Determinación de BMA, OC, M/L,

en superficies inertes.

PROYECTO FINAL
Integrantes:
Enriques Tinoco Kevin Alejandro
Martínez Manzo Josué Isaías
Quintero Morales Valeria Nikol.
Ruelas Alejandre Valeria Guadalupe
6°A TM TPPQI
6 de junio de 2019
 Competencias
• Genéricas:
4. Escucha, interpreta y emite mensajes pertinentes en distintos
contextos mediante la utilización de métodos, códigos y herramientas
apropiados
4.1 Expresa ideas y conceptos mediante representación lingüística,
matemática o graficas.
Piensa critica y reflexivamente:
5. Desarrolla innovaciones y propone soluciones a partir de métodos
establecidos
• Disciplinares:
Básicas:
Ciencias experimentales
4. Obtiene, registra y sintetiza la información para respondes a preguntas de
carácter científico, consultando fuentes relevantes y realizando experimentos
pertinentes.
11. Analiza las leyes generales que rigen el funcionamiento del medio físico y
valora las acciones humanas de riesgo e impacto ambiental.
14. Aplica normas de seguridad en el manejo de sustancias, instrumentos y
equipo en la realización de actividades en su vida cotidiana
Extendidas
Ciencias experimentales
4. Evalúa factores y elementos de riesgo físico, químico y biológico presentes en
la naturaleza que altera la cálidas de vida de una población para proponer
medidas preventivas.
• Profesionales
3. Prepara soluciones, reactivos y formulas de pruebas químicas.
4. Ayuda en el desarrollo y conducción de programas de muestreo
y análisis para mantener los estándares de calidad
6. Efectúa informes e interpreta los resultados obtenidos de las
pruebas químicas.
Extendidas.
Prepara muestras, reactivos y los aplica en la realización de análisis
químicos, físico químicos y bacteriológicos en las diversas áreas de
la industria química.
Estándar de competencia
CQMC0123.01. Operación de procesos químicos en el área
operativa.
 OBJETIVO Y
JUSTIFICACIÓN
 Objetivo
Realizar los análisis de bacterias
mesofilicas aerobias, mohos y
levaduras y organismos coliformes
para el área recreativa de menores
en las instalaciones de la plaza
comercial FORUM. Superficie inerte.
Para poder saber así la clase de
microorganismos con las que
interactúan los niños y que pueden
llegar a ser un foco de infecciones.
 Justificación
• Decidimos esta muestra debido a la polémica de las
enfermedades en los niños menores, como es sabido el área
recreativa es de gran atracción para ellos y por el mismo hecho
puede llegar a ser un gran foco de infecciones debido al
contacto con bacterias y gérmenes patógenos relacionados con
polvo, desechos orgánicos, gérmenes en el ambiente, restos de
comida entre muchas otras fuentes de microorganismos. Por
ellos esta practica esta dirigida a analizar las bacterias
mesofilicas aerobias, organismos coliformes y mohos y
levaduras presentes en ellos.
ESQUEMA DE SIEMBRA Y
PREPARACION DE
DILUYENTE
 Preparación del diluyente
Material Reactivos Equipos
• 4 tubos con tapón • Peptona de
de baquelita • Balanza analítica
caseína 1g/L
• Probeta • Autoclave
• Cloruro de
• Espátula 121°C a 15l de
sodio(NaCl)8.5g/L
• Canaleta presión
• Agua destilada
• Pipeta de 10ml 0.04L(1g/L)=0.04g
9ml(3) +
de peptona de
Procedimiento 10ml(tubo de
caseína
muestra)=37ml»4
0.04L(8.5g/L)=.34g
0ml de diluyente
de cloruro de sodio
MICROORGANISMOS AEROBIOS
MESÓFILOS
 Microorganismos, capaces de desarrollar en
presencia de oxígeno a una temperatura
comprendida entre 20°C y 45°C.

Refleja la calidad sanitaria

de los productos
analizados.
Un recuento bajo de aerobios mesófilos no
implica o no asegura la ausencia de
patógenos o sus toxinas, de la misma manera
un recuento elevado no significa presencia de
flora patógena.
 Identificación de BMA
NOM-092-SSA1-1994, BIENES Y
SERVICIOS. MÉTODO PARA LA CUENTA
DE BACTERIAS AEROBIAS EN PLACA.
MOHOS Y LEVADURAS
Identificación de M/L
NOM-111-SSA1-1994
 Marco teórico
A)No filamentosos • Condiciones Candidiasis
de humedad
• Saccharomyces.
B)Unicelulares y • Mayores condiciones de
• Pichia
de forma ovoidea solutos(osmotolerantes)
• Candida
• Crecen
• en aerobiosis.
Rhodotorula
C)Se reproducen por
gemación o fisión • El principal sustrato son los azúcares
• Trichosporon
Levadura

A)Filamentosos Producción de
B) Se reproducen • • micotoxinas
Mucor
Menor cantidad de humedad que las
por medio de • Aspergillus
levaduras
esporas • • Son
Penicillium
aerobios
• Rhizopus.
• Crecen en pH de 2-8.5
Moho
 Fundamentación teórica
NOM-111-SSA1-1994, BIENES Y SERVICIOS. MÉTODO
PARA LA CUENTA DE MOHOS Y LEVADURAS EN
ALIMENTOS.
El método se basa en inocular una cantidad conocida de muestra de prueba
en un medio selectivo específico, acidificado a un pH 3,5 e incubado a una
temperatura de 25 ± 1°C, dando como resultado el crecimiento de colonias
características para este tipo de microorganismos.
Reactivos Materiales Aparatos o instrumentos
El medio de cultivo: • Pipetas • Autoclave
Agar-papa-dextrosa bacteriológicas • Incubadora
Agar-papa-glucosa 10ml y 1ml • Contador de
Solución • Cajas petril colonias
Acido tartárico al 10% • Tubos con tapón Condiciones de esterilización
de baquelita 121°C 15l de presión por
• Otros materiales mínimo 15 minutos
esterilizables
 Preparación del medio y ácido tartárico
Llevar a cabo los cálculos Medio total=20(6)=120ml
20ml de medio por caja petril .120L(39g/L)=4.68g de APG
Cajas a emplear=6
Cantidad a utilizar del medio
39g de medio/L de agua 120ml de agar(1.4ml de acido
Cantidad de acido tartárico tartárico/100ml)=1.68ml de acido
1.4ml de acido/100ml de medio 10%
Proceso de preparación
Organismos coliformes
 DETERMINACIÓN DE ORGANISMOS COLIFORMES TOTALES

La denominación genérica coliformes designa a un grupo de especies bacterianas que tienen ciertas
características bioquímicas en común e importancia relevante como indicadores de contaminación del
agua y los alimento.
Las bacterias de este género se encuentran principalmente en el intestino de los humanos y de los
animales de sangre caliente, es decir, homeotermos, pero también ampliamente distribuidas en la
naturaleza, especialmente en suelos, semillas y vegetales.
Los coliformes se introducen en gran número al medio ambiente por las heces de humanos y animales.
Por tal motivo suele deducirse que la mayoría de los coliformes que se encuentran en el ambiente son de
origen fecal.
Tradicionalmente se los ha considerado como indicadores de contaminación fecal en el control de calidad
del agua destinada al consumo humano en razón de que, en los medios acuáticos, los coliformes son más
resistentes que las bacterias patógenas intestinales y porque su origen es principalmente fecal.
 Identificación de OCT
NOM-113-SSA1-1994, BIENES Y SERVICIOS. MÉTODO PARA LA CUENTA DE
MICROORGANISMOS COLIFORMES TOTALES EN PLACA.

El método permite determinar el número de microorganismos coliformes presentes en una muestra,

utilizando un medio selectivo (agar eosina y azul de metileno) en el que se desarrollan bacterias a 35°C
en aproximadamente 24 h, dando como resultado la producción de gas y ácidos orgánicos, los cuales
viran el indicador de pH y precipitan las sales biliares.
Reactivos: Materiales:
Agar Eosina y azul de Metileno (EMB) * Pipetas bacteriológicas
Soluciones: 10ml y 1ml
Soluciones diluyentes * Cajas Petri
* Tubos con tapón de baquelita
* Otros materiales esterilizables
Aparatos e instrumentos: Condiciones de esterilización:
• Autoclave 121ºC 15 lb de presión por mínimo
• Incubadora 15 min.
• Cuenta colonias
 PREPARACIÓN DEL MEDIO

Medio de cultivo:
Agar Eosina y azul de Metileno (EMB)
Diluir 36g de agar en 1000ml de agua.
Cálculos:
36g EMB ------------- 1000 ml agua
x ------------- 150 ml agua
(36𝑔 𝐸𝑀𝐵)(150 𝑚𝑙 𝑎𝑔𝑢𝑎)
x=
1000 𝑚𝑙 𝑎𝑔𝑢𝑎
x= 5.4𝑔.
Se diluyeron 5.4g de EMB en 150 ml de agua puesto que en esta determinación se adiciona una doble
capa de medio.
 SIEMBRA

En la siembra se contó con un área séptica de 10 cm redondos para evitar posibles contaminaciones del
ambiente, para esto tuvimos mucha precaución puesto que si nos salíamos del área aséptica podíamos
contaminar la siembra; el agar se vertió a una temperatura de 45ºC como nos indicó la maestra para
enfriar el agar y que este estuviera a la temperatura indicada utilizamos una franela. Al momento de
homogenizar el agar en las placas tuvimos el descuido de manchar las paredes de la placa lo que pudo
ocasionar alteraciones en nuestros resultados.
Incubación:
El agar se incubó en el autoclave a una temperatura de 35.5ºC por 24h.
RESULTADOS
Microorganismo Directa 10-1 10-2 RESULTADOS
M/L 5 0 1 5UFC/
0 0 4 SUPERFICIE
(Valor
Estimado)
4 0 1
Microorganismo Directa 10-1 10-2 RESULTADOS
BMA 8 1 1 6UFC/
SUPERFICIE
(Valor
Estimado)
4 1 1
Microorganismo Directa 10-1 10-2 RESULTADOS
OCT 1 0 4 1UFC/
SUPERFICIE
(Valor
0 0 4 Estimado)
CONCLUSIÓN.
 Conclusión
Es posible que los resultados hayan sido alterados a la hora de tomar la
muestra, puesto que cuando la tomamos, se estaba efectuando la limpieza de
la zona de juego, por ello, los jabones y soluciones desinfectantes afectaron el
número de colonias captadas para su crecimiento potencial en la muestra. Por
otra parte, podemos decir que esto puede ser un error, ya que si queríamos
analizar que microorganismos se encuentran ahí en su mayoría y que tipos los
niños los traen al lugar, teníamos que hacer el muestreo en una hora en que los
juegos hubiesen estado ocupados, pero por otra parte podemos decir, que la
limpieza del lugar es en parte efectiva, pero no lo suficiente para eliminar los
M.O presentes en esas zonas, pero que realmente si decrecen en gran número.
Además, en algunas cajas petril obtuvimos el crecimiento de mohos que no
entran en el resultado, pero se puede argumentar que efectivamente la limpieza
del lugar para niños no es excesivamente profunda.
NOM-092-SSA1-1994, BIENES Y SERVICIOS. MÉTODO PARA LA CUENTA DE BACTERIAS
AEROBIAS EN PLACA. (1994). Secretaria de salud. México. Extraído de
http://www.salud.gob.mx/unidades/cdi/nom/092ssa14.html
NOM-111-SSA1-1994, BIENES Y SERVICIOS. MÉTODO PARA LA CUENTA DE MOHOS Y
LEVADURAS EN ALIMENTOS. (1994). Secretaria de salud. México. Extraído de
http://www.salud.gob.mx/unidades/cdi/nom/111ssa14.html
NOM-112-SSA1-1994, BIENES Y SERVICIOS. DETERMINACIÓN DE BACTERIAS
COLIFORMES. TÉCNICA DEL NÚMERO MÁS PROBABLE. Secretaria de salud. México. Extraído
de http://www.salud.gob.mx/unidades/cdi/nom/112ssa14.html
NOM-065-SSA1-1993, QUE ESTABLECE LAS ESPECIFICACIONES SANITARIAS DE LOS
MEDIOS DE CULTIVO. GENERALIDADES.(1993) Secretaria de salud. México. Extraído de
http://www.salud.gob.mx/unidades/cdi/nom/065ssa13.html
NOM-110-SSA1-1994, BIENES Y SERVICIOS. PREPARACIÓN Y DILUCIÓN DE MUESTRAS DE
ALIMENTOS PARA SU ANÁLISIS MICROBIOLÓGICO. (1994). Secretaria de salud. México.
Extraído de http://www.salud.gob.mx/unidades/cdi/nom/110ssa14.html
NOM-109-SSA1-1994, BIENES Y SERVICIOS. Procedimientos para la toma, transporte y
manejo de muestras de alimentos para su análisis microbiológico. (1994). Secretaria de
salud. México. Extraído de http://legismex.mty.itesm.mx/normas/ssa1/ssa1109p.pdf