Alumna: Paola Elisa Vásquez

Rogers
CROMATOGRAFÍA EN COLUMNA Mtra: Susana Edith Hernández
Arrazola
Materia: Química Analítica II
 CONCEPTOS BÁSICOS
La cromatografía es un método ampliamente utilizado para la
separación, identificación y determinación de los componentes
químicos de mezclas complejas. Ningún otro método de separación
es tan poderoso y generalmente aplicable como la cromatografía.
Todos estos métodos tienen en común el uso de una fase
estacionaria y el de una fase móvil. Los componentes de una
mezcla son llevados a través de la fase estacionaria por la fase
móvil, y la separación se basa sobre las diferencias de las
velocidades de migración entre los componentes de la fase móvil.

Química Analítica, Skoog D.A., West D.M., Holler F.J. Crouch S.R. 7a Ed. Editorial, Mc GRAW-HILL, Mexico. (2001)
PRINCIPIOS DE LA CROMATOGRAFÍA

Imagen 1. Principio de la separación cromatográfica

(Dr, Navarro, 2000)

Cuando se tiene un grupo de moléculas, diversos factores conducen

a que se tengan “bandas cromatográficas”.
Tabla 1. Clasificación de los métodos de cromatografía en columna (Skoog, 2015:883)
Tipo de equilibrio
Clasificación general Método específico Fase estacionaria
químico
1. Cromatografía de a. Gas-líquido (CGL) Líquido adsorbido o enlazado a Partición entre un gas y
gases (CG) una superficie sólida un líquido
b. Gas-sólido Sólido Adsorción
2. Cromatografía a. Líquido-líquido o Líquido adsorbido o enlazado a Partición entre líquidos
líquida (CL) partición una superficie sólida inmiscibles
b. Líquido-sólido o Sólido Adsorción
adsorción Intercambio iónico
c. Intercambio iónico Resina de intercambio iónico Partición/tamizado
d. Exclusión molecular Líquido en los intersticios de un
sólido polimétrico
e. Afinidad Líquido grupo específico Partición entre una
enlazado a una superficie sólida superficie líquida y un
líquido móvil
3. Cromatografía de Especies químicas orgánicas Partición entre un fluido
fluidos supercríticos enlazadas a supercrítico y una
(CFS) (fase móvil: fuido una superficie sólida superficie enlazada
supercrítico).
En la cromatografía en columna, la
fase estacionaria se mantiene dentro
de un tubo delgado, y la fase móvil
es forzada a través del tubo
mediante presión o gravedad.
(Skoog, 2015: 882)

Imagen 2. Cromatografía en columna

 CROMATOGRAFÍA DE
ELUCIÓN EN COLUMNA

Imagen 3. a) Diagrama que muestra la

separación por cromatografía de elución en
columna de una mezcla de los componentes A y
B. b) La señal del detector en las diferentes
etapas de la elución se muestra en a). (Skoog,
2015: 884)
CROMATOGRAMA
Es una gráfica de alguna función de
la concentración de soluto contra el
tiempo o volumen de elución.
Las posiciones del máximo de los
picos en el eje que representa al
tiempo pueden ser utilizadas para
identificar los componentes de la
muestra. Las áreas debajo de los
picos proporcionan una medida
cuantitativa de la cantidad de cada
especie química en la muestra.
Imagen 4. Cromatograma (Skoog, 2015: 884)
(Skoog, 2015: 884)
 COMPONENTES DE
UNA COLUMNA

Imagen 5. Componentes de una columna

 PREPARACIÓN DE LA COLUMNA

En la parte inferior del Agregar 1 cm de Si la filtración es muy

embudo colocar una hexano, una gota de lenta agregar metanol,
capa de algodón, muestra y añadir siempre cuidando la
para después agregar tolueno cuidando altura de la columna y
SiO2 a 2 o 3 cm siempre tener la altura observar los cambios
de la columna de color
CROMATOGRAFÍA EN COLUMNA RÁPIDA
El disolvente se hace atravesar
la fase estacionaria aplicando
una presión positiva. Esto hace
que las separaciones mejoren
en resolución y se pueda
disminuir el tiempo de elución,
por lo cual constituye un método
de elección.

Imagen 6. Cromatografía en columna. (Márquez, 2015: 38)

APLICACIONES DE LA CROMATOGRAFÍA EN
COLUMNA
Separar los componentes de la mezcla, para obtenerlos más puros
y que puedan ser usados posteriormente.
Medir la proporción de los componentes de la mezcla.
Limpieza de preparados.
 EJEMPLO

Imagen 7. Principio de la
separación cromatográfica (Dr,
Navarro, 2000)