CRECIMIENTO, NUTRICION

Y METABOLISMO
BACTERIANOS
Para el crecimiento de las bacterias se requiere
de un conjunto de reacciones y transformaciones
químicas que tiene lugar en un microorganismo
para mantener su viabilidad.
Permitiendo así, conocer el modo de vida y el
hábitat de diferentes especies bacterianas.
 Metabolismo bacteriano
Metabolismo:
Conjunto de reacciones
bioquímicas que realiza
una célula.

Catabolis Anabolis
mo mo

Anabolismo:
Catabolismo:
Procesos de síntesis de
Proceso de degradación
constituyentes celulares a
de los compuestos
partir de moléculas más
orgánicos. Producen
sencillas. Requiere energía.
energía.
 ENZIMAS BACTERIANAS

Las enzimas son compuestos que están presentes

en todos los seres vivos; su papel en las células
consiste en aumentar la velocidad de las reacciones
químicas.

ESTRUCTURA

Las enzimas contienen una parte proteica

denominada apoenzima, y un componente
no proteico denominado cofactor.
Éstos constituyen la enzima completa u
holoenzima.
MECANISMO DE CLASIFICACIÓN
ACCIÓN
Según la reacción
química: La terminación
Las enzimas poseen “asa” corresponde a la
en su superficie una función de las reacciones
específicas en las que
zona denominada sitio está implicada:
de unión que va a
interaccionar con 1- Oxidorreductasas
otra parte superficial 2- Transferasas
3- Hidrolasas
de la molécula del 4- Liasas
sustrato. 5- Isomerasas
6- Ligasas
 Según la localización
biológica:
1- Endoenzimas o enzimas
intracelulares: Se
sintetizan y ejercen su
actividad en el interior de
la célula y permanecen allí.
2- Exoenzimas o enzimas
extracelulares: Se
producen en el interior
celular pero son
excretadas al exterior.
Según el efecto del
sustrato:
Pueden ser:
1-Constitutivas: Son producidas
por las células en la mayoría de las
condiciones ambientales y no
requieren presencia de un sustrato
específico para su formación.
2-Reprimibles: Es cuando el
producto puede llevar a cabo una
inhibición enzimática.
3-Inducibles: Son elaboradas
exclusivamente cuando esta
presente el sustrato específico en
el medio.

REGULACIÓN DE LA
ACTIVIDAD
ENZIMÁTICA
Temperatura:
La actividad e una enzima se
incrementa con un aumento del
temperatura, cuando sobrepasa
un nivel crítico se produce su
desnaturalización por rotura del
los puentes de hidrógeno y otros
enlaces covalentes que
mantienen la estructura
tridimensional de la enzima.
El pH:
Todas las enzimas tienen un pH
en el cual su actividad es máxima.
Por encima y por debajo de este
pH disminuye dicha actividad y la
velocidad e acción.
Concentración del sustrato:
La velocidad de la reacción
catalizada por las enzimas está
limitada por la concentración del
sustrato. En condiciones
normales, las enzimas no se hallan
saturadas por los sustratos, o
incluso se encuentran inactivas
por ellos.
 Inhibidores:
Activadores
:
Los inhibidores enzimáticos son
de dos tipos: Aumentan la
1-Competitivos: Aquellos que actividad
compiten con el sustrato normal enzimática.
por los centros activos de las Es el caso
enzimas.
de muchos
2-No competitivos: No compiten
con el sustrato por los centros iones como
activos sino que actúan en otros Na+, K+,
lugares provocando modificaciones Ca2+, Mg2+,
moleculares en la enzima que
secundariamente repercuten
Mn2+, etc.
sobre los centros activos.
 NUTRICIÓN BACTERIANA

• NUTRIENTES: sustancias que se

emplean en la biosíntesis y
producción de energía, necesarios
para el crecimiento microbiano.
 TIPOS DE NUTRIENTES

METABOLITOS
BASICOS
ESCENCIALES

NUTRIENTES

FACTORES DE FACTORES
CRECIMIENTO ESTIMULANTES
 MACRONUTRIEN
TES
BASICOS

MICRONUTRIEN
TES
 Macronutrientes: carbohidratos, lípidos,
proteínas; como el oxigeno, carbono,
hidrogeno, azufre y el fosforo.

 Micronutrientes: son pequeñas

concentraciones de algunos
elementos necesarios para el
desarrollo bacteriano como el
cobre, el cobalto, zinc,
manganeso, etc… Estos en
grandes cantidades son tóxicos
para las bacterias.
 MACRONUTRIENTES
Fuente de - CO2
carbono - Compuestos Carbohidratos, azúcares,
orgánicos proteínas, aminoácidos,
lípidos, ácidos grasos,
glicerol
Fuente de - Inorgánica NH4, NO3-, N2
nitrógeno - Orgánica Proteínas, peptonas, aa,
bases púricas y
pirimídicas, urea
Fuente de - Inorgánica Fosfatos
fósforo - Orgánica Esteres del ácido
fosfórico
Fuente de - Inorgánica Sulfuros y sulfatos
azufre - Orgánica Aminoácidos sulfurados,
vitaminas
 Micronutrientes
• Elementos traza:
– Manganeso, cinc, cobalto, molibdeno, níquel y
cobre.
• Necesarios en muy pequeñas cantidades.
• Son parte de enzimas y cofactores.
• Facilitan la catálisis de reacciones.
• Ayudan a mantener la estructura de la membrana.
  Son productos que se
forman como resultado de
los procesos catabólicos
bacterianos y son
importantes para la
síntesis de estructuras
complejas de las
bacterias.
 PIRUVATO Y ACETIL CO “A”
Son compuestos orgánicos que sin ser fuentes de
energía o carbono son necesarios para el
crecimiento bacteriano pero, no todas las
bacterias pueden sintetizarlos.

 Las bacterias protótrofas pueden sintetizar factores

de crecimiento.

 Las bacterias auxótrofas son capaces de hacerlo

respecto a un determinado compuesto.
FACTORES DE CRECIMIENTO

Amino ácidos
Para síntesis de proteínas
Purinas y pirimidinas
Para síntesis de ácidos nucleicos
Vitaminas
Tienen múltiples funciones
Son moléculas orgánicas pequeñas
bases púricas y pirimídicas ADN, ARN
aminoácidos esenciales síntesis proteica
vitaminas coenzimas

18
Son sustancias no
indispensables para las
bacteria pero que
aceleran su
multiplicación.
 Fuente exógena: le aporta nutrientes a las bacterias porque el
HUESPED toma compuestos del exterior de ellos obtienen los
nutrientes necesarios para su desarrollo.
 Fuentes endógenas: es a través de secreciones (saliva, Fluidos
vaginales y otros compuestos orgánicos).
 Fuentes interbacterianas : las bacterias pueden obtener sus
nutrientes a partir de otras bacterias de 2 formas:
1) Degradativa: cuando parten macromoléculas para hacerlas
asimilables y así ser utilizadas por ellas mismas u o tras bacterias.
2) Excretoras: cuando producen una excesiva cantidad de sustancias
que al excretarlas sirven como fuente nutricional a otras
bacterias.
ORIGEN DE LOS NUTRIENTES
BACTERIANOS
Fuentes de carbono, energía y electrones
• Fuentes de carbono:
– Autótrofos: Utilizan CO2 como única o principal fuente de carbono
– Heterótrofos: Utilizan moléculas orgánicas precedentes de otros
organismos

• Fuentes de Energía:
– Fototrofos: Luz
– Quimiotrofos: Oxidación de compuestos orgánicos o inorgánicos

• Fuentes de electrones:
– Litótrofos: moléculas inorgánicas reducidas
– Organotrofos: moléculas orgánicas

22
 TIPOS NUTRICIONALES
QUIMIÓTROFOS
FOTÓTROFOS
ORGANÓTROFOS
HETERÓTROFOS LITÓTROFOS
AUTÓTROFOS
Protozoos, hongos,
Bacterias no fotosintéticas Algas, bacterias púrpuras
(mayoría de microorganismos Y verdes del azufre,
Patógenos) Cianobacterias.

QUIMIÓTROFOS FOTÓTROFOS

LITÓTROFOS ORGANÓTROFOS
AUTÓTROFOS HETERÓTROFOS

Bacterias oxidantes del azufre, Bacterias púrpuras y

Hidrógeno, nitrificantes, verdes no sulfúreas
Oxidantes del hierro.
Tipos nutricionales Fuente de Fuente de Ejemplos
energía C
Cianobacterias,
Fotoautótrofos Luz CO2 bacterias
púrpuras y
verdes
Compuestos Algunas
Fotoheterótrofos Luz orgánicos bacterias
púrpuras y
verdes
Compuestos Algunas
Quimioautótrofos o inorgánicos CO2 Eubacterias y
litótrofos ej.: H2, NH3, muchas Archaea
NO2-, H2S
La mayoría
Quimioheterótrofos Compuestos Compuestos Eubacterias,
o heterótrofos orgánicos orgánicos algunas Archaea
CRECIMIENTO BACTERIANO

• Es el incremento de todos los

constituyentes en un microorganismo.
• Proceso de división celular por fisión
binaria o esciparidad.
• Es el cambio en la población bacteriana
que ocurre a través de la multiplicación
de las células.
• Este ciclo también es mencionado por
muchos autores como la curva del
crecimiento bacteriano, por que cuando se
estudia el desarrollo de un cultivo
bacteriano se observa que va pasando por
varias etapas sucesivas, con características
diferentes y muy especificas.
FASES DEL CRECIMIENTO BACTERIANO

1. LATENCIA 2. LOGARITMICA
FASES DEL
CRECIMIENTO
BACTERIANO
3. ESTACIONARIA 4. MUERTE
 Fase de latencia (lag):
• Fase de latencia (lag):
– Introducción de microorganismos a un
medio de cultivo.
– No hay división celular inmediata.
– Están replicando su DNA.
– No hay incremento de la población.
– La célula está sintetizando nuevos
componentes.
– Depende de la juventud de las células,
del medio en que se cultivan o
traspasan, etc.
– Aproximadamente 4 horas.
- Periodo de multiplicación
constante. En esta fase el grado
de desarrollo es máximo.
- La población de
microorganismos es casi
uniforme en composición
química, actividad metabólica y
otras características
fisiológicas..
 Fase exponencial o logarítmica:

– Los microorganismos crecen y se dividen hasta su

nivel máximo.
– Después de 6 horas.
– La población es uniforme, química y
fisiológicamente.
– En esta fase se realizan los estudios bioquímicos y
fisiológicos de las colonias.
El desarrollo comienza a disminuir y vuelve
gradualmente a presentar una línea recta.

Se atribuye a diferentes factores, principalmente al

agotamiento de nutrientes del medio y a la
producción de sustancias toxicas que se acumulan
en el medio.

Esto lleva a un equilibrio entre el índice de

supervivencia y mortalidad- (numero de bacterias
vivas igual al numero de bacterias muertas) lo que
hace que la población se mantenga constante por
un tiempo por que cesa la división celular
 Fase estacionaria:

– Se llega a una concentración de 109 células

por mL.
– El número total de microorganismos
viables permanece constante.
– Existe una limitación de los nutrientes.
– Algunas bacterias responden con cambios
como: formación de endosporas, reducción
de tamaño.
– Las bacterias se vuelven más resistentes.
 Después del periodo estacionario las bacterias
comienzan a morir, durante la fase de muerte, el
numero de células viables descienden.
Las bacterias mueren en diferentes periodos de igual
manera que lo hacen al desarrollarse. algunas
especies de cocos gram negativa mueren
rápidamente , de tal manera que habría muy pocas
células viables en un cultivo prolongado de 72 horas
y en ocasiones un poco menos. otra especie mueren
tan lentamente que pueden persistir células viables
durante meses o años.
 FASE DE MUERTE:
– Disminución del
número de células
viables.
– No existe multiplicación
celular.
– Esta fase es logarítmica,
producida en
condiciones de
laboratorio.
CURVA DE CRECIMIENTO
BACTERIANO

35
 Crecimiento bacteriano
La curva de crecimiento se basa en:
 un cultivo microbiano.
 en un medio líquido.
 sistema cerrado.
 nutrientes entregados en la fase
inicial es mayor que los residuos de la
fase final.
Factores ambientales sobre el crecimiento
bacteriano
• El crecimiento está influenciado por factores
físicos y químicos del ambiente en que se
encuentran.
• Factores como: efecto de solutos y la actividad
del agua, pH, temperatura, nivel de oxígeno,
presión y radiación.
 Solutos y actividad del agua
• Cuando la osmolaridad del entorno se vuelve más
baja que la del citoplasma.
– Reducción por cuerpos de inclusión.
– Apertura de canales sensibles a la presión osmótica.
– Osmotolerantes pueden crecer en una amplia
concentración osmótica.
– Halófilas necesitan niveles elevados de cloruro de
sodio, condiciones hipertónicas.
 pH
El pH es la acidez o alcalinidad de una
solución.
Medida de la actividad de los iones de
hidrógeno de una solución.

Clasificación de los microorganismos según

su pH óptimo
Neutrófilo: pH óptimo 7 - Ej.: bacterias
patógenas humanas.
Acidófilo: pH óptimo  7 - Ej.: muchas de
las archeobacterias y hongos.
Basófilo: pH óptimo  7 - Suelos y aguas
ricas en carbonatos
 TEMPERATURA
• Las temperaturas cardinales dependen de:
– Cada microorganismo
– Factores ambientales como pH y nutrientes.
– Tº óptima puede variar de 0 – 75º C
– Tº crecimiento de -20 – 100º C, con una variación
de 30º
TEMPERATURA
Reacciones enzimáticas
En aumento constante

Reacciones enzimáticas
A máx. velocidad

Desnaturalización proteica,
Gelificación de membrana, Colapso de membrana,
Transporte lento, Lisis térmica.
No hay crecimiento.
 TEMPERATURA

mínima óptima máxima

Psicrófilos 0º C 15º C 20º C Bacterias
oceánicas

Psicrótofos 0º C 20 – 30º C 35º C Bacterias

deterioro de
alim. Refrig.

Mayoría de
Mesófilos 15 -20º C 20 – 45º C 45º C bacterias
patógenas

Termófilos 45º C 55 – 65º C sup. a 65º C Bacterias,

hongos y algas

Hipertermófilos 55º C 80 – 113º C 113º C Bacterias

aisladas del
suelo marino
TEMPERATURA
 CONCENTRACIÓN DE OXÍGENO
• Aerobios organismo que necesita O2 para crecer.
• Anaerobio organismo que puede crecer en ausencia de O2.
• Anaerobio facultativo no requieren O2 para
crecer, pero lo hacen mejor en su presencia.
• Anaerobio aerotolerante pueden crecer con presencia
o ausencia de O2.
• Anaerobio estricto no crecen en presencia de O2
• Microaerófilos necesitan niveles de O2 bajos (2-10%)
Potencial de oxido reducción: eH
CONCENTRACIÓN DE OXÍGENO

Anaerobio Anaerobio Microaerófilo Anaerobio

Aerobio estricto aerotolerante
facultativo
Requerimientos de oxígeno

A B C D

Aerobio Anaerobio Microaerófilo Anaerobio

estricto estricto facultativo

47
 PRESIÓN
• No afecta a microorganismos de la superficie
terrestre.
• Presión de 1 atmósfera.
• En el océano puede alcanzar 600 – 110 atm, y
Tº es de 2 – 3º C.
• Barotolerantes un aumento de la
presión les afecta negativamente.
• Barófilos crecen a presiones elevadas.
FACTORES AMBIENTALES SOBRE EL
CRECIMIENTO BACTERIANO
 DETERMINACION DEL CRECIMIENTO
BACTERIANO
METODOS DIRECTOS
• Recuento en placa
• El numero mas probable
• Metodo de filtracion
• Recuento en camara
• Citometro de flujo .

METODOS INDIRECTOS
• Medicion del peso
• Metodos analiticos
• Turbidimetria

50
 Recuento en placa
Muestra 5 microlitros Placa

5 µl ---------- 45 colonias
1000 µl (1ml) ---------- 1000 x 45 / 5 = 200 x 45

Número de colonias __ 9000 = UFC/ml

51
MEDIOS DE CULTIVO

El material alimenticio en el
que crecen los
microorganismos es el Medio
de Cultivo y
el crecimiento de los
microorganismos es
el Cultivo.
 Clasificación

Composición y
Consistencia Origen
utilización
C
Liquido
o
n
s
i
s
t Solido

e
n
c
i Semisólido
a
O Medios naturales

r
i
g Medios sintético

e
Medios semisintético
n
C Medios simples
o
Medios enriquecidos
m
p
Medios selectivos
o
s
Medios diferenciales
i
c Medios de recuento
i
o
Medios de transporte
n
 Clasificación según el uso en laboratorio

Tipo de medio Función

Enriquecido Adición de sangre, suero o extractos de tejidos de animales y plantas al caldo
nutritivo, proporciona sustancias nutritivas a organismos heterótrofos
exigentes
Selectivo Adición de sustancias químicas específicas que inhibe el crecimiento de cierto
tipo de microorganismos
Diferencial Adición de sustancias químicas que pone de manifiesto características
metabólicas de microorganismos y diferenciar estas características de forma
visible
De prueba Medio que permite la prueba de agentes desinfectantes o los efectos de
alguna sustancia química en los microorganismos como antibióticos,
aminoácidos y vitaminas
Para conteo de Medio que permite determinar el número de unidades formadoras de colonias
colonias (UFC)
Caracterizarción Medio para determinar el tipo de crecimiento de los microorganismos, así
de bacterias como definir la capacidad de producir cambios químicos
Mantenimiento Medio de preservación fisiológica y viabilidad de un cultivo en condiciones
básicas o elementales
MEDIO SELECTIVO Y
DIFERENCIAL
Colonia Lactosa negativa

Colonia Lactosa positiva

HEMOLISIS EN AGAR SANGRE

HEMÓLISIS COMPLETA HEMÓLISIS PARCIAL

 SÓLIDOS

LÍQUIDOS

SEMISÓLIDOS

Clasificación de los medios de

cultivo según consistencia
 semisólido

Liquidos
 MEDIOS DE CULTIVO
Para que las bacterias crezcan adecuadamente
en un medio de cultivo artificial debe reunir
una serie de condiciones como son:
temperatura, grado de humedad y presión de
oxígeno adecuado, así como un grado correcto
deacidez o alcalinidad.
 CONDICIONES PARA EL CRECIMIENTO MICROBIANO
Agua
Medios de cultivo Fuentes de energía
Fuentes de C, N, y
otros elementos
Nutrientes
Micronutrientes,
Crecimiento Factores de
crecimiento

PH
Condiciones Temperatura
Luz
de cultivo Aireación
Actividad del agua
Potencial redox
COMPOSICIÓN DE LA CÉLULA BACTERIANA

CARBONO (50%)
FÓSFORO (3%)
NITRÓGENO (14%)
OXÍGENO (20%)
HIDRÓGENO (8%)
SULFURO (1%)
POTASIO (1%)
CALCIO (0,1%)
SODIO (1%)
HIERRO (0,2%)
OTROS (0,3%)
 Medios de Cultivo
• Los estudios en la microbiología
dependen grandemente de la capacidad
de cultivar y mantener microorganismos
en un laboratorio. Para esto, se deben
tener disponible los medios de cultivo
apropiados.

68
 Aislamiento primario

Muestras clínicas
Medio de cultivo 69
• 3 técnicas de siembra de cultivos:
–Siembra en Estrías
• Medio solido frio

–Siembra en Profundidad
• Con diluciones en agar temperado 45°C

–Extensión
• Se extiende la muestra uniformemente con
una varilla estéril

70
Siembra en estría

71
 Aislamiento primario
Siembra por estrías

Inicio de la
siembra

Final de la
siembra
72
• Colonia= formación o agrupación
macroscópicamente visible de
microorganismos sobre un medio sólido.

73
Morfología de colonias bacterianas

74