Aula 5 Nanopartículas

SISTEMAS MODIFICADOS
APLICADOS A FORMULAÇÃO DE
MEDICAMENTOS
Professora Ma. Suzana Bender
NANOTRANSPORTADORES
As nanopartículas poliméricas:
São as nanocápsulas e nanoesferas
Sistemas coloidais compostos por polímeros naturais, sintéticos

ou semissintéticos preferência biodegradáveis
Estes sistemas poliméricos permitem a liberação controlada e

para sítios específicos(devido seu tamanho é capaz de penetrar
em pequenos capilares a alcançar as células).
NANOTRANSPORTADORES
Nanocápsulas:
Apresentam tamanhos entre os 100 e os 300 nm,

Os monômeros poliméricos encontram-se sob a forma de uma
membrana ou invólucro, que envolve um núcleo de matriz
líquida.
NANOTRANSPORTADORES
Nanosferas:
Apresentam uma matriz sólida;

Tamanho compreendido entre os 100 e 200 nm;
Resultante da agregação de monômeros poliméricos,onde o
fármaco se encontra dissolvido, aprisionado, ligado
quimicamente ou adsorvido aos seus constituintes.
NANOTRANSPORTADORES
Influenciam na biodisponibilidade:
•A composição polimérica (hidrofobicidade, carga superficial,

perfil de degradação),
• Características do princípio ativo encapsulado (massa molar,

carga, localização na nanosfera, absorção ou incorporação)
influenciam na biodisponibilidade.
NANOTRANSPORTADORES
Os polímeros biodegradáveis podem ser:
•naturais: albumina, celulose, alginatos, colágeno e quitosano;
• sintéticos: copolímeros do ácido metacrílico, ésteres acrílicos

ou metacrílicos.
•ácido polilático (PLA), a poli (ε-caprolactona)(PCL) e o

poli(metil-metacrilato) (PMMA), poli (ácido lático-co-glicólico),
NANOTRANSPORTADORES
A escolha do método de preparação de nanopartículas

poliméricas realiza-se com base em vários fatores:
• Tipo de sistema polimérico,

• Área de aplicação (biomédica, ambiental, etc.),
• Tamanho pretendido;
• Polímero;
• Solubilidade do fármaco a ser encapsulado.
NANOTRANSPORTADORES
Diferentes métodos permitem a modulação da estrutura, da sua

composição e das suas propriedades fisiológicas;
Estes métodos podem ser classificados em duas categorias

principais:
• polimerização de monômeros
• utilização de polímeros pré- formados.
NANOTRANSPORTADORES
Evaporação por solvente / Extração de solvente:
Consiste na preparação de uma emulsão do tipo O/A e origina

nanosferas.
Inicialmente, prepara-se uma fase orgânica, constituída por

um solvente orgânico apolar no qual é dissolvido o polímero e
incluído o princípio ativo por dissolução ou dispersão.
NANOTRANSPORTADORES
• Prepara-se também uma fase aquosa, que contém um

tensoativo do tipo O/A(acetato de polivinila (PVA)).
• Submete-se à emulsificação, por agitação de ambas as

fases, seguindo-se a exposição da emulsão recém-
preparada a uma fonte de energia elevada( por exemplo,
os ultrassons ou a homogeneização a alta pressão).
NANOTRANSPORTADORES
A agitação da emulsão é a etapa determinante para a

obtenção das nanosferas e deve ser realizada antes da
precipitação do polímero, de modo a serem obtidas
gotículas de fase interna de dimensões coloidais.
Por fim, promove-se a remoção do solvente orgânico,

ocorrendo a precipitação do polímero na fase externa
aquosa e consequente formação das nanosferas
MICROENCAPSULAÇÃO
A primeira etapa do processo consiste na obtenção da emulsão,

na qual uma das fases é constituída por uma solução de um
polímero de natureza hidrófobica num solvente adequado.
MICROENCAPSULAÇÃO
• Emulsões do tipo O/A e A/O/A- o polímero está dissolvido

num solvente orgânico apolar(cloreto de metileno ou
clorofórmio);
• Emulsões do tipo O/O, o solvente do polímero é orgânico

polar( acetonitrila ou acetona).
• O solvente é removido por evaporação.

MICROENCAPSULAÇÃO
• A substância a encapsular encontra-se dispersa ou

dissolvida, sendo posteriormente emulsionada na fase
externa que possui um agente tensoativo.
NANOPARTÍCULAS POLIMÉRICAS
Polimerização em emulsão
Biocompatíveis e biodegradáveis
Mais fácil preparo, escala industrial
•A preparação de nanosferas de PACA processa-se no seio de

emulsões do tipo O/A.
• A fase interna da emulsão é formada por gotículas de monômeros

insolúveis em água, que são emulsificadas numa solução aquosa
ácida (pH 1,0-3,5), contendo um tensoativo .
•Para acidificar a fase aquosa podem utilizar-se os ácidos cítrico,

fosfórico, sulfúrico, perclórico ou clorídrico.
- Etapas da polimerização em emulsão (adaptado de Bourgeat-Lami, 2002).
Uma vez emulsificada a fase interna na fase externa, as

gotículas monoméricas são estabilizadas pelas moléculas do
tensoativo, formando-se reservatórios.
Representação esquemática do mecanismo de

polimerização no meio de uma emulsão O/A.
1) Gotícula de monômeros estabilizada por
moléculas de agente tensoativo (diâmetro
cerca de 1 µm); 2) fase aquosa externa; 3)
micela de tensoativo; 4) micela de tensoativo
contendo monômeros; 5) molécula de
tensoativo; 6) crescimento da cadeia
polimérica na micela do tensoativo; 7)
nanopartículas poliméricas recém-formadas
Polimerização de monômeros:
•Utiliza-se como monômeros os cianoacrilatos de alquilo, que

formam polímeros denominados polialquilcianoacrilatos
(PACA).
• A reação ocorre em três fases: nucleação( ativação do

monômero e geração de carbono reativos),a fase de
propagação ou crescimento do polímero o término da reação.
• A nucleação pode ocorrer na presença de qualquer um dos

íons OH–, CH3O– ou CH3COO–, que desencadeia um
mecanismo denominado polimerização aniônica
• O princípio ativo nas nanosferas de PACA pode ser

adicionado à emulsão O/A:
• antes do início da reação de polimerização: incorporado nas
nanosferas(obtém-se uma capacidade de carregamento
elevada).
• após o início da reação de polimerização:fica adsorvido à sua
superfície(aumenta com o aumento do intervalo de tempo
decorrido entre o início da reação de polimerização e o
momento da adição do princípio ativo)
• o Ativo pode estar presente no meio reacional antes da adição

do monômero (preferencialmente no caso de substâncias
lipofílicas), ser introduzido após a iniciação do processo de
polimerização ou adicionado às partículas pré-formadas (para
moléculas hidrofílicas).
•No último caso, evita-se a interferência do componente ativo
no processo de polimerização e o fármaco se associa às
nanoesferas por um mecanismo de adsorção.
O tensoativo é responsável por evitar a coalescência das

gotículas da fase interna, uma vez que estabiliza a emulsão.
São utilizados tensoativos não iônicos:

poloxâmeros, polisorbatos, ou estabilizantes estereoquímicos,
como o dextrano.
As características fisico-químicas das nanosferas obtidas por

reações de polimerização de cianoacrilatos de alquilo são
afetadas por um conjunto de parâmetros tecnológicos:
• solubilidade do princípio ativo,
• volume e pH do meio de polimerização,
• a massa molar e concentração do monômero
• a natureza e concentração do agente tensoativo.
Proporção de fase e pH do meio de polimerização
O aumento da proporção de fase do meio de polimerização

origina nanosferas com capacidade de carga mais elevada:
• forma um maior número de núcleos de polimerização

• aumenta da eficiência de encapsulação.
Uma elevada concentração em íons hidroxilas aumenta a

velocidade de iniciação da reação.
Um valor de pH superior a 4, a velocidade da reação não é

controlada, originando polímeros mais amorfos e nanosferas de
maiores dimensões.
O abaixamento do pH do meio de polimerização origina
polímeros com massa molar menor, uma vez que, na presença
de íons H+ , a velocidade de termo da reação é elevada.
A duração da reação de polimerização é menor em meios de
pH baixo, formando-se apenas cadeias oligoméricas. Em meios
de pH mais elevado, a duração da reação de polimerização é
maior, resultando cadeias poliméricas maiores.
Massa molar e concentração do monômero
• Os monômeros de maior massa molar, estão associados a
uma eficiência de encapsulação maior;
• O aumento da concentração do monômero no meio de

polimerização aumenta a eficiência de encapsulação e a
capacidade de carga das nanosferas;
• Diminui o número de nanosferas formadas, já que conduz

ao aumento do seu tamanho
Natureza e concentração do tensoativo
• Os tensoativos aniônicos ionizam-se em meio aquoso,

cedendo os seus cátions.
• A polimerização das cadeias termina mais cedo, originando

polímeros com menor massa molar.
Os tensoativos não iônicos formam um número maior de

núcleos de polimerização, originando um aumento da eficiência
de encapsulação e da capacidade de carga das nanosferas.
Exemplo: A partir das reações de polimerização de

cianoacrilatos de alquilo, são obtidas nanosferas de dimensões
de cerca de 200 nm, embora possam ser reduzidas para 30
nm, através do aumento da concentração do tensoativo.
Nanocápsulas
Nanocápsulas
Com vista a aumentar a incorporação de princípios ativos

lipofílicos, as nanocápsulas de PACA foram prepararam no seio
de emulsões do tipo O/A.
Como a reação de polimerização dos monômeros cianoacrilato

de alquilo ocorre na interface O/A da emulsão, o mecanismo
denomina-se polimerização interfacial.
Nanocápsulas
• O método consiste na dissolução dos monômeros num
solvente orgânico polar – como, por exemplo, etanol, n-
butanol, isopropanol, acetonitrilo ou acetona –, juntamente
com o princípio ativo e um óleo – como o Miglyol® 812 ou
840.
• A solução límpida obtida é injetada lentamente, sob
agitação, numa fase aquosa que contém um tensoativo do
tipo O/A – como, por exemplo, o poloxâmero 188 ou o
polisorbato 80.
Nanocápsulas
• Em contato com a água, o óleo insolubiliza-se, formando

uma dispersão coloidal, e o solvente orgânico polar difunde-
se para a fase externa aquosa.
• Os monômeros orientam-se segundo a sua polaridade na
interface O/A, desencadeando-se a polimerização aniônica à
superfície das gotículas de óleo, o que conduz à formação da
parede das nanocápsulas.
Nanocápsulas
• Gasco et al., 1991 preparou, por polimerização interfacial em

emulsões e em microemulsões invertidas (A/O),
nanocápsulas com núcleo aquoso para incorporar princípios
ativos hidrofílicos.
Nanocápsulas
• Neste caso, a fase aquosa contendo o princípio ativo é

emulsificada num óleo que contém um tensoativo do tipo A/O
– como, por exemplo, um éster do sorbitano.
• Em seguida, é adicionada uma solução orgânica de

monômeros ao sistema recém-preparado
Nanocápsulas
• A vantagem das nanocápsulas de núcleo aquoso diz

respeito ao fato do princípio ativo não se encontrar apenas
adsorvido, mas sim incorporado, permitindo uma melhor
proteção após a administração in vivo.
Nanocápsulas
• Em qualquer um dos casos, o solvente orgânico é evaporado

a pressão reduzida e as nanocápsulas são separadas por
centrifugação ou por ultracentrifugação e lavadas com água
deionizada.
Nanocápsulas
• A preparação de nanocápsulas por polimerização interfacial

é particularmente adaptada para veiculação dos princípios
ativos lipossolúveis, ocorrendo no seio de emulsões do tipo
O/A.
Nanocápsulas
• A capacidade de carga e a eficiência de encapsulação das

nanocápsulas são maiores, quanto maior for a solubilidade
do príncipio ativo no óleo.
• No caso de princípios ativos hidrossolúveis, a eficiência de

encapsulação é menor, uma vez que estes sofrem difusão para
a fase externa aquosa.
pH do meio de polimerização
O diâmetro médio das nanocápsulas de PACA obtidas por

polimerização interfacial está compreendido entre 200 e 300
nm, dependendo das condições de preparação.
Este parâmetro é afetado de um modo significativo pelo pH do

meio de polimerização.
Para valores inferiores a 4, a dispersão obtida apresenta uma

distribuição mais heterogênea de tamanhos, pelo que a fase
aquosa deverá possuir, preferencialmente, um pH
compreendido entre 4 e 10.
O pH do meio influencia igualmente a velocidade da reação de

polimerização, que, por sua vez, determina a massa molar do
polímero formado.
Para baixos valores de pH, a velocidade da reação é elevada.

Neste caso, o contato entre as moléculas de monômero e de
iniciador da polimerização é instantâneo, formando-se vários
núcleos de polimerização e resultando muitas cadeias
poliméricas de baixa massa molar. Para valores de pH
elevados, a velocidade da reação é lenta, resultando cadeias
poliméricas de massa molar elevada.
Fase lipofílica e sua proporção
• A natureza da fase lipofílica afeta as dimensões das

nanocápsulas.
• Os óleos que apresentam alguma hidrofilia são dispersos
mais facilmente na fase externa aquosa do que os óleos
totalmente hidrofóbicos.
• As gotículas emulsificadas apresentam menores dimensões,
originando nanocápsulas também menores.
Fase lipofílica e sua proporção
No que se refere ao volume do óleo, o seu aumento conduz a

maior eficiência de encapsulação de substâncias lipossolúveis
e ao aumento do número de nanocápsulas formadas, não
tendo um efeito significativo nas suas dimensões.
Natureza do solvente orgânico
Para preparar nanocápsulas é conveniente recorrer a

solventes apróticos (acetona e acetonitrila) em vez de solventes
próticos (etanol, n-butanol e isopropanol), já que os primeiros
favorecem a ocorrência da polimerização interfacial, devido ao
fato da reação ter início na fase aquosa.
Natureza do solvente orgânico
Nesse caso, a formação de nanocápsulas resulta,

principalmente, da precipitação do polímero recém-formado na
interface em vez de ocorrer uma reação de polimerização
interfacial, característica dos cianoacrilatos de alquilo.
Adicionalmente, os solventes apróticos permitem obter

nanocápsulas com uma distribuição mais homogênea de
tamanhos.
Concentração do agente tensoativo
O aumento da concentração do agente tensoativo presente na

fase aquosa, conduz à redução das dimensões das
nanocápsulas obtidas, devido à redução do tamanho das
gotículas emulsificadas onde ocorre a polimerização interfacial.
Verifica-se também um aumento da eficiência de encapsulação
e da capacidade de carga, devido ao aumento do número de
gotículas emulsificadas.
Métodos usuais, empregados na preparação de nanopartículas poliméricas, baseados
na utilização de monômeros dispersos ou na precipitação de polímeros pré-formados.
Método de Nanoprecipitação ou deposição interfacial:
•Descrito inicialmente por Fessi e colaboradores em 1989;

•Permite obter a formação de nanoesferas ou de nanocápsulas
(neste último caso se for utilizado um pequeno volume de óleo
na fase orgânica).
Método de Nanoprecipitação ou deposição interfacial:

•Fase orgânica (fase solvente);
•Fase aquosa (fase não-solvente);
•Baseia-se na emulsificação espontânea da fase interna
(orgânica) contendo o polímero dissolvido, na fase externa
(aquosa).
A fase orgânica é composta por:

• Um solvente orgânico (etanol, acetona, hexano, cloreto de
metileno entre outros) que seja miscível em água e facilmente
removido por evaporação.
•Por um polímero (sintético ou natural),
•Tensoativo lipofilico,
• Substância ativa (fármaco)
• Óleo (no caso das nanocápsulas) miscível no solvente
orgânico
A fase aquosa por sua vez é constituída por:

•Um não-solvente, ou um conjunto de não-solventes do
polímero (geralmente água);
•Um tensoativo.
Este método envolve a precipitação do polímero pré-formado

dissolvido na fase orgânica e a difusão do solvente orgânico na
fase aquosa.
Preparo de nanoesferas:
Dissolução do polímero, do tensoativo e da substância ativa no

solvente orgânico, obtendo-se assim a fase orgânica (ausência
de óleo).
Nanocápsulas:
O uso de óleo neste método provoca a formação de

nanopartículas com núcleo diferenciado (óleo) revestido por
uma cápsula polimérica.
Esta fase é vertida lentamente na fase aquosa sob agitação,

provocando uma difusão rápida do solvente e levando à
formação instantânea de uma suspensão coloidal.
Durante a evaporação do solvente orgânico sob pressão

reduzida (Roto-evaporação), ocorre a formação da matriz
polimérica.
O tensoativo confere estabilidade ao sistema polímero-

tensoativo durante o processo de difusão do solvente orgânico
na água, provocando assim a agregação do polímero e
consequente formação de nanoesferas ou nanocápulas
Polímeros;
Os polímeros pré-formados biodegradáveis mais utilizados na
produção de nanopartículas são:
•o ácido poli-lático (PLA);
• o ácido poli-lático-co-glicólico (PLGA),
• poli (ε-caprolactona) (PCL)
Representação do método de nanoprecipitação. * O óleo é
usado apenas aquando da formação de nanocápsulas, na
formação de nanoesferas este componente está ausente
(Adaptado de Reis et al, 2006).
Representação esquemática do método de preparação de
Nanoesferas
NANOPARTÍCULAS LIPÍDICAS
O universo das nanopartículas lipídicas é abrangente
podendo incluir :
•Lipossomas,
•Micelas,
•Vetores lipídicos nanoestruturados (“nanostructured lipid
•Carriers”, NLC)
• nanopartículas lipídicas sólidas.
NANOPARTÍCULAS LIPÍDICAS SÓLIDAS
Nanopartículas Lipídicas Sólidas
• Surgiram em 1996;
• Compostas por lipídeos no estado sólido à temperatura
ambiente e à temperatura corporal;
• Estabilizadas por agente tensoativo.
Nanopartículas Lipídicas Sólidas: Lipídeos
Nanopartículas Lipídicas Sólidas:Tensoativos
Tensoativos:
Reduzem a tensão interfacial e evitam a deposição e

agregação das nanopartículas dispersas na fase aquosa.
Os agentes tensoativos mais vulgarmente aplicados são os
não-iônicos:
Polisorbatos (Tween® 20, 40, 60, 80),
Sorbitanos (Span®20, 40, 60, 80),
Ésteres de sorbitol (Mirj® 45, 52, 53, 59),
Álcoois (Tyloxapol),
Poloxâmeros (Pluronic ou Lutrol®F68, F127),
Ésteres (ésteres do ácido esteárico, palmítico, oleico e laúrico).
Vantagens
•Maior estabilidade
• Podem ser utilizados apenas substâncias que são
“Generally Recognized as Safe” (GRAS) pela FDA
• Fácil escalonamento da produção
• Liberação Sustentada do Ativo
• Atuam como oclusivos
Modelo de matriz homogênea:
Caracteriza-se por conter o fármaco molecularmente disperso

no núcleo lipídico.
É obtido recorrendo à técnica de Homogeneização de Alta

Pressão (HPH), tanto a quente como a frio.
O modelo de invólucro de fármaco:
Consiste numa partícula com uma parede externa de fármaco

que cobre um núcleo lipídico.
Obtido por HPH, mas apenas a quente.

O modelo de invólucro de fármaco:
Destinada à aplicação tópica:
Aumenta permeação cutânea e a biodisponibilidade do

fármaco através da liberação imediata do fármaco e
consequente efeito oclusivo resultante do núcleo lipídico.
O modelo de núcleo de fármaco:
Durante a produção o fármaco precipita, formando um núcleo

enriquecido com fármaco e um invólucro externo de lipídeo.
Forma-se por HPH a quente, e trata-se de um modelo útil

quando se pretende uma liberação controlada de fármaco
CARREADOR LIPÍDICO NANOESTRUTRADO
Carreador Lipídico Nanoestruturado (CLN)
• No início da última década surgiram os CLN, que

constituem a segunda geração de nanoparticulas lipídicas, e
têm como objetivo minimizar os potenciais problemas
associados às NLS.
CLN contêm uma porcentagem de lipídeo líquido, o que

origina defeitos na rede cristalina( maior capacidade carga).
Podem ser de três tipos:

• Modelo de cristal imperfeito;
• Modelo amorfo;
• Modelo do tipo múltiplo.
Modelo do Cristal imperfeito:
•Contêm inúmeras imperfeições na sua estrutura que

permitem a inclusão de uma elevada quantidade de fármaco.
Mistura de diferentes ácidos graxos(cadeias carbônicas com

diferentes tamanhos).
Modelo amorfo
Obtido a partir de uma mistura de lipídeos( sólidos e líquidos)

que têm a capacidade de não recristalizar depois da
homogeneização e resfriamento da nanoemulsão.
Minimiza a quantidade de fármaco expulso durante o

armazenamento.
Modelo do tipo múltiplo:
Caracteriza-se por ser uma emulsão de óleo em lipídeo sólido

em água (O/LS/A).
As nanoparticulas são concebidas pela técnica de HPH a

quente, onde se misturam os lipídeos sólidos com lipídeos
líquidos (óleos).
Modelo do tipo múltiplo:
A mistura é feita numa razão entre si que ultrapassa a

capacidade de solubilização das moléculas de lipídeo líquido
no lipídeo sólido, originando uma separação de fases e a
formação de “nanocompartimentos” de lipídeo líquido na
matriz lipídica sólida.
CLN imperfeito
Lipídio sólido
Lipídio amorfo Óleo nanocompartimentado
CLN Amorfo Múltiplo CLN

A maior parte dos fármacos lipofílicos tem maior solubilidade

em lipídeos líquidos, e por essa razão a capacidade de
encapsulação desse tipo de substâncias pode ser aumentada
através da utilização deste tipo de NLC.
Desenho esquemático dos sistemas nanoestruturados: (a) nanolipossoma;
(b) nanoemulsão; (c) nanopartícula lipídica sólida; (d) carreador lipídico
nanoestruturado; (e) nanocápsula e; (f) nanoesfera.
Modificado de Schaffazick et al., 2003; Wang et al., 2014 e Pohlmann et al.,
2015.
Os métodos mais descritos na literatura para obtenção de

NPS são aqueles que utilizam homogeneizadores de alta
pressão e aqueles que levam a obtenção dos sistemas
sólidos, a partir de microemulsões.
Técnica de homogeneização em alta pressão foi

desenvolvida por Muller e Luck em 1993 (Patente Européia
número 0605497) para a preparação de nanoemulsões para
nutrição parenteral em grande escala (Mehnert, Mader, 2001)
• Existem inúmeros equipamentos, de vários tamanhos,

preços e capacidades diferentes.
• Eles funcionam puxando o líquido em alta pressão (100-
2000 bar), por um pistão estreito (de escala nanométrica),
o qual é acelerado em uma pequena distância a uma alta
velocidade (acima de 1000 Km/h).
• Este fluido é submetido a um grande estresse, onde forças
de cavitação rompem as gotículas, gerando as
nanogotículas.
MÉTODOS DE PREPARO
 Microemulsão à quente
 Emulsificação e evaporação de solvente
 Difusão de solvente
 Homogeneização à alta pressão.
Wissing et al., Advanced Drug Delivery Reviews 56, 1257 (2004)

Lipídio fundido + Ativo
MICROEMULSÃO À QUENTE
(5-10 ºC acima da Tf)
H2O + Tensoativo
H 2O + (frio)
Tensoativo
(quente)
Agitação Agitação
as nanogotas lipídicas
sofrem cristalização
formando as NLS
H2O + Ativo MICROEMULSÃO À QUENTE
(quente)
Lipídio Fundido H2O + Tensoativo

(frio)
Agitação Agitação
EMULSIFICAÇÃO E EVAPORAÇÃO DO SOLVENTE
EMULSIFICAÇÃO E DIFUSÃO DO SOLVENTE
Como desvantagens este método inclui o uso de

solvente orgânico e a dificuldade de produzir as
A homogeneização a alta pressão a quente e a frio
A homogeneização a alta pressão a quente e a frio

Exemplos de fármacos veiculados em SLN e a sua propriedade terapêutica,
lipídeo usado, agente tensoativo e respectiva via de administração.
LIPOSSOMAS
Lipossomas:
Os lipossomas são estruturas esféricas compostas por uma ou

mais bicamadas fosfolipídicas em forma de vesículas que
rodeiam uma fase aquosa e apresentam um tamanho que
varia entre nanometros e micrometros de diâmetro.
LIPOSSOMAS
Lipossomas:
Os lipossomas são compostos por fosfolípidos (de origem

natural ou sintética) podendo conter esteróis (colesterol) e
antioxidantes.
LIPOSSOMAS
Lipossomas:
A formação destas vesículas ocorre espontaneamente quando

os fosfolípidos são colocados no meio aquoso, devido à
interação hidrofílica da cabeça polar do fosfolípido com a água
levando assim à formação de estruturas unilamelares e
multilamelares
(Gregoriadis, 1995; Vemuri et al., 1995; Sharma & Sharma,
1997; Edwards et al., 2006)
LIPOSSOMAS
Lipossomas:
Os fosfolípidos mais usados nas formulações de lipossomas
são:
• Fosfatidilcolina (PC),
• Fosfatidilserina,
• Fosfatidilglicerol
• Esfingomielina
(Vemuri et al., 1995; Sharma & Sharma, 1997; Batista et al.,

2007).
LIPOSSOMAS
Lipossomas:
Podem encapsular substâncias hidrofílicas como lipofílicas,

sendo que as hidrofílicas se encontram incorporadas no
compartimento aquoso e as lipofílicas ficam inseridas ou
adsorvidas na bicamada lipídica.
LIPOSSOMAS
LIPOSSOMAS
Fluidez da membrana
LIPOSSOMAS
Devido à semelhança entre a estrutura dos lipossomas

(bicamada lipídica) e a estrutura das membranas
celulares, estes conseguem interagir profundamente com
as células do organismo.
LIPOSSOMAS
As interações entre os lipossomas e as células do organismo
podem ser divididas em quatro tipos principais:
•Fusão de membranas (membrana do lipossoma com a
membrana da célula),
•Adsorção dos lipossomas à superfície das células;
• Intercâmbio entre a membrana do lipossoma e a membrana
da célula (troca molecular direta)
• Endocitose
(Vemuri et al., 1995; Torchilin, 2005)

Figura 7: Representação dos vários tipos de interações entre os lipossomas e
as células do organismo (Adaptado de Torchilin, 2005).
Modos de interação de
Lipossomas/Células
Adsorção Endocitose
Fusão Transferência de lipídeos

LIPOSSOMAS
•Apresentam baixa toxicidade,
• Elevada biocompatibilidade,
• São biodegradáveis,
• São não-imunogénicos,
• Protegem a substância ativa da diluição e degradação na
corrente sanguínea,
• Conseguem libertar a substância ativa em células ou mesmo
em compartimentos celulares individuais
(Aoki et al., 1997; Torchilin, 2005; Edwards et al., 2006).
LIPOSSOMAS
Os lipossomas podem ser considerados:
Vesículas Multilamelares (MLV – Multilamelar Vesicles):

Os lipossomas de preparação mais imediata são as
vesículas multilamelares (MLV), a partir destas, são obtidas
as demais espécies.
Geralmente os lipossomas MLV apresentam um tamanho

compreendido entre 500 a 5000 nm.
LIPOSSOMAS
Vesículas unilamelares grandes (LUV – Large Unilamelar

vesicles): formas lipossomais constituídas por apenas uma
bicamada fosfolipídica, mas com uma grande cavidade
aquosa. Diâmetro varia de 200 a 1000 nm.
LIPOSSOMAS
Vesículas unilamelares pequenas (SUV – Small
Unilamelar Vesicles): formas lipossomais constituídas por
apenas uma bicamada fosfolipídica e um pequeno
compartimento aquoso. Diâmetro varia de 20 a 50 nm
(Scarpa et al.,1998).
LIPOSSOMAS
LIPOSSOMAS
Classificados também quanto a sua carga:
• De acordo com a carga, lipossomas podem ser classificados

como catiônicos (carga positiva), aniônicos (carga negativa) e
neutros (sem carga).
• Lipossomas catiônicos são os mais frequentemente utilizados

na terapia gênica humana, pois o DNA possui uma carga
efetiva negativa.
LIPOSSOMAS
Classificados também:
• Lipossomas convencionais;
• Lipossomas de longa circulação;
• Lipossomas polimórficos;
– Lipossomas sensíveis ao Ph,
– Lipossomas termo-sensíveis,
– Lipossomas catiônicos.
• Lipossomas sítio-específicos;
– Imunolipossomas,
– Lipossomas como carreadores de proteínas e
peptídeos,
– Virossomas.
LIPOSSOMAS
LONGA CIRCULAÇÃO:
A camada hidrofílica superficial destes polímeros aumenta o

tempo de circulação dos lipossomas( fosfatidilinositol,os
polietilenoglicóis (PEG))
Impede o processo de reconhecimento molecular e a captura

pelas células do sistema fagocitário mononuclear,
principalmente as células de Kupffer no fígado.
LIPOSSOMAS
SÍTIO-ESPECÍFICO:
Estes utilizam ligantes acoplados em sua superfície, que

conferem seletividade para distribuir o fármaco encapsulado no
sítio de ação desejado.Ex: anticorpos, glicopeptídeos,
polissacarídeos,proteínas virais.
A superfície dos lipossomas pode ser modificada através da

escolha de lipídeos que permitam a conjugação de uma
variedade de elementos de reconhecimento.
LIPOSSOMAS
Imunolipossomas –Lipossomas contendo ligantes capazes de

aumentar o acúmulo de fármacos encapsulados nas células e
tecidos alvo. Imunoglobulinas (Ig) da classe (IgG) e seus
fragmentos são os ligantes mais empregados.
O carcinoma de células escamosas (SCC) é um tumor maligno de

origem epitelial no qual o receptor de fator de crescimento epidermal
(EGFR) está superexpresso e associado a malignização.
O cetuximabe é um anticorpo monoclonal, capaz de se ligar

seletivamente ao EGFR
LIPOSSOMAS
Lipossomas como carreadores de proteínas e peptídeos

Contêm na superfície compostos biologicamente ativos de
origem protéica ou peptídica, como enzimas, hormônios
peptídicos e citocinas.
Estes lipossomas vêm sendo utilizados no tratamento de

doenças hereditárias e do câncer.
LIPOSSOMAS
Virossomas –função de liberar o antígeno no órgão alvo.
Os virossomas contêm hemaglutinina na superfície, a qual

age como direcionador ligando-se a resíduos de ácido
sialíco na membrana das células do vírus.
LIPOSSOMAS
Virossomas –função de liberar o antígeno no órgão alvo.
Após endocitose dos virossomas o meio ácido dos

endossomas promove modificação conformacional na
hemaglutinina e em conseqüência os virossomas tornam-se
fusogênicos e fusionam com a membrana endocítica do
vírus.
Os virossomas são utilizados para potencializar o efeito de

vacinas encapsuladas com liberação específica do antígeno.
LIPOSSOMAS
Lipossomas polimórficos
São aqueles que se tornam reativos devido à mudança na

sua estrutura desencadeada por uma alteração de pH,
temperatura ou carga eletrostática.
LIPOSSOMAS
Lipossomas sensíveis ao pH –
Estes carreadores são preparados com ligantes sensíveis ao
pH como as fosfatidiletanolaminas insaturadas e
hemissuccinato de colesterila.
Esses lipossomas são utilizados para liberar o fármaco no

citoplasma ou no tecido intersticial de células tumorais, visto
que o pH desse meio é reduzido,comparado com o pH
fisiológico normal .
LIPOSSOMAS
• Lipossomas termossensíveis
São formados por mistura de lipídeos sintéticos:
dipalmitoil-fosfatidilcolina(DPPC)
diestearoilfosfatidilcolina(DSPC)
Fabricados com ligantes que possuem uma Tvítrea alguns

graus acima da temperatura fisiológica, temperatura essa
facilmente alcançada em local de hipertermia como o tecido
tumoral .
LIPOSSOMAS
•Lipossomas catiônicos –
Apresentam carga positiva na superfície.
Estes lipossomas têm sido utilizados para liberação de

ácidos nucléicos dentro das células .
LIPOSSOMAS
Obtenção dos lipossomas:

https://www.youtube.com/watch?v=vGz-qDE3Go4
1-Os componentes lipídicos são dissolvidos em um solvente

adequado(clorofórmio).
2- Após remoção do solvente, a baixa temperatura e pressão
reduzida, obtém-se um filme lipídico bem fino.
LIPOSSOMAS
Obtenção dos lipossomas:
3-O filme é hidratado(solução tampão glicina com água),

4- A hidratação ocorre em temperatura acima da temperatura
de transição de vítrea, de modo que ocorra a fusão do lipídio.
5-A solução é submetida a vários ciclos de
agitação/aquecimento, obtendo-se ao final dessa etapa uma
suspensão de MLV.
Representação esquemática da preparação de MLVs através do método
de hidratação do filme lipídico (Adaptado de Lasic, 1997)
LIPOSSOMAS
LIPOSSOMAS
Dispersões mecânicas:
A partir de MLV são obtidos outros tipos de lipossomas:

• SUV (Small Unilamelar Vesicle) é preparado através do
processo de sonificação,
• LUV(Large Unilamelar vesicles) através do processo
extrusão,usando homogeneizadores de alta pressão
Representação esquemática da preparação de
lipossomas através do método hidratação do filme
lipídico seguido de extrusão
LIPOSSOMAS
LIPOSSOMAS
LIPOSSOMAS
Lipídios solubilizados em solventes orgânicos miscíveis em

água (etanol, propilenoglicol) ou solventes orgânicos
imiscíveis em água (éter) podem ser injetados em uma fase
aquosa, seguida da remoção do solvente orgânico (e
possível reciclagem) por evaporação, cromatografia de
exclusão em gel, filtração ou diálise.
LIPOSSOMAS
POLIMEROSSOMOS VERSUS LIPOSSOMOS: A

EVOLUÇÃO DA “BALA MÁGICA”
Alexsandra Conceição Apolinário, Juliana de
Almeida Pachioni-Vasconcelos, Adalberto
Pessoa Jr. e Carlota de Oliveira Rangel-Yagui*
Departamento de Tecnologia Bioquímico-
Farmacêutica, Faculdade de Ciências
Farmacêuticas, Universidade de São Paulo, Av.
Prof. Lineu Prestes, 580 – Bloco 16, Cidade
Universitária, 05508-000 São Paulo – SP, Brasil
Recebido em 29/12/2016; aceito em
08/03/2017; publicado na web em 15/05/2017
MICELAS
As micelas são partículas coloidais esféricas de compostos
anfifílicos formadas espontaneamente em solução.
Os sistemas micelares contêm frações dos fármacos

covalentemente ligadas ou encapsuladas, cuja principal
vantagem é a preparação de medicamentos parenterais
contendo ativos de baixa hidrossolubilidade.
MICELAS
Existem diferentes tipos de sistemas micelares, entre eles, as
micelas propriamente ditas, as vesículas (lipoplexos) e os
complexos polieletrolíticos (poliplexos)
MICELAS
As micelas poliméricas propriamente ditas são partículas
coloidais esféricas com um núcleo hidrofóbico e o exterior
hidrofílico.
Podem ser caracterizadas como estruturas de copolímeros em

bloco montadas sobre um núcleo contendo o fármaco.
As micelas podem ter a superfície funcionalizada e

responderem a estímulos do ambiente.
MICELAS
Polímeros e copolímeros empregados na preparação de
micelas são obtidos a partir de PEG, PCL, PLA, poli(histidina),
poli(ácido aspártico), poli(isopropil acrilamida), poli(2-etil-2-
oxazolina), poli(metacrilato de 2-dimetilaminoetila), poli(etileno
imina), poli(metacrilato de dimetilamina) e PEOs.
MICELAS
Os núcleos polieletrolíticos ou complexos polieletrolítico pode
ser preparado pela deposição camada-a-camada de polímeros
sobre um suporte inerte passível de biodegradação.
A técnica é baseada na adsorção de espécies carregadas

sobre um substrato de carga oposta, alternando as camadas.
Carreadores poliméricos hidrofílicos ionizáveis capazes de

ligarem-se a biomoléculas de carga oposta são ditos poliplexos.
REFERÊNCIAS BIBLIOGRÁFICAS
•Nicolas, J. & Couvreur, P. - Rev. Nanomed. Nanobiotechnol., 1, p.111 (2009). PMid:20049783.
http://dx.doi.org/10.1002/wnan.15
Severino, P.; Santana, M.H.; Pinho, S.C. & Souto, E.B. - Polímeros, in press (2011).
• . Araújo, J.; Veja, V.; Lopes, C. M.; Egea, M. A.; García, M. L. & Souto, E. B. - Colloid Surf. B
Biointerfaces, 72, p.48 (2009).
• Schaffazick, S. R.; Stanisçuaski, S. G.; Freitas, L. L. & Pohlmann, A. R. – Quím. Nova, 26, p. 726 (2003).
http://dx.doi.org/10.1590/S0100- 40422003000500017
•. Liu, H. & Chen, J. - J. Pharm. Sci. Technol., 63, p. 207 (2009).
• Garg, N. K.; Mangal, S.; Khambete, H.; Sharma, P. K. & Tyagi, R. K. - Recent Pat. Drug Deliv. Formul., 4,
p.114 (2010).
•. Liu, D.; Wang, L.; Liu, Z.; Zhang, C. & Zhang, N. – J. Biomed. Nanotechnol., 6, p.675 (2010).
http://dx.doi.org/10.1166/jbn.2010.1160
• Chellampillai, B. & Pawar, A. P. - Eur. J. Drug Metab. Pharmacokinet., 35, p.123 (2011).
http://dx.doi.org/10.1007/s13318- 010-0016-7
•Zhang, W.; Gao, J.; Zhu, Q.; Zhang, M.; Ding, X.; Wang, X.; Hou, X.; Fan, W.; Ding, B.; Wu, X. & Gao, S. –
Int. J. Pharm., 402, p.205 (2010). http://dx.doi.org/10.1016/j.ijpharm.2010.09.037 10.
Anancharungsuk, W.; Polpanich, D.; Jangpatarapongsa, K. & Tangboriboonrat, P. - Colloids Surf. B
Biointerfaces, 78, p.328 (2010).
• Reis, C. P., Ribeiro A. J., Veiga F. e Neufeld, R. J. (2007). Nanoparticle delivery system for insulin. Design,
characterization and in vitro/in vivo bioactivity. European Journal of Pharmaceutical Sciences, 30, p. 392.
• Reverchon, E., Adami, R. e Caputo, G. (2008). Spherical microparticles production by supercritical antisolvent
precipitation: interpretation of results. The Journal of Supercritical Fluids, 47, pp. 70-84.
• Rieux, A., Fievez, V., Garinot, M., Schneider, Y. e Préat, V. (2006). Nanoparticles as potential oral delivery systems
of proteins and vaccines: A mechanistic approach. Journal of Controlled Release, 116, pp. 1-27.
• Shekhar, K., Madhu, M. N., Pradeep, B. e Banji, D. (2006). A review on microencapsulation. Nalgonda,
Pharmaceutics Department of Pharmacy Nalanda College, pp. 253-265.
• Shine, A. D. e Gelb, J. J. (1998). Microencapsulation process using supercritical fluids. US Patent WO1998015348.
• Silman, I. H. e Katchalski, E. (1966). Water-insoluble derivatives of enzymes, antigens, and antibodies. Annual
Review of Biochemistry, 35, pp. 873-908.
• Silva, C., Ribeiro, A., Ferreira, D. e Veiga, F. (2003). Administração oral de peptídeos e proteínas: II. Aplicação de
métodos de microencapsulação. Brazilian Journal of Pharmaceutical Sciences, 39(1), pp. 1-9.
• Sinha, V. R. e Trehan, A. (2003). Biodegradable microspheres for protein delivery. Journal of Controlled Release,
90, pp. 261-280.
• Smith, R. D. (1986). Supercritical fluid molecular spray film deposition and powder formation. US Patent
US4582731.
• Souto, E. B., Almeida, A. J. e Müller, R. H. (2007). Lipid Nanoparticles (SLN®, NLC®) for Cutaneous Drug Delivery:
Structure, Protection and Skin Effects. Journal of Biomedical Nanotechnology, 3, p. 3.
• Souto, E. B. e Lopes, C. M. (2011). Novas formas farmacêuticas para administração de fármacos. Porto, Edições
Universidade Fernando Pessoa, pp. 215-218.
• Steffansen, B., Nielsen, C. U., Brodin, B., Eriksson, A. H., Andersen, R. e Frokjaer, S. (2004). Intestinal solute carriers: an overview of trends and
strategies for improving oral drug absorption. European Journal of Pharmaceutical Sciences, 21, pp. 3-16.
• Suave, J., Dall’agnol, E. C., Pezzin, A. P. T., Silva, D. A. K., Meier, M. M. e Soldi, V. (2006). Microencapsulação: Inovação em diferentes áreas.
Health and Environment Journal, 7(2), pp. 12-20.
• Sulakvelidze, A., Zemphira, A. e Glenn-Morris Jr, J. (2001). Bacteriophage Therapy. Antimicrobial Agents and Chemotherapy, 45(3), pp. 649-659.
• Tabata, T. (2006). Drug delivery system: basic technology for biomedical research, medical treatment and health care. Biotechnology Journal, 6,
pp. 553-555.
•ALLAIS, C.; KELLER, G.; LESIEUR, P.; OLLIVON, M.; ARTZNER, F. X-Ray diffraction/calorimetry coupling A tool for
polymorphism control. Journal of Thermal Analysis Calorimetry. v. 74, n. 3, p. 723–728, 2003. ALMEIDA, A.J.;
SOUTO, E. Solid lipid nanoparticles as a drug delivery system for peptides and proteins. Advanced Drug
Delivery Reviews. v. 59, n. 6, p. 478-490, 2007. ATTAMA, A.A.; MÜLLER-GOYMANN, C.C. Effect of beeswax
modification on the lipid matrix and solid lipid nanoparticle crystallinity. Colloids and Surfaces A:
Physicochemical and Engineering Aspects. v. 315, n. 1-3, p. 189–195, 2008. ATTAMA, A.A.; SCHICKE, B.C.;
MÜLLER-GOYMANN, C.C. Further characterization of theobroma oil beeswax admixtures as lipid matrices for
improved drug delivery systems. European Journal of Pharmaceutical Biopharmaceutics. v. 64, n. 3, p. 294–
306, 2006. BORGIA, S.L.; REGEHLY, M.; SIVARAMAKRISHNAN, R.; MEHNERT, W.; KORTING, H.C.; DANKER, K.;
RÖDER, B.; KRAMER, K.D.; SCHÄFER-KORTING, M. Lipid nanoparticles for skin penetration enhancement
correlation to drug localization within the particle matrix as determined by fluorescence and parelectric
spectroscopy. Journal of Controlled
•CASTELLI, F.; PUGLIA, C.; SARPIETRO, M.G.; RIZZA, L.; BONINA, F. Characterization of
indomethacin-loaded lipid nanoparticles by differential scanning calorimetry.
International Journal of Pharmaceutics. v. 304, n. 1-2, p. 231–238, 2005. CAVALLI, R.;
CAPUTO, O.; CARLOTTI, M.E.; TROTTA, M.; SCARNECCHIA, C.; GASCO, M.R. Sterilization
and freeze-drying of drug-free and drug-loaded solid lipid nanoparticles. International
Journal of Pharmaceutics. 148, p. 47-54, 1997. CEVC, G. Lipid vesicles and other
colloids as drug carriers on the skin. Advanced Drug Delivery Reviews. v. 56, n. 5, p.
675– 711, 2004. CHATTOPADHYAY, N.; ZASTRE, J.; WONG, H-L.; WU, X.Y.; BENDAYAN,
R.Solid lipid nanoparticles enhance the delivery of the HIV protease inhibitor,
atazanavir, by a human brain endothelial cell line. Pharmaceutical Research. v. 25, n.
10, p. 2262-2271, 2008. CHEN, H.; CHANG, X.; DU, D.; LIU, W.; LIU, J.; WENG,T.; YANG,
Y.; XU, H.; YANG, X. Podophyllotoxin-loaded solid lipid nanoparticles for epidermal
targeting. Journal of Controlled Release. v. 110, n. 2, p. 296 – 306, 2006.
•ALLAIS, C.; KELLER, G.; LESIEUR, P.; OLLIVON, M.; ARTZNER, F. X-Ray diffraction/calorimetry coupling A
tool for CORTESI, R.; ESPOSITO, E.; LUCA, G.; NASTRUZZI, C. Production of lipospheres as carriers for
bioactive compounds. Biomaterials v. 23, n. 11, p. 2283–2294, 2002. DEMIREL, M.; YAZAN, Y.; MÜLLER,
R.H., KILIÇ, F.; BOZAN, B. Formulation and in vitroin vivo evaluation of piribedil solid lipid micro- and
nanoparticles. Journal of Microencapsulation, v. 18, n. 3, p. 359-371, 2001. ELDEM, T.; SPEISER, P.;
HINCAL, A. Optimization of spray-dried and congealed lipid micropellets and characterization of their
surface morphology by scanning electron microscopy. Phamaceutical Research. v. 8, n. 1, p. 47-54,
1991. FREITAS, C.; MULLER, R.H. Correlation between long-term stability of solid lipid nanoparticles
(SLNTM) and crystallinity of the lipid phase. European Journal of Pharmaceutical Biopharmaceutics. v.
47, n. 2, p. 125–132, 1999.

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SISTEMAS MODIFICADOS

Sistemas coloidais compostos por polímeros naturais, sintéticos

Estes sistemas poliméricos permitem a liberação controlada e

Apresentam tamanhos entre os 100 e os 300 nm,

Apresentam uma matriz sólida;

•A composição polimérica (hidrofobicidade, carga superficial,

• Características do princípio ativo encapsulado (massa molar,

Os polímeros biodegradáveis podem ser:

•naturais: albumina, celulose, alginatos, colágeno e quitosano;

• sintéticos: copolímeros do ácido metacrílico, ésteres acrílicos

•ácido polilático (PLA), a poli (ε-caprolactona)(PCL) e o

A escolha do método de preparação de nanopartículas

• Tipo de sistema polimérico,

Diferentes métodos permitem a modulação da estrutura, da sua

Estes métodos podem ser classificados em duas categorias

Evaporação por solvente / Extração de solvente:

Consiste na preparação de uma emulsão do tipo O/A e origina

Inicialmente, prepara-se uma fase orgânica, constituída por

• Prepara-se também uma fase aquosa, que contém um

• Submete-se à emulsificação, por agitação de ambas as

A agitação da emulsão é a etapa determinante para a

Por fim, promove-se a remoção do solvente orgânico,

Evaporação por solvente / Extração de solvente:

A primeira etapa do processo consiste na obtenção da emulsão,

• Emulsões do tipo O/A e A/O/A- o polímero está dissolvido

• Emulsões do tipo O/O, o solvente do polímero é orgânico

• O solvente é removido por evaporação.

Evaporação por solvente / Extração de solvente:

• A substância a encapsular encontra-se dispersa ou

•A preparação de nanosferas de PACA processa-se no seio de

• A fase interna da emulsão é formada por gotículas de monômeros

•Para acidificar a fase aquosa podem utilizar-se os ácidos cítrico,

Uma vez emulsificada a fase interna na fase externa, as

Representação esquemática do mecanismo de

•Utiliza-se como monômeros os cianoacrilatos de alquilo, que

• A reação ocorre em três fases: nucleação( ativação do

• A nucleação pode ocorrer na presença de qualquer um dos

• O princípio ativo nas nanosferas de PACA pode ser

• o Ativo pode estar presente no meio reacional antes da adição

O tensoativo é responsável por evitar a coalescência das

São utilizados tensoativos não iônicos:

As características fisico-químicas das nanosferas obtidas por

Proporção de fase e pH do meio de polimerização

O aumento da proporção de fase do meio de polimerização

• forma um maior número de núcleos de polimerização

Uma elevada concentração em íons hidroxilas aumenta a

Um valor de pH superior a 4, a velocidade da reação não é

• O aumento da concentração do monômero no meio de

• Diminui o número de nanosferas formadas, já que conduz

• Os tensoativos aniônicos ionizam-se em meio aquoso,

• A polimerização das cadeias termina mais cedo, originando

Os tensoativos não iônicos formam um número maior de

Exemplo: A partir das reações de polimerização de

Com vista a aumentar a incorporação de princípios ativos

Como a reação de polimerização dos monômeros cianoacrilato

• Em contato com a água, o óleo insolubiliza-se, formando

• Gasco et al., 1991 preparou, por polimerização interfacial em

• Neste caso, a fase aquosa contendo o princípio ativo é

• Em seguida, é adicionada uma solução orgânica de

• A vantagem das nanocápsulas de núcleo aquoso diz

• Em qualquer um dos casos, o solvente orgânico é evaporado

• A preparação de nanocápsulas por polimerização interfacial

• A capacidade de carga e a eficiência de encapsulação das

• No caso de princípios ativos hidrossolúveis, a eficiência de