5991-5422ES Agilent GC Theory Spanish

Fundamentos de la
cromatografía de
gases: teoría
CONSTRUYENDO
UNA CIENCIA MEJOR
ENTRE AGILENT Y USTED
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09 de mayo de 2018
© Agilent Technologies, Inc. 2016
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09 de mayo de 2018
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Índice
Introducción ¿Cómo se puede influir sobre
• Separación de compuestos la selectividad?
• ¿Qué sucede en el interior de la • Número de platos
columna? • Interrelación
Parámetros clave Ecuación de Van Deemter

• Tiempo de retención y anchura • Difusión turbulenta
de pico • Difusión axial
• Factor de retención • Resistencia a la transferencia de masa
• Selectividad o factor de separación • Más información sobre la ecuación
de Van Deemter
• Eficiencia
• Resolución Más información
• Página web de Agilent para
instituciones académicas
• Publicaciones

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Introducción
En la química analítica, los científicos utilizan la cromatografía de gases

(GC) para separar y analizar compuestos que pueden evaporar sin
descomponerse. A menudo, emplean la GC para analizar la pureza de una
determinada sustancia o para separar los componentes de una mezcla y
determinar la cantidad relativa presente de cada uno de ellos.
Los científicos usan la GC para realizar análisis cuantitativos y cualitativos
de analitos volátiles.
El instrumento utilizado, al que se denomina cromatógrafo de gases, utiliza
una fase móvil y una fase estacionaria. Es decir, un gas móvil transporta
la muestra a lo largo de un soporte estacionario (una pieza de vidrio o metal
a la que se conoce como columna) ubicado en el interior del instrumento.

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Introducción
Separación de compuestos
Tiempo (t)
Flujo de gas portador
Separación (tr2-tr1)
Anchura de pico (Wb1,2)
Los compuestos se separan debido a sus diferentes afinidades a la columna

durante la fase estacionaria. Los compuestos con menor afinidad eluirán
antes de la columna, mientras que aquellos que posean una mayor afinidad
eluirán más tarde.
Índice
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5
Introducción
¿Qué sucede en el interior de la columna?
En la cromatografía de gases se utiliza una
fase móvil gaseosa para transportar la
muestra a través de la columna, que puede
estar rellena o tener revestida la superficie
interior. En la mayoría de los casos, las
columnas GC tienen un diámetro interior
de menor tamaño y una longitud mayor
que las columnas HPLC. Columnas GC
Al calentar la columna GC, los compuestos

comienzan a separarse en función de su
punto de ebullición. Si se cambia la columna
por otra que contenga una fase estacionaria
polar, se modificará la capacidad de
separación. Los compuestos se separarán
de acuerdo con su punto de ebullición
Columnas HPLC
y su polaridad.
Índice
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6
Introducción
¿Qué sucede en el interior de la columna?
tr2-tr1 tr2-tr1
Separación de mayor calidad frente a Separación de menor calidad
Wb1 Wb2 Wb1 Wb2
Separación de mayor calidad frente a Separación de menor calidad

Índice
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Parámetros clave
Tiempo de retención y anchura de pico
h
tr2 tri Tiempo de retención

del compuesto "i"
tr1 W1/2 Anchura de pico a la
mitad de la altura
Wbi Anchura de pico en la
línea de base
W 1/2
W b1 W b2
t
El tiempo de retención de un compuesto no retenido (tM o t0) también

se conoce como tiempo muerto. Las moléculas del soluto no retenido avanzan
Índice por la columna a la misma velocidad que el gas portador.
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Parámetros clave
Factor de retención (k')
t t  t'R tr Tiempo de retención

k `  r M  
tM Tiempo de retención del pico no retenido
 tM  tM
El factor de retención (también conocido como coeficiente de reparto

o factor de capacidad) es la relación entre los tiempos que un soluto pasa
en las fases estacionaria y móvil. Se calcula dividiendo el tiempo de
retención entre el tiempo de un pico no retenido (tM). Para un compuesto
no retenido, tiene un valor nulo (k = 0).
Dado que todos los solutos pasan el mismo tiempo en la fase móvil,
el factor de retención es una medida de la capacidad de retención
de la fase estacionaria.
Parámetros que influyen sobre el factor de retención:
• Fase estacionaria
Índice
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Parámetros clave
Selectividad o factor de separación (α)
a Selectividad
k2
a k1 Factor de retención del primer pico
k1 k2 Factor de retención del segundo pico
La selectividad es una medida del tiempo o la distancia entre dos picos.

Si α = 1, ambos picos tendrán el mismo tiempo de retención y coeluirán.
La selectividad se define como la relación de los factores de capacidad.
Parámetros que influyen sobre el factor de retención:
• Fase estacionaria
• Fase móvil
• Temperatura
Índice
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Parámetros clave
Eficiencia o número de platos teóricos (N)
2 2
 tr   tr 
N  16    N  5,54   
 Wb   W1/ 2 
La eficiencia de la columna se utiliza para comparar el rendimiento de diferentes
columnas. Se expresa por medio del número de platos teóricos (N).
Las columnas con un número alto de platos son más eficientes. Una columna
con un valor N alto generará picos más estrechos para un determinado tiempo
de retención que una columna con un valor N más bajo.
Parámetros que influyen sobre la eficiencia de la columna:
• Longitud de la columna (a mayor longitud, mayor eficiencia).
• Tamaño de partícula (a menor tamaño de partícula, mayor eficiencia).
Índice
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Parámetros clave
Altura equivalente a un plato teórico (H)
L L Longitud de la columna (mm)

H
N N Número de platos teóricos
Otra medida de la eficiencia de la columna es la altura equivalente a un

plato teórico, que se representa como "H". Habitualmente, se expresa
en milímetros.
Cuanto menor sea cada plato teórico, más platos "contendrá" una
determinada longitud de columna. Esto se traduce en un mayor número
de platos por metro y una mayor eficiencia de la columna.
Índice
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Parámetros clave
Utilización de la eficiencia teórica (UTE)
 H real 
UTE %    100
 H teórica 
La eficiencia del revestimiento (CE%) es un término histórico que compara la eficiencia medida
de la columna (Hreal) con su eficiencia teórica máxima (Hteórica).
Tradicionalmente, el valor Hteórica se veía tan afectado por la heterogeneidad de la película de
fase estacionaria que las contribuciones externas a la columna al valor Hreal se podían ignorar
(como las anomalías de inyección o los retardos mecánicos o electrónicos).
Gracias a la mejora de la eficiencia del revestimiento, eso ya no es así. El valor Hreal
habitualmente se ve más afectado por las contribuciones externas a la columna que por
la propia columna. El término "utilización de la eficiencia teórica" (UTE) tiene todos esos
factores en cuenta.
Índice
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Parámetros clave
Resolución: separación en la línea de base
La resolución indica la capacidad de una Rs ≥ 1,5
h
columna para separar los picos de interés.
Sobre la resolución influyen la eficiencia (N),
la selectividad (a) y la retención (k). t r 2  t r1
• Debe tener como mínimo un valor igual
Rs 
a 1 para conseguir una separación medible
1 / 2  (Wb 2  Wb1 )
y una cuantificación suficiente.
• Se necesita un valor igual a 0,6 para que se
tri Tiempo de retención del
pueda distinguir un valle entre dos picos de la compuesto "i"
misma altura.
W bi Anchura de pico en la base
• Para los métodos más robustos normalmente del compuesto "i"
se requieren valores iguales o superiores a 1,7.
• Se considera que un valor igual a 1,6 se
corresponde con una separación en línea de
base y garantiza unos resultados cuantitativos
de precisión máxima.
t
Índice
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Parámetros clave
Resolución: ecuación fundamental
 a 1  k 
Rs  1 N   
4  a  1 k 
Eficiencia Selectividad Retención
La resolución se puede aumentar mejorando cualquiera de esos parámetros:

• La selectividad es el parámetro con mayor influencia sobre la resolución.
Con pequeñas variaciones de selectividad se pueden conseguir grandes
cambios en la resolución.
• La retención influye de manera significativa cuando el valor del parámetro k
es bajo.
• La eficiencia indica el poder de separación de la columna.
Índice
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Parámetros clave
Influencia de N, α y k sobre la resolución
La selectividad produce el mayor impacto sobre la resolución:
• Cambio de la fase estacionaria.
• Cambio de la fase móvil.
Es la forma más sencilla de aumentar
el número de platos.
En la figura se muestra la resolución en función de la selectividad,

la eficiencia de la columna y la retención.
Índice
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¿Cómo se puede influir sobre la separación?
¿Qué es un “plato” en cromatografía?
Lc 1 Lc
Rs ~ 1 N Rs ~ 1 ~
4 4 H 4 h d
p
LC Longitud de la columna
dp Tamaño de partícula
h Altura reducida de un plato teórico
Un plato teórico es la etapa hipotética en la cual dos fases de una

sustancia (fase líquida y fase vapor) se encuentran en equilibrio.
Índice
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Un número de platos (N) alto aporta las siguientes ventajas:

• picos agudos y estrechos
• mejora de la detección
• capacidad de picos que permite separar muestras complejas
No obstante, la resolución únicamente aumenta de forma proporcional
a la raíz cuadrada del número de platos.
• RS ~ N.
Asimismo, el aumento del número de platos viene limitado por las
condiciones experimentales.
• Por ejemplo, el tiempo de análisis y la presión.
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Interrelación: anchura de pico y altura reducida de un plato teórico
tr1  tr 2 Lc
Rs  Rs ~ 1
1 / 2  ( Wb 2  Wb1 ) 4 h d
p
h  f (w )
h  f ( w eddy  w ax  w C )
h: altura reducida de un plato teórico
Índice
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Ecuación de Van Deemter
La ecuación de Van Deemter expresa las variaciones por unidad de longitud

de una columna de separación en función de la fase móvil lineal, de forma
que tiene en cuenta las propiedades físicas, cinéticas y termodinámicas de
una separación (fuente: Wikipedia).
h = f ( wturb + wax + wC ) • difusión turbulenta

• coeficiente de difusión
h = A + B/u + C u • resistencia a la transferencia
de masa
Índice
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Difusión turbulenta
wturb ~ λ dp λ: calidad del relleno de la columna
Diferencias en las vías de difusión causadas por:
Trayectorias diferentes Relleno deficiente Distribución desigual de

de la columna tamaños de partícula
Índice
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Difusión axial o longitudinal
Aumento de la anchura de pico debido a la autodifusión del analito.
A flujos bajos, el analito permanece en la fase móvil durante un tiempo prolongado.

• Notable aumento de la anchura de pico.
• Mayor altura de plato teórico.
Flujo
Índice
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22
Resistencia a la transferencia de masa
wC ~ dp2
Diferentes trayectorias de difusión
Partícula porosa
Capa estacionaria de fase móvil
Índice
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h = A + B/u + C u
Altura reducida de un plato teórico (h)
Curva total (Van Deemter)
Resistencia a la transferencia
de masa
Difusión turbulenta
Difusión axial
Flujo
Índice
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Gas portador
La velocidad lineal (y la velocidad de
flujo) del gas portador dependen de la
N2
temperatura de la columna. Con una
presión constante en cabeza de
columna, la velocidad lineal disminuye
al aumentar la temperatura de la
Altura reducida de un plato teórico (h)
columna. La mejor forma de observar

el efecto de la velocidad lineal media
del gas portador (u) sobre la eficiencia
He es utilizando una curva de Van
Deemter.
H2
uopt:eficiencia máxima
uopt OPGV OPGV: velocidad práctica óptima del gas
u (cm / sec)
Consulte las notas para

Índice obtener más información

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25
Más información
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Manual técnico Fundamentals of Gas Chromatography G1176-90000
Vídeo Fundamentals of Gas Chromatography (14 min)
Guía Agilent J&W GC Column Selection Guide 5990-9867EN
CHROMacademy (acceso gratuito a los cursos online para estudiantes y personal
Sitio web
universitario)
Compendio de
A compilation of Application Notes (22 Mb) 5991-3592EN
aplicaciones
Índice
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26
GRACIAS
POR SU
ATENCIÓN
Número de publicación 5991-5422ES

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Abreviaturas
Abreviatura Definición Abreviatura Definición

α Selectividad t Tiempo
dp Tamaño de partícula tr Tiempo de retención
ΔΦ Rango del gradiente t0 o t M Tiempo muerto de la columna o tiempo
de retención
F Velocidad de flujo
tG Tiempo del gradiente
h Altura reducida de un plato teórico
(medida del poder de resolución de UTE% Utilización de la eficiencia teórica
una columna)
Vm Volumen de la columna
H Altura equivalente a un plato teórico w Anchura de pico
k Factor de retención, también W 1/2 Anchura de pico a la mitad de la altura
denominado factor de capacidad (k')
o coeficiente de reparto W bi Anchura de pico en la línea de base
L, Lc Longitud (longitud de la columna) wturb Difusión turbulenta
λ Calidad del relleno de la columna wax Difusión axial o longitudinal

N Eficiencia o número de platos de la wC Resistencia a la transferencia de masa
columna
wav Anchura media de los picos
R Resolución
Índice
09 de mayo de 2018
28

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Exclusivamente para fines educativos

Parámetros clave Ecuación de Van Deemter

Exclusivamente para fines educativos

En la química analítica, los científicos utilizan la cromatografía de gases

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Flujo de gas portador

Los compuestos se separan debido a sus diferentes afinidades a la columna

Al calentar la columna GC, los compuestos

Separación de mayor calidad frente a Separación de menor calidad

Wb1 Wb2 Wb1 Wb2

Separación de mayor calidad frente a Separación de menor calidad

tr2 tri Tiempo de retención

El tiempo de retención de un compuesto no retenido (tM o t0) también

t t  t'R tr Tiempo de retención

El factor de retención (también conocido como coeficiente de reparto

La selectividad es una medida del tiempo o la distancia entre dos picos.

L L Longitud de la columna (mm)

Otra medida de la eficiencia de la columna es la altura equivalente a un

Eficiencia Selectividad Retención

La resolución se puede aumentar mejorando cualquiera de esos parámetros:

En la figura se muestra la resolución en función de la selectividad,

Un plato teórico es la etapa hipotética en la cual dos fases de una

Un número de platos (N) alto aporta las siguientes ventajas:

h: altura reducida de un plato teórico

La ecuación de Van Deemter expresa las variaciones por unidad de longitud

h = f ( wturb + wax + wC ) • difusión turbulenta

wturb ~ λ dp λ: calidad del relleno de la columna

Diferencias en las vías de difusión causadas por:

Trayectorias diferentes Relleno deficiente Distribución desigual de

A flujos bajos, el analito permanece en la fase móvil durante un tiempo prolongado.

Curva total (Van Deemter)

columna. La mejor forma de observar

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Abreviatura Definición Abreviatura Definición

λ Calidad del relleno de la columna wax Difusión axial o longitudinal

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