INSTITUTO POLITÉCNICO NACIONAL

ESCUELA NACIONAL DE CIENCIAS BIOLÓGICAS

QUÍMICO FARMACÉUTICO INDUSTRIAL
INMUNOLOGÍA GENERAL

Reacciones de Precipitación
Integrantes:
- Valdivia Rivas Cecilia Gabriela
- González Cuvas Jessica Arantxa
INTRODUCCIÓN
Precipitación: En este caso el antígeno es una molécula soluble y al ponerse una
solución del mismo en contacto con los anticuerpos que originó, se forman
complejos Ag-Ac que al insolubilizarse en su mayor parte dan una reacción de
precipitación, que se desarrolla rápidamente formándose los complejos Ag-Ac.
después los complejos se agregan formando micelas o redes que alcanzan
determinado tamaño y precipitan. Esta etapa se acelera con el aumento de la Tº
(se la lleva a cabo normalmente a 37ºC) y es además dependiente de la
concentración de electrolito.
Existen dos tipos:
a) Inmunoprecipitación en medio líquido.
b) Inmunoprecipitación en medio semisólido.
Este último se divide en:
1) Inmunodifusión doble (Ochterlony)
2) Inmunodifusión simple o radial (Mancini)
a) Inmunoprecipitación en medio líquido
● El complejo Ag-Ac precipita espontáneamente o por centrifugación cuando la
proporción de Ags y Acs de la mezcla es equivalente.
● La precipitación es máxima allí donde la proporción entre ambos es óptima
(parte central de la curva), pero va disminuyendo a medida que predomine el
Ac o el Ag (izquierda y derecha de la curva respectivamente).
● Efecto prozona: ausencia de reacción inmune cuando hay altas
concentraciones de anticuerpo.
● Efecto postzona: ausencia de reacción inmune cuando hay altas
concentraciones de antígeno.
● Zona de equivalencia: Todo el Ag y Ac se encuentran formando
complejos macromoleculares insolubles. Sólo se dan determinadas
actividades cuando hay un equilibrio entre las concentraciones de Ag y de Ac
en la zona de equivalencia.
b) Inmunoprecipitación en medio semisólido
● Utiliza un soporte sólido gelificado en el que difunden el Ag y Ac.
● Se usa como soporte de la reacción un gel de manera que las moléculas
difundirán libremente a través de él y a lo largo del recorrido se irá formando
un gradiente de concentraciones que hará que en un determinado punto los
reactivos se encuentren en su relación de equivalencia, en ese punto se
producirá un precipitado que sobre el gel se verá como una nítida banda
blanca que permanece estable mientras un mayor flujo de reactantes no
provoque su redisolución.
● Se agrupan dentro de dos categorías: inmunodifusión y técnicas
inmunoelectroforéticas.
1) Técnica de difusión doble de Ouchterlony
● Esta técnica se realiza en placas de agar en donde se practican pocillos, en
uno de estos pozos se coloca el suero o muestras a investigar y en el resto
se coloca el anticuerpo preparado frente a la sustancia que se quiere
identificar.
● Cuando difunden, ambos sistemas se encontrarán y se formará en la zona de
equivalencia el complejo Ag-Ac correspondiente que se hace visible en forma
de una línea de precipitación.
● En una preparación que contenga varios antígenos, se obtendrán múltiples
líneas de precipitado.
● La técnica de Ouchterlony permite identificar sustancias según la forma de
unirse las líneas de precipitación de dos o varios sistemas.
2) Técnica de difusión radial simple de Mancini
● Esta técnica se basa en la difusión cuando un antígeno difunde desde un
orificio al agar que lleva incorporado un anticuerpo específico.
● En un comienzo está presente en una concentración relativamente alta y
forma complejos solubles, al difundir el antígeno se genera un gradiente de
concentración.
● A medida que el antígeno difunde más, la concentración disminuye de modo
continuo hasta que se alcanza el punto en el cual los reactantes están más
cerca de las proporciones óptimas (zona de equivalencia), el inmunocomplejo
se insolubiliza y se forma un anillo de precipitación.
● Este anillo de precipitación es fácilmente visible y las concentraciones
antigénicas están en relación directa con el área del círculo de precipitación
(Figura 4), cuanta más alta es la concentración del antígeno, mayor es el
diámetro del anillo.
OBJETIVOS
● Identificar las distintas maneras de poner en evidencia la reacción de
precipitación que ocurre cuando un antígeno soluble interacciona con su
anticuerpo homólogo.
● Entender los principios básicos de las técnicas de precipitación en medio
líquido y medio semisólido.
● Identificar las diferencias que existen entre el métodos de Ouchterlony y el
de Mancini.
● Analizar e interpretar los resultados obtenidos durante la práctica.
METODOLOGÍA
I. Reacción de precipitación en medio líquido
RESULTADOS
I. Reacción de precipitación en medio líquido.
METODOLOGÍA
A. Inmunodifusión doble (método de Oüchterlony)
A. Inmunodifusión doble (método de Ouchterlony)
 METODOLOGÍA
B. Inmunodifusión radial (método de Mancini)
B. Inmunodifusión doble (método de Mancini)
CONCLUSIONES
● La inmunoprecipitación permite detectar la presencia y cantidad de antígenos
y anticuerpos específicos.
● Inmunodifusión doble, es una prueba cualitativa que nos permite identificar la
pureza del antígeno o del anticuerpo.
● Inmunodifusión simple, es una prueba cuantitativa que nos permite calcular la
concentración de una muestra problema, se emplea para cuantificar
inmunoglobulinas, complemento, entre otros componentes.
● En la reacción de precipitación en medio líquido los aspectos básicos de
exceso y de equivalencia de antígeno o anticuerpo son de particular
importancia, de hecho la relativa solubilidad de los complejos con un exceso
significativo de cualquiera de los reactantes y la insolubilidad de los mismos
en la zona cercana a la equivalencia (proporciones óptimas) son críticos para
el proceso de visualización.
● Reacción de precipitación en medio líquido por medio de capilares, es un
método fácil, barato y sencillo.
BIBLIOGRAFÍA
1. Martínez Pérez, R.D., Departamento de Medicina Experimental, Facultad de
Medicina UNAM, http://www.tuobra.unam.mx/publicadas/021031121605.html
2. Abbas, (2012), Inmunología celular y molecular, 7ª Edicion, Editorial
ELSEVIER, España.
3. Roitt Ivan, Et al. (2004). “Inmunología Fundamentos” 9° Edición, Editorial
Panamericana.