BIOTECNOLOGÍA VEGETAL EN LA

PRODUCCIÓN INDUSTRIAL
Y LA OBTENCIÓN
DE METABOLITOS SECUNDARIOS

David Illán Rodríguez Álvarez

Seminario Biotecnología Vegetal 15/12/11
 Contenidos
1-Introducción

2-Potencial económico de los metabolitos

secundarios.

3-Estrategias para aumentar la producción de M.

secundarios.

4-Ing. Metabólica y biotransformación.

5. Aplicaciones Biotecnología Vegetal.

6. Perspectivas y referencias.
 Introducción
La biotecnología vegetal es cualquier técnica que use
a los organismos vivos o parte de organismos para
elaborar o modificar productos, para mejorar
plantas o para desarrollar microorganismos con
fines específicos
Cultivo de células y órganos vegetales
en biorreactores

Los callos obtenidos a partir de un explanto pueden disgregarse para

obtener una suspensión celular. Esta suspensión celular se utiliza para
obtener embriones somáticos o puede cultivarse para obtener
metabolitos secundarios.

Utilidad de los metabolitos: industria farmacéutica y alimentaria.

Ejemplos de metabolitos Secundarios: mentol y las drogas
anticancerígenas, como los taxoles y algunos edulcorantes.
Los cultivos celulares se llevan a cabo en biorreactores .
Cultivo de células y órganos vegetales
 Producción de metabolitos secundarios
en biorreactores

El principio básico de los biorreactores es la inmersión

periódica de los explantes en el medio de cultivo, lo
que permite mantener el intercambio gaseoso
dentro del recipiente.
 2. Potencial económico M. secundarios
Cultivo de tejidos y metabolitos secundarios
• Metabolismo secundario regula muchas de las interacción
planta-ambiente.
• Producción de M. secundarios está relacionado con el
proceso de desarrollo de la planta.
 No asociada al crecimiento.
 Sometida a control hormonal.
 Paralela al desarrollo de tejido especializados y órgano (raíces, tallos, hojas
etc).
 Biosíntesis y acumulación está compartimentalizada a nivel celular,
intracelularmente, tejido y de órganos.
• Metabolitos secundarios se producen ante situaciones de
estrés o enfermedad.
 Factores bióticos
 Factores abióticos
 2.1 Las plantas como fuente de metabolitos
secundarios de interés comercial
Las plantas son una fuente de producción de M. secundarios de interés comercial
como insecticidas, saborizantes, colorantes, enzimas , fragancias, compuestos
antimicrobianos, medicinas, herbicidas, proteasas etc.
 2.2 Grupo de Metabolitos secundarios.
1.Terpenoides
Los terpenoides están distribuidos ampliamente en las plantas y muchos
de ellos tienen funciones fisiológicas primarias.

En plantas se
conocen unos
25000 terpenoides.

Derivados del IPP

Taxol
2.Compuestos nitrogenados o alcaloides

Atropina

Cocaína
Quinina
Cafeína

Se han caracterizado 12000 alcaloides en plantas

3. Compuestos fenólicos derivados de
fenilpropanoides
Unos 8000 fenólicos se forman en
las plantas a partir de las rutas
de los ácidos shikimico y/o del
malonato/acetato
 Producción de M. secundarios por cultivo in
vitro de células y órganos vegetales
¿Por qué?
Independizarse de factores externo como: Cambios de T, sequías,
plagas, variabilidad de la producción, etc.
Evitar la extinción de especies vegetales.
Disposición de condiciones controladas para los procesos de extracción y
biosíntesis.
Aumentar la variabilidad en la producción de compuestos con 1 o más C
quirales. (más económico).
Obtención de compuestos no presentes en la planta a madre.
Establecimiento de procesos de biotransformación llevados a cabo
por enzimas vegetales.
 Viabilidad de un proceso para su
progreso a nivel industrial

Condiciones económicas.
-Compuestos de alto precio.
-Alto rendimiento y productividad del cultivo comparado con la planta entera.
-Buen crecimiento en biorreactores.
-Crecimiento lento de la planta completa como fuente alternativa.

Parámetros principales.
-Productividad: gramos de producto/Litro/día.
-Concentración máxima del producto: gramos de producto/L.
-Rendimiento: gramos de producto/gramos de sustrato.
3. Estrategias para aumentar la producción de
metabolitos secundarios
Cuantificación y cinética de un proceso.

Esquema del patrón de crecimiento de una suspensión

celular vegetal
3.1 Metodologías para optimizar la producción
de metabolitos secundarios

Selección de especies vegetales apropiadas.

S. de líneas celulares mejoradas
Optimización de las condiciones de cultivo.
Agregado de precursores
Suspensiones, órganos y Cel. inmovilizadas
Uso de elicitores microbianos y de estreses abióticos
Permeabilidad y remoción in situ
 3.2 Metodologías para optimizar la producción
de metabolitos secundarios
Selección de líneas sobreproductoras. Esto se
ve favorecido cuando el metabolito de interés es un pigmento.
ELISA.

Optimización del medio de cultivo.

-Fuente de C, N , P
-Fuente de hormonas (auxinas, citoquininas, giberelinas).
-Relación C/N.

Agregado de precursores.
-Bajo coste
-Baja toxicidad
-No muy alejado del producto final en la ruta metabólica.
 3.3 Secuencia de optimización de un proceso
para la producción de M. secundarios
1. Selección de la planta por su contenido de metabolitos secundarios para
iniciar el Cultivo in vitro

2. Establecimiento de cultivos in vitro

2. Estabilización y aislamiento de cultivos in vitro: V de crecimiento,

niveles de producto, liberación al medio.

4. Optimización de medio de cultivo para la producción. Nutrientes,

precursores, elicitación, liberación y remoción in situ.

5. Optimización en biorreactores: Mejora. Sistema de cultivo: batch,

continuo, feed-batch, perfusión, en 2 ETAPAS:

-Extracción del producto

-Purificación del producto.
 4.Ingienería Metabólica y biotransformación.
Estrategias para modificar el M. secundario
por manipulación genética

Completar rutas metabólicas mediante inserción de genes

heterólogos.
Amplificar rutas normales
Bloquear rutas alternativas
Modificación de la regulación de las rutas normales.
Modificación de los mecanismos de secreción y exportación
Bloqueo de rutas de degradación.
4.1. Problemas de la Ingeniería metabólica

Clonación de genes
Estabilidad de líneas transgénicas
Compartimentalización de productos
Transporte y acumulación de productos
Limitaciones y arquitectura de la ruta metabólica
Canales metabólicos ( Limitación del flujo metabólico por
la Capacidad de las enzimas implicadas).
 4.2. Biotransformación
La Biotransformación es la conversión de un sustrato (natural o sintético)
por medio de un catalizador (enzima, células inmovilizadas, tejido u órgano)
en un producto complejo. Involucra varios procesos enzimáticos.
Requerimientos:
-Enzimas específicos en las células y cofactores.
-Velocidad de formación de producto debe de ser mayor que su
metabolización.
-El cultivo debe de tolerar el precursor y al producto.
-El precursor debe ingresar en la célula y el producto (M. secundario) debe de
ser secretado.
-El precursor tiene un valor menor al del producto.
 5. Aplicaciones de la Biotecnología Vegetal
Agricultura. Domesticación de plantas. Semillas resistentes a herbicidas.
Obtención de nuevas variedades. Plantas tolerantes a determinados alimentos
o sustancias tóxicas. Establecimiento de Simbiosis de tipo micorrizas (hongo-
Planta) para la fijación del N2 atm por la planta. Plantas resistentes a agentes
biológicos (virus, bacterias, hongos, insectos).

Alimentación. Eliminación de agentes que afecten a las cosechas. Costes

menores que la producción. Aumento tamaño sumideros (aumenta relación
Alimento/hectárea). Mejor calidad de los alimentos.
 5. Aplicaciones de la Biotecnología Vegetal
Mejoras relacionadas con: Proteínas, Grasas (oleico), Glúcidos (alfalfa),
carotenoides (arroz), minerales, etc.
Frutos y semillas. Frutos que duren más tiempo (tomates-peptidasas).
Flores que duren más tiempo (receptor de etileno). Frutos sin semillas
(auxinas).
Industriales. Grasas/aceites utilizados como (bio)combustibles (Biodiesel)
o lubricantes. Plantas de algodón transgénica (algodón de colores),
detergentes. Aditivos, colorantes, espesantes. Obtención de plásticos
biodegradables.
Sanidad. Medicinas, vacunas orales. Remediación a las caries etc.
Medio Ambiente. Fitoremediación, fitoextracción, fitodegradación,
rizodegradación, fitoestabilización etc.
 6. Perspectivas
Aspectos técnicos a resolver

Aspectos biológicos a resolver

 Referencias
Scientia et Technica Año XV, No 42, Agosto de 2009. Universidad Tecnológica de
Pereira. ISSN 0122-1701 257 Fecha de Recepción: 8 de junio de 2009
Fecha de Aceptación: 17 de Agosto de 2009
ELICITACIÓN DE RAÍCES CULTIVADAS IN VITRO DE Brugmansia candida
(SOLANACEAE) CON L-ARGININA, PRECURSOR DE ALCALOIDES
DEL TROPANO
ELICITATION OF IN VITRO CULTIVATED ROOTS OF Brugmansia candida
(SOLANACEAE) WITH LARGININE, PRECURSOR OF TROPANE ALKALOIDS

ESTRATEGIAS PARA INCREMENTAR LA PRODUCCIÓN DE METABOLITOS

SECUNDARIOS EN CULTIVOS DE CÉLULAS VEGETALES
STRATEGIES FOR THE IMPROVEMENT OF SECONDARY METABOLITES
PRODUCTION IN PLAN CELL CULTURES
Mario Arias Zabala1; Mónica Juliana Angarita Velásquez2;
Ana Maria Aguirre Cardona3; Juan Manuel Restrepo Flórez4 y Carolina
Montoya Vallejo5

Concepto y Técnicas en Biotecnología Alejandro Mentaberry

Departamento de Fisiología, Biología Celular y Molecular FCEN-UBA
Gracias por vuestra
atención