UNIVERSIDAD NACIONAL DE TRUJILLO

E.A.P. MICROBIOLOGÍA Y PARASITOLOGÍA

Fisiología y Genética Bacteriana

Practica N° 04 - Esporulación de bacterias

Integrantes
• Alfaro Ayquipa sarita
• Alayo Pretell verónica
• Rodriguez Camarena Sharon
• Castillo Alcántara Angélica
• Díaz navarro Vanessa
• Huamán Gonzales Diana
• González Enriquez Leydi
• Burgos Arteaga Alondra
Introducción

 Algunas especies de bacterias Gram positivas

(principalmente de los géneros Bacillus, Clostridium,
Sporosarcina y Thermoactinomyces), disponen de una
serie de estrategias adaptativas cuando se ven
sometidas a privación de nutrientes en su medio
ambiente.

 Estos microorganismos son capaces de producir una

espora por célula altamente resistente en condiciones
adversas.
Objetivos
 Determinar el porcentaje de esporulación de Bacillus
 Determinar la capacidad de sobrevivencia de Bacillus

Materiales
Material biológico:
 Cultivo joven de Bacillus subtilis
Material y equipos de laboratorio:
 Balón de 50 ml  Asa bacteriológica
 Tubos de vidrio  Mecheros
 Laminas porta objetos  Microscopio
 Baño maría
Materiales
Medios de cultivos y reactivos:
 Caldo trioglicolato
 Medio Duncan – Strong

 Solución Salina Fisiológica estéril

 Colorantes Wirtz
1.Sembrar
Procedimientos
Bacillus subtilis

Choque
térmico
75°C x 15 min
37°C x 18 h
10ml
0.5 ml
Caldo tioglicolato

Tecnica de wirtz
5ml

43°C x 5 h Caldo
tioglicolato Caldo Duncan
 Incubar a 37°C x
Caldo Medio Duncan 16 h
1..0 ml tioglicolato

Observar presencia
de crecimiento
bacteriano
 Resultados y discusión

Figura n° 1 en Figura n° 2 en
Caldo tioglicolato Medio Duncan
Lo que deberíamos ver .
Hubo más crecimiento en
el medio Duncan
Tabla 1

Medio de cultivo Porcentaje de Capacidad de

esporulación sobrevivencia (+/-)

Caldo tioglicolato 0% +

Medio Duncan strong 0% ++

Discusión
Al realizar la practica para la determinación del porcentaje de
esporulación de Bacillus y para la obtención de los resultados se
pudo observar que en la figura n°1y 2 no hubo esporulación, ya que
las esporas deberán estar teñidas de color verde y los cuerpos
bacilares en rojo, por lo tanto se obtiene o % de esporulación. Esto
puede ocurrir porque existen factores que hayan impedido el
proceso de esporulación y estos pueden ser por que el cultivo joven
no haya sido el adecuado, no fue lo suficientemente fuerte el shock
térmico por ello la bacteria no entro en estrés y no esporuló o una
mala preparación de los medio de cultivo.

Para la determinar la capacidad de sobrevivencia de Bacillus, se

obtuvo resultados positvos ya que hubo crecimiento en ambos
medios esto se observo por la presencia de turbidez, en el medio
Dunca(DS) se pudo observar mayor turbidez que en el caldo
tioglicolato. Esto se debe a que los medios están compuestos de
nutrientes especiales que hacen que la bacteria se desarrolle con
facilidad.
Discusión
El caldo tioglicolato tiene fuentes de carbono y nitrógeno, el tioglicolato
sódico y la L-cistina son agentes reductores que previenen la acumulación
de peróxidos, que son letales para algunos microorganismos. En estas
condiciones es posible cultivar anaerobios en presencia de oxígeno
porque estos agentes reductores absorben el oxígeno libre y lo ponen
fuera del alcance de las bacterias. La resarzurina de sodio es un indicador
de los cambios de oxido-reducción del medio

El medio Duncan esta compuesto por extracto de levadura , peptona . La

esporulación se produce debido a la ausencia de azúcares
fermentables, ya que el medio sólo contiene almidón (poco
fermentable).