 Diferencias de manera mas explicita los microorganismos

 separar y clasificar los microorganismos de acuerdo a sus características

 Se emplea dos o mas reactivos

 Tinción de Gram
SE COMPONE DE 4 REACTIVOS DIFERENTES

 Cristal violeta
 Lugol
 Alcohol-acetona
 safranina

 Tinción acido alcohol

resistente
 TINCIÓN DE GRAM
Bacterias Gram +
 Pared celular simple
 Capa peptidoglucano gruesa
 No capa externa de lipopolisacaridos
 Retienen la tinción azul
 La penicilina mata
Bacterias Gram -
 Pared celular compleja
 Capa peptidoglucano fino
 Capa externa lipopolisacaridos
 Quedan decoloradas
 La penicilina no mata
PROCEDIMIENTO
 Frotis y fijado de la muestra
 Cubrir las muestra con la solución de cristal
violeta durante 1 minuto
 Lavar ligeramente con agua de caño
 Cubrir la muestra con solución de lugol por 1
minuto
 Lavar con agua de caño
 Decolorar con alcohol –acetona hasta que el
alcohol –acetona no arrastre el color
 Lavar con agua de caño
 Colorear con safranina por 30 segundos
 Lavar ,sercar y observar
 CUANDO SE HACE UNA TINCIÓN GRAM

Neumonías: se puede recoger una muestra de esputo ,para identificar microorganismos responsables

Infección orinaría: cuando hay sospecha de infección,recoger la muestra con cuidado para no contaminar

Uretritis :suele producir secreción a través de la uretra

Exudado vaginal :aunque en la vagina hay multitud de bacterias, la tinción de Gram puede teñir todas
ellas y ver la proporción de Gram positivas y Gram negativas. Así se diagnostican las vaginosis, tan
frecuentes en las mujeres con menopausia
Meningitis: la tinción de Gram teñirá las bacterias que estén infectando el líquido cefalorraquídeo.

Abscesos: cuando se acumula pus en cualquier lugar se debe drenar y después planificar la antibioterapia si es
necesaria, y para ello es muy útil saber qué tipo de bacteria es la causante del cuadro

Sepsis: en este caso la muestra recogida es la sangre; un tubo pequeño de cada brazo
Ejemplos de bacterias Gram positivas
•Staphylococcus aureus. Responsable de abscesos, dermatitis,
infecciones localizadas y posibles gastroenteritis.
•Streptococcus pyrogenes. Causante de infecciones
supurativas en el trayecto respiratorio, así como de fiebre
reumática.
•Streptococcus aglactiae. Frecuente en casos de meningitis
neonatal, endometritis y neumonía.
•Streptococcus faecalis. Usual en infecciones en vías biliares y
urinarias, habita en el colon humano.
•Streptococcus pneumoniae. Responsable de neumonías e
infecciones en las vías respiratorias, así como otitis, meningitis y
peritonitis.
•Streptococcus sanguis. Causante de endocarditis, cuando
ingresa al torrente sanguíneo a través de lesiones en su hábitat,
la boca y la mucosa dental.
•Clostridium tetani. Bacterias responsables de los tétanos,
entran al cuerpo desde el suelo por traumatismos en las
extremidades.
•Bacillus antracis. Se trata de la conocida bacteria del ántrax,
tanto en su versión cutánea como en la pulmonar.
•Clostridium botullinum. Causante del botulismo clásico y el
infantil, habita en el suelo y en los alimentos mal conservados.
•Clostridium perfringes. Esta bacteria segrega toxinas que
destruyen la pared celular, y es responsable de las gangrenas
gaseosas, la enteritis necrosante y la endometritis.
Ejemplos de bacterias Gram negativas
•Neisseria meningitidis. Peligrosa bacteria causante de meningitis y meningocococemias,
coloniza las vías respiratorias humanas y asciende a las meninges por vía sanguínea.
•Neisseria gonorrhoeae. Conocidísima por ser la causante de la gonorrea, común
enfermedad de transmisión sexual.
•Escherichia coli. Habitante usual del colon humano, está involucrada en las llamadas
“diarreas del viajero”, así como en meningitis neonatal, sepsis e infecciones urinarias.
•Salmonella typhi. Bacteria responsable de la enfermedad conocida como fiebre tifoidea,
suele transmitirse por vía fecal-oral: contaminación de aguas, mala disposición de excretas o
higiene defectuosa.
•Salmonella enteritidis. Suele ocasionar enterocoitis y septicemia con abscesos si llega a
pasar del intestino a la sangre.
•Haemophilus influenzae. Bacilo usualmente aerobio, es responsable de numerosas
meningitis, otitis, sinusitis, bronconeumonías, celulitis y artritis séptica.
•Bordetella pertussis. Causante de la enfermedad conocida como Tos ferina, de alta
mortalidad infantil.
•Brucella abortus. Ocasiona la brucelosis, una enfermedad del ganado que se transmite al
hombre por contacto con los animales o por ingesta de lácteos sin pasteurizar.
•Francisella tularensis. Responsable de la llamada “fiebre del conejo” o tularemia, se
transmite al hombre mediante vectores (ácaros u otro tipo de exoparásitos) de los conejos,
ciervos y animales semejantes.
•Pasteurella multocida. Bacilo anaeróbico, transmitido por la mordedura de animales
domésticos infectados, tales como perros y gatos. Se disemina a través de la piel e infecta el
sistema respiratorio, causando también celulitis.
 ÁCIDO-ALCOHOL RESISTENTES O COLORACION ZIEHL-NEELSEN

Tinción acido resistente se llama así a la naturaleza acida del agente decolorante ,el cual es mas fuerte
Que la mezcla del alcohol –acetona usada en el Gram. Estos microorganismos resisten la decoloración
Debido a las sustancias lipídicas de su membrana .ejemplo el M.tuberculosis,M leprae.
MATERIAL
 Cultivo o esputo conteniendo m. tuberculosis
 Colorante de ziehl-Neelsen o fucsina fenicada
 Alcohol acido
 Azul de metileno de loeffler

Procedimiento
 Después de la fijación .cubrir la muestra con ziehl-Neelsen puro
Por 3 minutos y calentar por tres veces con un mechero del alcohol
Hasta La emisión de humo cada vez
 Decolorar con alcohol acido al tercio hasta que no arrastre color
 Lavar con agua y teñir con azul de metileno por 3 minutos
 Lavar con agua ,secar y observar
 Los bacilos aparecen de rojo en un fondo azul