TEMA 13.

1
PRESENTACION DE PEPTIDOS
VIRALES POR MHC DE CLASE I
1.- EL PROTEASOMA. GENERACIÓN
DE PÉPTIDOS
The Proteasome - a multicatalytic protease

- around 700 kDa

- 7 rings of  subunits (active site)

- 2 outer rings of  subunits

- ATP-dependent degradation of
mostly ubiquitin-conjugated proteins

19S regulator:
- attached at both ends of 20S proteasome
- binds ubiquitin-tagged proteins

Kloetzel and Ossendorp, Curr. Opin. Immunol. 16 (2004)

 Immunoproteasome

1i = low molecular weight protein 2 (LMP 2)

2i = multicatalytic endopeptidase complex like 1 (MECL 1)
5i = low molecular weight protein 7 (LMP 7)
POMP = proteasome maturation protein
PA = proteasome activator

From Strehl et al., Immunological Reviews Vol.207, pp 19-30 (2005)

 ESTRUCTURA DE LOS PROTEASOMAS

α α α β β β
α α α α β β β β

IFN-gamma

β β β
LMP-2 α α α
LMP-7
MECL-1 Complejo Complejo
regulador 11S regulador 19S
(PA28) + ATP

Inmunoproteasoma Núcleo del

proteasoma
20S
Proteasoma
estándar
 DRiPs (defective ribosomal products)
Desestructuradas
Gastadas Dañadas Nuevas DRiPs
Fosforiladas Modulación alosterica

Etiquetado de Proteínas
Proteínas
proteínas Arg DB
para su PEST
traslado hacía Ubiquitinización No ubiquitinización
la vía del MHC
de clase I PoliUb Arg DB
PoliUb
PEST PoliUb
PoliUb
IFN-

Proteasoma estándard Inmunoproteasoma

Amino ácidos Péptidos Péptidos

Reciclaje por
ubiquitina

Péptidos cargados en el MHC clase I

Endogenous Ags: the cytosolic proteolytic system for
degradation of intracellular proteins

misfolded or
defective proteins:

intact proteins:
2. EL TRANSPORTADOR DE
PEPTIDOS
 TAP (transporter associated with antigen processing)
Transportadores asociados con el procesamiento antigénico (TAP1 y TAP2) forman un
transportador de péptidos en la membrana del retículo endoplasmatico

Proteínas de la familia
de casete de unión al
ATP (ABC), median el
transporte
dependiente de ATP
de iones, azucares,
aminoácidos a través
de membrana en
muchos tipos de
células

Los péptidos que se unen a moléculas del clase I se transportan de manera activa desde
el citosol hasta el retículo endoplasmatico.

El complejo TAP tiene especificad para péptidos de 8-16 a.a., con características
bioquímicas de los péptidos que se unen a las moléculas de del MHC de clase I.
3.-LA CARGA DEL PEPTIDO
4.- LAS MOLECULAS HLA DE
CLASE I
 GENES Y MOLÉCULAS HLA
HLA
Cromosoma 6

E G F

CLASE II CLASE III CLASE I

DR B-
α
β
DQ α
C-
β
α
DP A-

β
β2-microglobulina

Cromosoma 15
 ESTRUCTURA DE LA MOLÉCULA HLA DE CLASE I
45kDa – Lugar de unión al péptido
cadena
pesada
Región 2 1 Dominios de
polimórfica unión al péptido

N
N

3  2m Dominios tipo
Inmunoglobulina
C
12 kDa

Bicapa Dominio
lipídica transmembrana

Dominio
C intracitoplasmático

Oligosacáridos Puentes disulfuro

 ESTRUCTURA DE LA MOLÉCULA HLA DE CLASE I

A GRUTA DE UNIÓN AL PÉPTIDO

B
Dominio 2
Péptido

Dominio 1 Péptido
Región
polimórfica

C Péptido

Dominio 2 Dominio 1

Zona de
interacción
con CD8
2microglobulina
Dominio 3 2microglobulina
Dominio 3
Dominio
intracitoplasmático
5.- EL POLIMORFISMO DE
LAS MOLECULAS HLA DE
CLASE I
I
EL TCR RECONOCE AL PÉPTIDO Y A LA MOLÉCULA HLA

La célula T contacta con

residuos del péptido TCR

Residuos del HLA

polimórficos

Péptido extraño HLA

6.- CARACTERISTICAS DE
LOS PEPTIDOS
PRESENTADOS POR LAS
MOLECULAS HLA DE
CLASE I
Unión del péptido a la molécula Unión del péptido a la molécula
MHC de clase I: Residuos de anclaje situados en los MHC de clase II: Residuos de anclaje situados a lo
extremos del péptido largo de todo el péptido

Class II
β2M
α
α

α β

MHC class I molecules bind to MHC class II molecules can bind to 13 ~ 18 a. a. A

central core of 13 a.a. determines the ability of a
8 ~ 10 a.a., most commonly 9
peptide to bind class II.
 MHC de clase I MHC de clase II
A. Dominios de unión Péptido 1 Péptido 2 Péptido 3
Péptido 2
Péptido 1 Péptido 3

B. Péptidos en los bolsillos de unión

5
MHC de clase II
4 6
3 7
1 8 9
2
MHC de clase I

Unión del péptido a la molécula MHC de clase I: Unión del péptido a la molécula MHC de clase II:
Residuos de anclaje situados en los extremos del Residuos de anclaje situados a lo largo de todo
péptido el péptido
MHC de clase I

MHC de clase II
Each MHC isoform binds a characteristic set of peptides

-Anchor residues in peptides are important for binding to MHC

-Not all residues are important
Figure 3-29

Degenerate binding allows each MHC molecule handles many peptides.

Interacting T cells presented to CD8+ T cells presented to CD4+ T cells
Source of peptides endogenous exogenous
Ag processing pathway cytosolic pathway endocytic pathway
7.- EL RECONOCIMIENTO
DEL TCR DE LOS
LINFOCITOS CD8
 Hay dos tipos principales de moléculas del MHC
CD 8+ T celulas CD 4+ T celulas
Restringidas por MCH-I Restringidas por MCH-II
Reconocen Ag endógenos Reconocen Ag exógenos

Los linfocitos T siempre requieren que el antígeno sea procesado y presentado por
las células presentadoras del antígeno (APC)

PÉPTIDO ANTIGÉNICO
 PÉPTIDOS QUE SE UNEN A LAS MOLÉCULAS MHC DE CLASE I

Péptidos Endógenos – Vía citosólica- MHC de clase I – T-CD8+

TAP y Proteasomas
Péptidos de proteínas que han terminado su ciclo vital, dañadas, mal
ensambladas, etc,, péptidos propios

Péptidos derivados de virus y bacterias intracelulares, que utilizan la

maquinaria celular para replicarse

Péptidos derivados de antígenos tumorales

1. Processing of peptide antigens

2. Assembly of MHC and peptide

loading complex

3. Peptide loading and MHC-

peptide transport