FAMILIA

Enterobacteriaceae

Dr. Félix Paúl Garnica Alata

Microbiología

1
 Enterobacteriaceae
 más de 15 diferentes géneros
 Escherichia
 Shigella
 Edwardsiella
 Salmonella
 Citrobacter
 Klebsiella
 Enterobacter
 Hafnia
 Serratia

2
 Enterobacteriaceae
 Proteus
 Providencia
 Morganella
 Yersinia
 Erwinia
 Pectinobacterium

3
 Enterobacteriaceae
 Morfología y características generales
 Bacilos Gram-negativo
 No esporo-formadores
 Oxidasa-negativo
 Fermentan glucosa y pueden o no producir
gas en el proceso (aerogénicos vs
anaerogénicos)
 Reducen los nitratos a nitritos

4
Bacilos Gram (-)

5
 Enterobacteriaceae
 Anaerobios facultativos
 Algunos móviles:
• Flagelos peritricos
 Muchos son habitantes normales del tracto
intestinal del hombre (y de otros animales)
 Patógenos
• Entéricos
• Urinarios
• Respiratorios
• Relacionados con enf. Reumática

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Enfermedades Oportunistas
– septicemia
– neumonía
– meningitis
– Infecciones del tracto
urinario •Citrobacter
•Enterobacter
•Escherichia
•Hafnia
•Morganella
•Providencia
•Serratia 7
Enterobacteriaceae
Enfermedades gastrointestinales
– Escherichia coli
– Salmonella
– Shigella
– Yersinia enterocolitica

8
 Enfermedades asociadas al
Síndrome de Reiter

• Antígeno de histocompatibilidad (HLA) B27

– Enterobacteriaceae
*Salmonella
*Shigella – No-Enterobacteriaceae
*Yersinia *Campylobacter
*Chlamydia

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 Enterobacteriaceae
•Adquiridas en la comunidad
•Personas sanas
– Klebsiella pneumoniae
* enfermedad respiratoria
* prominente cápsula

–Infección urinaria
– contaminación fecal
*E. coli
*Proteus
– ureasa (degrada la urea)
– orina alcalina
10
 Enterobacteriaceae: cultivo
 Crecen bien en distintos medios de cultivo
selectivos y diferenciales.
 La mayoría de medios selectivos tienen sales
biliares y colorantes que inhiben el crecimiento
de Gram positivos y pueden suprimir el
crecimiento de especies no patógenas de la
familia de Enterobacteriaceae.
 Muchos son diferenciales en base a la
fermentación de lactosa y/o producción de H2S.

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 Enterobacteriaceae
 En agar sangre todas producen colonias
similares, relativamente grandes y grisáceas.
Pueden ser o no hemolíticas.
 Los tres medios más útiles para identificar
potenciales patógenos son: agar TSI, LIA, y
urea o agar fenilalanina.
 La estructura antigénica es usada para
diferenciar a organismos dentro de un género
o especie. Tres son los más importantes.

12
Crecimiento en MacConkey

13
 Reacciones en TSI

TSI =
TRIPLE
AZUCAR Y
HIERRO

Fermentación
de la glucosa,
sacarosa y
lactosa

14
Kligler: posibles resultados

15
Reacciones en LIA
Descarboxilación o desaminación de la lisina

16
Reacciones en LIA

17
Prueba de Indol (SIM)

18
Prueba de Ureasa

19
Prueba de Citrato

20
 Prueba de movilidad, indol y
descarboxilación de la ornitina (MIO)

21
 Enterobacteriaceae
 Antígenos somáticos O
• Parte polisacárida termoestable del LPS.
• La variación de colonias lisas a rugosas se
acompaña de una pérdida progresiva del Ag O.
 Antígenos flagelares H
• Son termolábiles
 Antígenos de la envoltura o cápsula K
• Recubre al O y puede bloquear la aglutinación con
antisueros O específicos.
• Ebullición por 15 minutos destruye a K y
desenmascara los antígenos O.
• El Ag K es llamado Vi (virulencia) en Salmonella.
22
Estructura antigénica de las
Enterobacteriaceae

23
Aglutinación

24
 Enterobacteriaceae
 Escherichia coli
 Habitante normal del tracto G.I.
 Algunas cepas causan diversas formas
de gastroenteritis.
 Es causa principal de infección urinaria
y meningitis neonatal y septicemia.
 Puede presentar cápsula.
 Bioquímica
• La mayoría es móvil.

25
Infección urinaria ascendente

26
 Escherichia coli
• Puede ser hemolítica en Agar Sangre
 Especialmente en cepas patogénicas\
• Pruebas clave para la cepa normal:
 TSI es A/A + gas
 LIA K/K
 Urea –
 Indol +
 Citrato –
 Movilidad +
• Hay un biotipo que es anaerogénico,
lactosa (-) e inmóvil.
27
Escherichia coli

28
TSI

E. coli
A/A

29
 E. coli ETEC
 Factores de Virulencia
 Toxinas
• Enterotoxinas
• PRODUCIDAS POR CEPAS
ENTEROTOXIGENICAS DE E. coli (ETEC).
• Causa movimiento de agua y iones de los
tejidos al intestino resultando en diarrea acuosa.
• Tipos de enterotoxina:
 LT – termo lábil
 ST – termo estable
• Diarrea del viajero
• Parecida al cólera (más leve) 30
 Toxinas de E. coli
 LT – Toxina termolábil
• se une a gangliósidos Gm1 sobre las células
epitelialesdel intestino delgado donde se estimula la
adenilato ciclasa para aumentar la producción de
cAMP.
• El cAMP aumentado altera la actividad de los
transportadores de sodio y cloro, produciendo un
desbalance que resulta en transporte de fluido hacia
el intestino.
 ST – Toxina termo estable
• se une a receptores que estimulan la producción de
cGMP con los mismos resultados que la LT.
 Ambas enterotoxinas están compuestas por cinco
subunidades beta (para unirse) y una subunidad alfa
(que tiene la actividad enzimática tóxica).
31
 E. coli enterotoxigénica
 LT
• Parecida a la colerigénica
 Adenil ciclasa activada
 AMP cíclico

 secreción agua/iones

 ST
 Guanilato ciclasa activada

 cGMP

 Captación de agua/iones 32
Actividad de LT vs ST

33
E. coli enteroinvasiva (EIEC )
• Disentería
- Parecida a la shigelosis

Lumen intestinal

34
 Escherichia coli (EPEC)
• E. coli ENTEROPATOGENA
• Muy parecida a Shigella
– Genéticamente muy
similares
– Patogenia muy parecida

35
 EPEC
Destrucción de los microvellos de la superficie

Lumen intestinal
• fiebre
• diarrea
• vómitos
• náusea
• heces sin sangre

36
EPEC

37
E. coli enterohemorrágica (EHEC)
• O157:H7

Flagella Micrografía electrónica

de transmisión

38
 Transmisión
alimentos contaminados
(carne y vegetales)
 Hemorrágica
 Diarrea sanguinolenta y copiosa

 Pocos leucocitos

 Afebril

 Síndrome hemolítico urémico

 Anemia hemolítica

 Trombocitopenia (recuento bajo de plaquetas)

 Fallo renal

39
E. coli Enterohemorrágica

• Toxina Vero
– “shiga-like”

• Hemolisinas

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 E. Coli EAEC
 Toxina parecida a la ST
 Enteroagregativa toxina ST-like

 Causa diarrea acuosa

 Hemolisinas de dos tipos:

• Unida a la célula
• Secretada
 Lisan eritrocitos y leucocitos y ayudan a

inhibir la fagocitosis cuando está unida a

la célula
 Endotoxina
41
 E. coli
• Adhesión
 Por fimbrias y otros factores no fimbrias
involucradas en la adhesión
 Por lo menos 21 diferentes tipos de
adhesiones.
 Los anticuerpos producidos contra ellos
protegen de la colonización.
• Factores de virulencia
 Cápsula
 Capacidad de capturar al hierro (enteroquelina)
 Proteínas externas de membrana
• Involucradas en ayudar al organismo a
invadir.
42
 Fimbrias de E. coli
Tipo 1

manosa

galactosa
– glucolípidos
– glucoproteínas

43
Varios tipos de E. coli

44
 BFP

EPEC
EPEC
EPEC

45
Resumen de las cepas de E.coli
que causan gastroenteritis.

46
 Tratamiento de la enfermedad
gastrointestinal
 Reemplazo de líquidos
 Antibióticos
 no usados usualmente a menos que

sea sistémica
• ej: Síndrome urémico hemolítico

47
 Shigella
 S.flexneri, S. boydii, S. sonnei,
S. dysenteriae
Causa de: disentería bacilar
 shigelosis

• Heces sanguinolentas
• Dolor intestinal
• Pus (leucocitos en heces)
48
 Especies de Shigella
• S. dysenteriae (Grupo A)
• S. flexneri (B)
• S. boydii (C)
• S. sonnei (D)
 Bioquímica
• TSI K/A sin gas
• LIA K/A
• Urea –
• Movilidad ( - )
• Todas fermentan manitol excepto S. dysenteriae
• S. sonnei puede fermentar tardíamente la lactosa.
49
Bioquímica de Shigella spp

50
 Shigelosis
 2-3 días
 Daño a la célula epitelial

Lumen intestinal

51
 Toxina Shiga
 enterotóxica
 citotóxica
 Inhibe la síntesis de proteína
 Lisando al rARN 28S

52
 Shigelosis
 Únicoreservorio: hombre
 Mayormente en niños pequeños

 Contacto fecal - oral

 Niños a adultos
 Transmitida por manipuladores de
alimentos (adultos)
 MANOS SUCIAS

53
 Shigella spp
 Estructura Antigénica
• Distinción en grupos (A, B, C y D) basada en el
antígeno O.
 Factores de Virulencia
• Toxina Shiga–
 Producida por S. dysenteriae
 S. flexneri y S. sonnei la producen en pequeñas
cantidades
 Inhibe la síntesis proteica inactivando la subunidad
ribosomal 60S
 Esto juega un papel en la ulceración de la mucosa
intestinal.

54
Adhesión y penetración de
Shigella

55
 Tratamiento
 Manejode la deshidratación
 Respuesta a antibióticos
 Disminuye la duración de la
enfermedad
• Sulfonamidas
• Tetraciclina, Ampicilina y Cloranfenicol
• Cepas resistentes están en aumento
• Tests de susceptibilidad son requeridos

56
 Salmonella spp
 2000"tipos” antigénicos
 Genéticamente: especie única
 S. enteritica
 Categoría por enfermedad
 S. enteritidis
 muchos serotipos
 S. cholerae-suis
 S. typhi
57
 Salmonelosis
 S. enteritidis
 Infección común por salmonela
 Pollo y huevos.
 Reservorio: no humano
 Gastroenteritis
• nausea
• vomitos
• Heces sin sangre
• autolimitante (2 - 5 días)

58
 Salmonelosis

lumen intestinal

Casos no complicados (la mayoría)

Antibióticos no son útiles

59
 S. cholerae-suis
 Mucho menos común
 Septicemia
 Esencial Tx antibiótico

60
 Salmonella
 Una especie: S. enteritica
 7 subespecies: 1, 2 ,3a ,3b ,4 ,5, and 6.
 Subgrupo 1 causa la mayoría de
infecciones humanas
 Serotipos (clasificación de Kauffman-
White)
 Basada en antígenos O y H
 Antisueros clasifican grupos A, B, C1, C2, D y
E
 Salmonella typhi tiene antígeno Vi capsular
61
 Salmonella
 Bioquímica
 TSI K/A + gas
 H2S:
• S. typhi produce poca cantidad (sin gas)
• S. paratyphi A no produce H2S
 S typhi da LIA K/K con H2S
 S. paratyphi A da resultados K/A
 Urea –
 Movilidad +
 Citrato +/-
 Indol -
 Factores de virulencia
 Endotoxina
 Cápsula
 Adhesinas – tanto fimbrial como no fimbrial

62
63
Invasión por Salmonella

64
 Fiebre tifoidea
 Diagnóstico
 Hemocultivos (1a y 2a semanas)
 Coprocultivos y a veces urocultivos positivos después
de la segunda semana
 Prueba de Widal: anticuerpos contra Salmonella
typhi.
 10% de los infectados se convierten en portadores a
corto plazo y un porcentaje menor es portador a largo
plazo, por la persistencia de las bacterias en la
vescícula o en la vejiga urinaria.

65
 Tratamiento
 Terapia Antimicrobiana
 Fiebre entérica
• Cloranfenicol
• Cepas resistentes requieren estudio de
susceptibilidad.
 Gastroenteritis
• Usualmente no requiere antimicrobianos
• Reemplazo de líquidos y electrolitos
Comparación de la invasión por
Salmonella vs Shigella

67
 Otras Enterobacteriaceae
 Citrobacter
 TSI K/A o A/A gas + y H2S +
 LIA K/A H2S +
 Citrato +
 Urea usualmente +
 Movilidad +
 Patógeno oportunista
 Causa infección urinaria, respiratoria, de
heridas, osteomielitis, endocarditis y
meningitis.
68
 Enterobacteriaceae
 Edwardsiella tarda
 TSI K/A gas + y H2S +
 LIA K/K H2S +
 Urea –
 Citrato –
 Indol +
 Significado clínico
• Enf. GI en países tropicales y subtropicales

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 Enterobacteriaceae
 Klebsiella
 FN del tracto gastrointestinal, pero patógeno
potencial en otras áreas
 TSI A/A + gas
 LIA K/K
 Urea +
 Citrato +
 MR-, VP+
 Movilidad -
 Tiene antígenos O y K

70
 Klebsiella
 Factores de virulencia
• Cápsula
• Adhesinas
• Quelinas
 Significancia clínica
• Causa neumonía (inmunocomprometidos)
• Daño permanente al pulmón
• Causa importante de septicemia y
meningitis nosocomial
71
 Enterobacter sp

 FN del tracto GI
 TSI, LIA y urea variables
 Citrato +
 Significancia Clínica
• Infección nosocomial
• Bacteremia en pacientes quemados

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 Serratia sp
 Saprófito de vida libre
 TSI A/A o K/A; gas +/- (no fermenta lactosa)
 LIA usualmente K/K
 Citrato +
 Movilidad +
 Urea +/-
 Encontrada en infecciones del TR y GU
 Resistente a muchos antimicrobianos

73
 Enterobacteriaceae
 Proteus, Providencia, and Morganella
 Todos parte de la FN del tracto GI (excepto
Providencia).
 Movilidad +
 Proteus: “swarming”
 Desaminación de la Lisina + (LIA R/A)
 Urea +
 TSI variable
 Indol + (solamente P. mirabilis es negativo)

74
75
Proteus sp

76
 Proteus, Providencia y
Morganella

 Factores de virulencia
• Ureasa – el amoniaco producido daña
a la célula epitelial del tracto urinario
 Significancia clínica
• Infecciones del TU, neumonía,
septicemia, e infección de heridas

77
78