ENZIMAS

ENZIMAS - HISTÓRICO

Catálise biológica  início séc. XIX

 digestão da carne: estômago
 digestão do amido: saliva
Década de 50
 Louis Pasteur - concluiu que a fermentação do
açúcar em álcool pela levedura era catalisada por
“fermentos” = enzimas.
Eduard Buchner (1897)
 extratos de levedo podiam fermentar o açúcar
até álcool;
 enzimas funcionavam mesmo quando removidas
da célula viva.
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ENZIMAS - HISTÓRICO

James Sumner (1926)

 Isolou e cristalizou a urease;
 Cristais eram de proteínas;
 Postulou que “todas as enzimas são proteínas”.

John Northrop (década 30)

 Cristalizou a pepsina e a tripsina bovinas;

Década de 50 – séc. XX
 75 enzimas  isoladas e cristalizadas;
 Ficou evidenciado caráter proteico .
 Atualmente - Mais de 2000 enzimas são
conhecidas.
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Aminoácidos:
ENZIMAS H

R C* COOH
 Definição:
 Catalisadores biológicos; NH2

 Longas cadeias de pequenas moléculas

chamadas aminoácidos.
 Função:
 Viabilizar a atividade das células, quebrando
moléculas ou juntando-as para formar novos
compostos.
 Com exceção de um pequeno grupo de moléculas
de RNA com propriedades catalíticas, chamadas de
RIBOZIMAS, todas as enzimas são PROTEÍNAS.
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ENZIMAS – PROTEÍNA

Classificação proteínas

Proteínas globulares Proteínas fibrosas

Estrutura das proteínas

Primaria Secundaria Terciária Quaternária

ENZIMAS
Proteínas com alto peso
Proteínas globulares molecular, maioria entre 15 a
1000 Kilo Daltons Unit (KD)
OBS: 1 Dalton = 1 unidade de
peso molecular (AMU)
Estrutura terciária
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ENZIMAS – ESTRUTURA
Estrutura Holoenzima
Enzimática

Proteína Cofator

Ribozimas
Apoenzima ou Pode ser:
Apoproteína • íon inorgânico
• molécula orgânica
RNA
Coenzima
Se covalente
Grupo Prostético
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ENZIMAS –
CARACTERÍSTICAS GERAIS

Apresentam alto grau de especificidade;

São produtos naturais biológicos;
Reações baratas e seguras;
São altamente eficientes, acelerando a
velocidade das reações;
São econômicas, reduzindo a energia de
ativação;
Não são tóxicas;
Condições favoráveis de pH, temperatura,
polaridade do solvente e força iônica.
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ENZIMAS –
NOMENCLATURA

Século XIX - poucas enzimas identificadas

- Adição do sufixo ”ASE” ao nome do substrato:

* gorduras (lipo - grego) – LIPASE

* amido (amylon - grego) – AMILASE

- Nomes arbitrários:
* Tripsina e pepsina – proteases
 Enzimas – nomenclatura
Existem 3 métodos para nomenclatura
enzimática:

 Nome Recomendado: Mais curto e utilizado no

dia a dia de quem trabalha com enzimas. Usa o
sufixo "ase" para caracterizar a enzima. Ex:
Urease, Hexoquinase, Peptidase, etc.

 Nome Sistemático: Mais complexo, dá

informações precisas sobre a função metabólica
da enzima. Ex: ATP-Glicose-Fosfo-Transferase

 Nome Usual : Consagrado pelo uso. Ex:

Tripsina, Pepsina, Ptialina.
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ENZIMAS –
CLASSIFICAÇÃO

 Subclasses
Exemplos de Tipo de reação catalisada Classe
Subclasses
Hidratases Adicionam H2O à ligas duplas Liases
Quinases Transferem fosforilas do ATP Transferase
Mutases Movem fosforilas dentro da Isomerase
mesma molécula
Sintases Síntese independente de ATP Transferases
Sintetases Síntese dependente de ATP Ligases
Enzimas - CLASSIFICAÇÃO

Oxidorredutases: São enzimas que

catalisam reações
de transferência de elétrons, ou seja:
reações de oxi-redução. Ex.:
Desidrogenases e Oxidases.

 Se uma molécula se reduz, tem que

haver outra que se oxide.
enzimas
 Transferases : Enzimas que
catalisam reações de transferência
de grupamentos funcionais como
grupos amina, fosfato, acil,
carboxil, etc. Ex.: Quinases e
Transaminases
 enzimas

 Hidrolases : Catalisam reações

de hidrólise de ligação
covalente. Ex: Peptidases.
Enzimas

 Liases: Catalisam a quebra de

ligações covalentes e a remoção de
moléculas de água, amônia e gás
carbônico. Ex.: Dehidratases e
Descarboxilases.
enzimas
 Isomerases: Catalisam reações de
interconversão entre isômeros
ópticos ou geométricos. Ex.:
Epimerases.
enzimas
 Ligases: Catalisam reações de
formação e novas moléculas a
partir da ligação entre duas já
existentes, às custas de
Energia(ATP).
Ex.:Sintetases.
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ENZIMAS –
CATALISADORES

Aceleram reações químicas

Catalase
H2O2 H2O + O2
Ex: Decomposição do H2O2

Condições da Reação Energia livre de Ativação Velocidade

KJ/mol Kcal/mol Relativa

Sem catalisador 75,2 18,0 1

Platina 48,9 11,7 2,77 x 104

Enzima Catalase 23,0 5,5 6,51 x 108

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ENZIMAS –
CATALISADORES

Não são consumidos na reação

Catalase
H2O2 H2O + O2

E+S E+P
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ENZIMAS –
CATALISADORES

Não alteram o estado de equilíbrio

•Abaixam a energia de ativação;
•Keq não é afetado pela enzima.
Não apresenta efeito termodinâmico global
•G não é afetada pela enzima.

Energia de ativação sem enzima

Energia de ativação com
Diferença entre S enzima
a energia livre P
de S e P

Caminho da Reação
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ENZIMAS –
COMPONENTES DA REAÇÃO

E+S ES P+E

Substrato se liga ao
SÍTIO ATIVO
da enzima
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ENZIMAS – SÍTIO ATIVO

Região da molécula enzimática que participa

da reação com o substrato.
Pode possuir componentes não protéicos:cofatores.
Possui aminoácidos auxiliares e de contato.

Ativador:Íons inorgânicos
que condicionam a ação
Porção protéica catalítica das enzimas. Fe²+
Cofator
APOENZIMA Coenzima: molécula
orgânica complexa.NAD+

HOLOENZIMA
Grupamento
prostético
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ENZIMAS – COFATOR
 Algumas enzimas que contêm ou necessitam
de elementos inorgânicos como cofatores
ENZIMA COFATOR
PEROXIDASE Fe+2 ou Fe+3

CATALASE

CITOCROMO OXIDASE Cu+2

ÁLCOOL DESIDROGENASE Zn+2

HEXOQUINASE Mg+2

UREASE Ni+2
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ENZIMAS – COENZIMAS

 Maioria deriva de vitaminas hidrossolúveis

 Classificam-se em:
- transportadoras de hidrogênio
- transportadoras de grupos químicos

 Transportadoras de hidrogênio
Coenzima Abreviatura Reação Origem
catalisada
Nicotinamida adenina NAD+ Oxi-redução Niacina ou
dinucleotídio Vitamina B3
Nicotinamida adenina NADP+ Oxi-redução Niacina ou
dinucleotídio fosfato Vitamina B3
Flavina adenina FAD Oxi-redução Riboflavina ou
dinucleotídio Vitamina B2
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ENZIMAS – COENZIMAS

 Transportadoras de grupos químicos

Coenzima Abrev. Reação catalisada Origem
Coenzima A CoA-SH Transferência de Pantotenato ou
grupo acil Vitamina B5
Biotina Transferência de Biotina ou
CO2 Vitamina H
Piridoxal fosfato PyF Transferência de Piridoxina ou
grupo amino Vitamina B6
Metilcobalamina Transferência de Cobalamina ou
unidades de carbono Vitamina B12
Tetrahidrofolato THF Transferência de Ácido fólico
unidades de carbono
Tiamina TPP Transferência de Tiamina ou
pirofosfato grupo aldeído Vitamina B1
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ENZIMAS –
LIGAÇÃO ENZIMA - SUBSTRATO

Emil Fischer (1894): alto grau de especificidade das

enzimas originou  Chave-Fechadura , que
considera que a enzima possui sitio ativo complementar
ao substrato.
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ENZIMAS –
LIGAÇÃO ENZIMA - SUBSTRATO

Koshland (1958): Encaixe Induzido , enzima e o

o substrato sofrem conformação para o encaixe. O
substrato é distorcido para conformação exata do
estado de transição.
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ENZIMAS –
ATIVIDADE ENZIMÁTICA

Fatores que alteram a velocidade de reações

enzimáticas:
- pH;
- temperatura;
- concentração das enzimas;
- concentração dos substratos;
- presença de inibidores.
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ENZIMAS –
INIBIÇÃO ENZIMÁTICA

 Qualquer substância que reduz a velocidade de uma

reação enzimática.

INIBIDORES

REVERSÍVEIS IRREVERSÍVEIS

COMPETITIVOS NÃO COMPETITIVOS INCOMPETITIVOS

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ENZIMAS –
INIBIÇÃO COMPETITIVA

 Inibidor competitivo concorre com o S pelo sitio ativo da E

livre.
 I  análogo não metabolizável, derivado de um S
verdadeiro, S substituto da E ou um P da reação.
I compostos com estrutura
molecular lembra S

afinidade da enzima pelo

substrato

[substrato] necessária para

obter a mesma [ES]

Km aparente
da enzima
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ENZIMAS –
INIBIÇÃO NÃO-COMPETITIVA

 Inibidor não-competitivo se liga reversivelmente,

aleatória e independentemente em um sítio que lhe é
próprio.
I não tem semelhança
estrutural com o S

[substrato] não diminui a

inibição

Km da enzima NÃO se altera

Vmax na presença do
inibidor
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ENZIMAS –
INIBIÇÃO INCOMPETITIVA

 Inibidor incompetitivo se liga reversivelmente, em

um sítio próprio, ao complexo ES.

I não tem semelhança

estrutural com o S

I favorece a formação do ES

Km e Vmax da enzima
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ENZIMAS –
INIBIÇÃO IRREVERSÍVEL

 I se combina com um grupo funcional, na molécula

da E, que é essencial para sua atividade.
 Podem promover a destruição do grupo funcional
 Forma-se uma ligação COVALENTE entre o I e a E.
 Vmax   parte da E é completamente removida do
sistema e Km permanece a mesma.
K1 K2
E+S ES E+P
+
I

EI
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ENZIMAS –
ENZIMAS REGULATÓRIAS
 Enzimas alostéricas
Funcionam através da ligação não-covalente e reversível
de um metabólito regulador chamado modulador;
Moduladores podem ser inibidores ou ativadores;
São maiores e mais complexas, possuem duas ou mais
cadeias polipeptídicas.

 Enzimas reguladas pela modificação covalente

reversível
Grupos químicos são ligados covalentemente e
removidos da enzima reguladora por enzimas ≠, podem
ser: fosfato, adenosina monofosfato, grupos metil, etc.
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