilidade de ferro.

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limitações da metodologia - REAÇÕES METABÓLICAS
● Incerteza quanto ao metabolismo : se reações
típicas pós-abate ocorrerão na carne cultivada in
vitro.

● Como : glicólise anaeróbica, acúmulo de ácido

lático, desnaturação de proteínas e proteólise
enzimática, que são importantes pois :

● São responsáveis ​por produzir a qualidade da

textura, sabor e aparência da carne.

NECESSIDADE DE SEMELHANÇA DE SABOR - TEXTURA- APARÊNCIA

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conclusão e perspectivas futuras
● O desenvolvimento científico de carne em laboratório só é possível :

1. DESENVOLVIMENTO DA ENGENHARIA DE BIOMATERIAIS

2. DESENVOLVIMENTO DA MEDICINA REGENERATIVA
3. PESQUISAS COM CÉLULA-TRONCO

● O desenvolvimento científico de carne em laboratório só é possível

● Sem dúvida, um grande obstáculo ao desenvolvimento dessa ciência se baseia

na aplicação em uma escala de produção em massa, onde pouca pesquisa foi
realizada.

● Necessidade de estudos para que o tecido muscular se parece

morfologicamente e nutricionalmente com a carne.

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conclusão e perspectivas futuras
● POTENCIALMENTE - A carne criada em laboratório pode certamente ter uma
grande aplicação em alimentos processados, como hambúrgueres e hot-dogs
como componente principal ou como aditivo

● Nesta forma, as deficiências de textura dos cultivados in vitro não

comprometerá o produto final processado, possibilitando uma
maior aceitação do consumidor;

● O segundo objetivo da carne cultivada in vitro é criar produtos

tridimensionais semelhantes aos cortes tradicionais com
características texturais adequadas.

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obrigado ! 29