BIOTECNOLOGÍA

VEGETAL

LUZ VILCANQUI CHURA

 BIOTECNOLOGÍA VEGETAL
DEFINICION: es el conjunto de técnicas que utilizan organismos vivos o
partes de ellos para obtener productos o modificarlos, para mejorar
plantas, con fines bien determinados, es decir, para la obtención de bienes y
servicios. La biotecnología vegetal es la específica de las plantas.
Es la aplicación de la ciencia y la tecnología a las plantas, sus partes,
productos y modelos con el fin de alterar materiales vivos o inertes para el
desarrollo de conocimientos.

CULTIVO DE TEJIDOS VEGETALES

El cultivo de tejidos vegetales es utilizado como herramienta fundamental en
un número importante de áreas y técnicas de la investigación y la producción
vegetal, todas ellas relacionadas a lo que actualmente se conoce
como biotecnología vegetal.
 APLICACIONES DE LA BIOTECNOLOGÍA
VEGETAL EN LA PRODUCCIÓN DE ALIMENTOS

Las aplicaciones potenciales de la biotecnología vegetal sobre la

producción de alimentos son enormes y prácticamente todos los
cultivos alimentarios pueden beneficiarse en una forma u otra de las
nuevas técnicas.
• Mayores rendimientos por hectárea.
• Incremento de las superficies cultivables sobre todo por
incorporación de tierras en las que las condiciones ambientales son
desfavorables.
• Mayor calidad de los productos.
APLICACIONES DE LA BIOTECNOLOGÍA VEGETAL EN
LA PRODUCCIÓN DE ALIMENTOS

Son cuatro los enfoques principales, mediante los cuales la

biotecnología vegetal contribuye:
• La multiplicación masiva de cultivares sanos sanos y de alta calidad a
través de la técnicas de propagación in vitro conocidas como
micropropagación.
• La generación de germoplasma libre de enfermedades.
• La generación de plantas con nuevas características genéticas.
• La conservación de germoplasma por medio de cultivos in vitro
contribuirá también, aunque indirectamente, al mejoramiento de los
cultivos.
¿Por qué las plantas?
• Son los grandes fabricantes de oxigeno.
• Componentes clave de los ciclos biológicos
básicos (ciclo del agua, formación del suelo)
• Fuente principal de energía y material orgánico
en los ecosistemas.
• Base de la cadena alimentaria.
 ¿Cuáles son los retos de la
agricultura del siglo XXI?
• Mayor rendimiento por hectárea.
• Asegurar el alimento de una población que
crece.
• Incrementar la calidad de los alimentos y la
seguridad alimentaria.
• Agricultura mas compatible con el medio.
 EL CULTIVO IN VITRO DE CÉLULAS, TEJIDOS,
ÓRGANOS VEGETALES Y SU TOTIPOTENCIALIDAD
La biotecnología vegetal se fundamenta en la posibilidad de
cultivar in vitro células, tejidos u órganos vegetales y de
regenerar, a partir de ellos, plantas completas. Si el proceso de
cultivo es muy eficiente obtendremos miles de individuos
clonales, si estos se derivan de células sanas que no albergan a
ningún microorganismo patógenos las nuevas plantas estarán
completamente libres de enfermedades. Si las células han
sufrido algún cambio genético y poseen una nueva
característica, las plantas que se deriven de ellas expresaran
también esa nueva característica.
CULTIVO IN VITRO
Un cultivo in vitro es aquel realizado sobre un medio
nutritivo en condiciones estériles. Puede ser de:
plantas, semillas, embriones, órganos, explantos,
células y protoplástos.
Consiste en colocar un trozo de tejido,
órgano o embrión, llamado
“explante”, en medios artificiales y en
condiciones ambientales
determinadas para regenerar un
individuo completo. Es una
reproducción vegetativa, pero
utilizando minúsculos propágulos
(idealmente una sola célula) en lugar
de esquejes, estacas, rizomas, yemas
injertadas, entre otras; y técnicas
propias de la microbiología en vez de
las tradicionales en agricultura.
Entonces cultivo in vitro, se define
como el cultivo sobre un medio
nutritivo, en condiciones estériles, de
plantas, semillas, embriones, órganos,
tejidos, células y protoplastos de
plantas.
 CARACTERÍSTICAS DE CULTIVO IN VITRO
• Se realiza a micro-escala, sobre una superficie relativamente
pequeña.
• Se optimizan las condiciones ambientales, en lo que se refiere a los
factores físicos, nutricionales y hormonales.
• Se excluyen todos los microorganismos (hongos, bacterias y virus), y
plagas (insectos y nemátodes).
• La capacidad de cultivar protoplastos o células individuales permite
manipulaciones que antes eran imposibles.
• El nombre de cultivo in vitro (quiere decir “en vidrio”), por que al
inicio se usaron recipientes de vidrio para el cultivo.
 EXPLANTE
Todos los cultivos se inician a partir de un explante que puede ser un
fragmente de tejido u órgano de cualquier parte de la planta (hoja,
tallo, raíz, yemas, etc).
 CULTIVO DE CÉLULAS Y TEJIDOS
DESDIFERENCIADOS
Las células del explante, ejm. El parénquima de la hoja, comienza a
dividirse de manera acelerada y desorganizada formando una masa de
células llamada callo. Los callos pueden ser mantenidos por largos
periodos y transferirse en forma periódica a medios de cultivo fresco.
 ORGANOGÉNESIS
Un callo es cultivado bajo condiciones adecuadas de luz,
temperatura y nutrientes, las células inician una división
ordenada para dar lugar a un brote que se desarrolla en un
tallo.
Al transferirse a un medio fresco con un cociente menor de
citocina/auxina, en muchos casos, carente de citocinas se
induce la formación de raíces en la base de los tallos.
A elevadas concentraciones de auxinas los callos forman
raíces directamente, pero incapaz de formar tallo al
transferirse a un medio elevado de citocinina.
Si los brotes son transplantados a medios con citocinina en
lugar de hacerlo a un medio de enraizamiento, es posibles
inducir la formación de nuevos brotes.
 CULTIVO DE MERISTEMOS
Es un método efectivo para la eliminación de
infecciones virales y es el material preferido para la
conservación de germoplasma
Cultivo de yemas axilares y principalmente, de yemas
apicales es de gran importancia por dos razones:
1. Porque siendo ya tejidos organizados presentan
una gran estabilidad genética.
2. Los meristemos apicales se encuentran por lo
general libre de patógenos.
Los meristemos se desarrollan directamente en tallos.
 EMBRIOGÉNESIS
Proceso mediante el cual se desarrolla un embrión a partir
de una célula o huevo fertilizada o asexualmente desde un
grupo de células somáticas (embriogénesis somática).
Cuando los embriones se forman directamente de las células del
explante se denominan embriogénesis directa, cuando se forman a
partir de callo se denomina embriogénesis indirecta.
Los embriones somáticos germinan desarrollándose en plántulas
completas con tallo y raíz para ser transferidas a tierra. O encapsulados
en matrices gelatinosas para formar lo que se llama semillas artificiales.
 EMBRIOGENESIS SOMATICA
PROCEDIMIENTO PARA LA REGENERACIÓN VÍA EMBRIOGÉNESIS SOMÁTICA

• 1. INICIACIÓN:
• CALLOS EMBRIOGÉNICOS
• 2. PROLIFERACIÓN:
• CALLOS EMBRIOGÉNICOS, MASAS PROEMBRIOGÉNICAS (PEM)
• 3. DESARROLLO Y MADURACIÓN DE EMBRIONES:
• EMBRIONES
• 4. GERMINACIÓN DE EMBRIONES (REGENERACIÓN)
• ESTADÍOS DE DESARROLLO EN DICOTILEDÓNEAS:
• MASAS PROEMBRIOGÉNICAS
• ESTADÍO GLOBULAR
• TORPEDO
• EMBRIÓN SOMÁTICO
CULTIVO DE CÉLULAS HAPLOIDES
Cuando los gametos, polen u óvulos son empleados como explante
inicial el resultado es una planta que posee la mitad del numero
cromosómico de la especie.
 MICROPROPAGACIÓN
Permite el crecimiento y desarrollo
de material vegetal en recipientes
que lo separan del ambiente exterior
y lo mantienen en condiciones
controladas y asépticas. Entre las
diversas técnicas de cultivo in vitro,
la micropropagación consiste en la
producción clonal de vegetales a
partir generalmente de ápices o
explantos nodales de una planta
madre.
 MICROPROPAGACIÓN
Proceso de multiplicación vegetativa in vitro.
Su principal objetivo es multiplicar con eficacia una planta produciendo individuos
con un fenotipo fiel al del individuo parental. Los proceson mas comunes son:
1. Cultivo de meristemos.
2. Embriogénesis directa de un tejido somático.
Propagación de plantas por yemas axilares:
Propagación de plantas por embriogénesis
somática
 FASES DEL PROCESO DE MICROPROPAGACIÓN
1. Fase 0: Preadaptación del material parental a condiciones homogéneas
que favorezcan la multiplicación vegetativa in vitro.
2. Fase I (Inducción): Es la primera etapa del cultivo durante la cual se
induce el desarrollo de los meristemos o la embriogénesis por medio del
empleo de citocinina.
3. Fase II (Multiplicación): Los tallos inducidos en la primera fase son
multiplicados por medio de la inducción de brotes adventicios para
aumentar el numero de plantas que se derivan de una sola planta madre.
4. Fase III (Enraizamiento): Los tallos producto de las fases I y II son ahora
tratados para inducir la formación de raíces y producir plántulas
completas.
5. Fase IV (Transplante): Esta es la etapa mas difícil del cultivo, cuando las
plántulas salen del medio ambiente estéril y rico en nutrientes del tubo
de ensayo para iniciar su desarrollo en tierra.
 TIPOS
DE
MICROPROPAGACIÓN
APLICACIÓN DE LA MICROPROPAGACIÓN

• PRODUCCIÓN COMERCIAL
• SANEAMIENTO DE CULTIVARES
• CONSERVACIÓN DE GERMOPLASMA
• OBTENCIÓN DE VARIACIÓN SOMACLONAL
• RESCATE DE EMBRIONES
• OBTENCIÓN DE HÍBRIDOS SOMÁTICOS
• OBTENCIÓN DE HAPLOIDES
• TRANSFORMACIÓN DE PLANTAS
OBTENCIÓN DE EXPLANTO Y DESINFECCIÓN
En laboratorio
• Agua corriente
• Se retiran hojas
• Soluciones desinfectantes (etanol – hipoclorito de sodio)
• Enjuagues con agua estéril en cabina de flujo laminar.
 EN LABORATORIO
Acondicionamiento del
fruto y extracción de
semilla
Siembra de embriones
en condiciones asépticas
Germinación in vitro
 In vitro

sustrato
Ambientados
 CULTIVOS in vitro
• CULTIVOS DIFERENCIADOS ( RAÍCES, TALLOS, EMBRIONES, RAÍCES
Y TALLOS TRANSFORMADOS)

• CULTIVOS INDIFERENCIADOS ( CALLOS, SUSPENSIONES)

 MEDIO DE CULTIVO

 Mezcla de sustancias en las que las células, tejidos y

órganos pueden crecer y desarrollarse.
 Sustancias inorgánicas, como: N, P, K, Ca, Mg, Cl, Na,
Cu, Zn, Mn, Fe, Bo, Mo, Co, I.
 Suplementos orgánicos complejos, como: leche de
coco, extracto de levadura.
 Reguladores de crecimiento (hormonas).
 Fuente de carbono (sacarosa) ya que no son
completamente autotróficas .
 Con o sin agar (medio semi -sólido o líquido)
 Sin agua y nutrientes minerales una planta no puede
vivir in vitro e in vivo.
 Necesidades nutricionales y hormonales de los cultivos de órganos y tejidos vegetales

Agua
Macro Micro
Sustancias orgánicas
elementos

Fe
Azúcares N Zn
Aminoácidos B
P Mn
Auxinas K Cu
Citoquininas Ca Ni
Co
Giberelinas Mg Al
Acido abcísico S Mo
I

Mezclas de sustancias poco definidas:

Extracto de levadura
Leche de coco
Extractos vegetales
Hidrolizados de caseína
agar
 ORGANOGÉNESIS

FORMACIÓN DE
TALLOS, RAÍCES,
FLORES, ETC.

Explanto

Organogénesis

Formación de tallos Formación de raíces

Enraizamiento Tallos
Planta completa
 REGULADORES DE CRECIMIENTO
HORMONAS/ FITOHORMONAS

AUXINAS: Grupo de hormonas vegetales (naturales o sintéticas) que

inducen la elongación, o en algunos casos la división cellular.
frecuentemente inducen raíces adventicias e inhiben la formación de
tallos adventicios.
CITOKININAS: Grupo de hormonas vegetales (naturales o sintéticas)
que inducen división celular y frecuentemente tallos adventicios y en
muchos casos inhiben la formación de raíces adventicias.

REGLAS GENERALES PARA LA ACCIÓN HORMONAL:

• AUXINA : CYTOKININA = ~1 CALLO

• AUXINA : CYTOKININA < 1 TALLO
• AUXINA : CYTOKININA > 1 RAÍCES