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NUCLEICOS
CONFORMACIÓN:
• Nucleósido
• Acido Fosfórico
Nucleósido
• Azúcar
• Base Nitrogenada
Base Nitrogenada:
• Purinas
• Pirimidinas
Hidrólisis ácida:
• Liberación de Purinas en el
ADN
METODOS DE
ESTUDIO
HISTOLOGICO
Fijación:
• Carnoy
• Alcohol
• Formol
• Zenker
Técnicas de estudio:
• Inclusión en parafina
• Cortes por congelación
Métodos de Demostración:
• Mitchel : B. N. • Feulgen
• Serra : Fosfato • Unna-Pappenheim
• Turchini : Azúcar • Acridina Orange
FEULGEN: ADN
• Reacciòn Plasmal
ARN
• Distancia entre carbonilos menor
de 1 nm
• Extracción por hidrólisis
PROBLEMAS:
• Exceso de hidrólisis
• Falla del Schiff.
FEULGEN-FLUORESCENTE
Unna-Pappenheim:
• ADN
• ARN
• Verde Metil
• Pironina
Verde metil
Cristal violeta Pironina
Unna-Pappenheim:
• pH: 4.8
• Estructura
• Brachet
• ADN
• ARN
Acridina orange
Takahash
i
Acridina Orange:
Digestión enzimática
Moleculares:
• Hibridación in situ
• PCR
Hibridación in situ:(HIS)
Dterminación de secuencias
específicas de DNA y RNA en los
tejidos.
HIS : Pasos
• Desnaturalización del ADN
• Hibridación
• Visualización
HIS: Desnaturalización:
• Temperatura de 100 +/- 3 ºC
• Placas térmicas
HIS: Hibridación
• Biotina: Enzima
• Fluorocromo:Fluorescencia
• Isótopos: Autorradiografía
Herpes / Sarcoma de Kaposi
PCR
• reacción en cadena de la polimerasa
• aumento notable de adn a través de
síntesis sucesivas.
PCR: Pasos
M. HISTOQUÍMICOS
M.MOLECULARES
a su vez
GENERALES ESPECÍFICOS