DEL ADN A LA PROTEÍNA: CÓMO

LEEN LAS CÉLULAS EL GENOMA

Dra. Patricia Pastor Faúndez

 Los genes
“Secuencia de ADN que contiene la información requerida para fabricar una
molécula de ARN y, si esta corresponde a un RNA mensajero, a partir de él construir
una proteína”

Son las entidades

biológicas a través de
las cuales se
transmiten los
caracteres físicos de
padres a hijos

Un gen es un segmento de ADN que típicamente codifica para una proteína,

pero también hay genes que codifican para ARNs.
Los genes tienen regiones de ADN, normalmente río arriba de la región
codificante, que controla la expresión del gen. Se considera que estas
regiones forman parte del gen.
 Flujo de la información genética

El DNA se copia El RNA mensajero transporta información

complementariamente en una cadena codificada a los ribosomas (RNA ribosómico)
de RNA mensajero (mRNA): que la “leen” y se realiza la síntesis de
transcripción. proteínas traducción.
 Expresión de la información hereditaria: de ADN a proteínas

La expresión de los genes involucra dos procesos básicos:

1) Transcripción: Síntesis de ARN a partir de un gen.
2) Traducción: Síntesis de proteínas a partir de la información codificada en un ARNm.
Transcripción

• Requerimientos

 Molde ADN (gen)

 Unidades de
construcción
(ribonucleótidos
trifosfato A,U,C,G)
 Maquinaria
enzimática
(ARNpol)
 Energía
 Componentes estructurales del gen

• Promotor.
 Inicia transcripción
 Señala el nucleótido desde el que debe transcribirse el gen.
• Secuencia codificante.
 Contiene la información a expresarse.
• Secuencias reguladoras.
 Determinan cuando y cuantas veces se transcribe gen.
 Amplificadores (mayor número y más estudiados) e inhibidores.
• Secuencia de terminación.
 Cerca extremo 3` del segmento codificador.
 Proceso de Transcripción

Inicia transcripción
Señala al nucleótido Secuencia de
desde el que debe terminación
transcribirse el gen
(CAJA TATA ).
 Colinealidad

Existe una relación entre la ordenación lineal de los nucleótidos en los ácidos nucleicos
y la ordenación lineal de los aminoácidos en las proteínas.
INTRONES----EXONES
Las ARN polimerasas I, II y III llevan a
cabo la transcripción en eucariotas
Enzimas complejas, no requieren
primer (cebador), no funciona la
corrección de errores.
 Transcripción
La síntesis de moléculas de RNA ocurre a partir de un molde de
DNA (siempre hebra DNA en dirección 3`-5`)

-Enlace entre dos nucleótidos: enlace fosfodiester.

-Dirigidas y catalizadas por RNA polimerasas.
 Orientación dentro de la secuencia

Región promotora y reguladoras: Corriente o Río arriba

Región codificante y de término: Corriente o río abajo
 Transcripción

• Se copia sólo una hebra de DNA (en dirección 3`-5`)

• RNA se sintetiza a partir de su extremo 5`y progresa por
el 3`(SIEMPRE)
• Ribonucleótido se agregan de a uno a la vez
• RNA polimerasa une nucleótidos entre sí (enlace FD)
• Promotor del gen se une a ARN polimerasa e interactúa
en zona donde debe iniciarse la transcripción
• La transcripción concluye cuando RNA polimerasa alcanza
secuencia de terminación
• RNA = transcrito primario
 Pasos en transcripción
•Iniciación:
•Secuencias promotoras (se une la RNA polimerasa)
•Procariotas: Secuencias consenso Pribnow (-10 pb) y
región -35 pb
•Eucariotas: Caja TATA (-25 pb) y CAAT (-70 pb)

•Elongación:
•5’->3’
•Enrollamiento corriente arriba (5’) y desenrollamiento
corriente abajo (3’) del DNA (para transcribir)

•Terminación:
•Dependiente del factor Rho (procariotas)
•Independiente de Rho (eucariotas)
 Transcripción

Para comenzar la transcripción se requiere de la actividad DNA helicasa que

rompe los enlaces puentes hidrógeno del ADN con la finalidad de separar
las hebras de DNA para que ocurra la transcripción
Transcripción
 Factores de transcripción (FT) activan
secuencias reguladoras y promotoras.

ESPECIFICOS: Represores y Activadores (desencadenan o

frenan transcripción del ARNm). SE UNEN A LAS REGIONES
FT REGULADORAS

BASALES y COACTIVADORES = Se unen a la caja TATA

para comenzar síntesis de ARNm.
A ) Factores de transcripción específicos se unen al regulador del gen y los factores
de transcripción basales de unen al promotor del gen.
B ) ADN se dobla sobre si mismo para que regulador y promotor interactúen, lo que
estimula la transcripción del sector codificador del gen por la ARN pol II.
 Procesamiento del ARNm

• RNAs son procesados en el núcleo.

• Remoción de intrones.
• Agregado de cap (5`) y poli A (3`).
Necesario para que mRNA puedan salir del núcleo y
funcionar en el citoplasma
 Modificación 5’
Caperuza (capuchón) 5’
¿Cuáles son sus efectos?

-Evita la degradación del

extremo 5’ por acción de
nucleasas.

-Requerido durante la
remoción de intrones.

-Participa en la llegada al
citoplasma.

-Participa en unión al •Esta caperuza juega un papel importante en la

iniciación de la síntesis de proteínas.
ribosoma.
•Protege al transcrito RNA en crecimiento de la
degradación.
 Poliadenilación
Se agrega secuencia 250 Adeninas (cola poli A en el extremo 3`)

• Importancia de la adición del poli-A

• Colabora en la exportación de mRNA maduro desde el núcleo.
• Se cree influye en la estabilidad de algunos mRNA.
• Parece servir de señal de reconocimiento para el ribosoma que se
requiere para una traducción eficiente del mRNA.
• Junto con la caperuza de 5 permitirían a un ribosoma determinar si el RNA
está intacto, antes de empezar su traducción.
Adición de casquetes (caperuza) en 5’
y de la cola de poli(A) en 3’
 RNA splicing

•Tiene lugar en el núcleo, fuera del alcance de los

ribosomas (solo el ARN se exporta al citoplasma
cuando el procesamiento ha terminado).
•Consiste en retirar los intrones y ensamblar los
exones.
•El proceso es catalizado por Spliceosoma.
Los Spliceosomas eliminan los intrones
del pre-mARN
 procariotas

Transcritos en
procariotas
versus
eucariotas
eucariotas
En procariontes (bacterias) un RNA puede
codificar para más de un gen
 Diferencias eucariotas - procariotas
TRANSCRIPCION
Similitudes:
1. Síntesis enzimática
de ARN utilizando una
molécula de Adn
como molde.
2. La síntesis la realiza
la enzima ARN
polimerasa.

TRANSCRIPCION Diferencias:
(presencia/ausencia)
1. Exon-intron-exon
2. 5’ cap
3. 3’ poli AAAA, Splicing
4. Nucleo-citoplasma
5. 3 tipos de RNA polimerasa

En eucariontes, la vida media del mRNA es unas 10 veces mas larga que en procariotas
 Diferencias eucariotas - procariotas
Característica Procariota Eucariota

Promotor Cajas y zona operadora Solo cajas

Cistrón Policistrones Monocistrones

RNA polimerasa Una sola, con 5

3 RNA polimerasas
subunidades distintas

El ARN recién transcrito, Contiene, al comienzo de la cadena, 7-metil-

Estabilización no tiene guanosina o CAP, y al final de la cadena, una
secuencia poli A.
ARN pol, necesita la presencia de proteínas
Comienzo RNA pol, se autoacopla de iniciación, que se unan antes que ella al
al promotor ADN

Intrones No tiene Tiene y se eliminan mediante splicing

(corte y empalme)
Lugar de acción Inmediatamente, al ser En el citoplasma
formado
 Dogma de biología molecular
(1) Todas las células guardan su
información genética en el mismo código
lineal de ADN.

(2) Todas las células replican su (3) Todas las células (4) Todas las células
información genética a partir transcriben parte leen la información del
de un molde preexistente. de su ADN en ARN ARN y lo traducen a
proteína.
 Transcripción inversa o
retrotranscripción
• RNA puede funcionar como molde para la
síntesis de DNA.
Este proceso está catalizado por la enzima
transcriptasa reversa (o inversa)
• Fue descubierta en virus con genomas de ARN
por Howard Temin y David Baltimore, lo que
les valió el Premio Nobel de Medicina.
• Los virus que llevan a cabo la transcripción
inversa se denominan retrovirus.
 Transcripción reversa
La transcriptasa reversa es una de las cuatro enzimas contenidas en
el interior del VIH. La transcriptasa reversa es una enzima
característica, pero de los retrovirus.
 Retrovirus
• En la partícula viral hay dos copias del ARN
genómico, encapsuladas por la proteína de la
cápsida y rodeadas por una envoltura
membranosa. Cada copia de ARN tiene
asociada una molécula de la transcriptasa
reversa.
ETAPAS DE
LA
INFECCION
 Ciclo reproductivo de un
retrovirus
1.- El virus se une a la superficie de la célula
huésped , liberando su contenido en el
citoplasma.
2.- La transcriptasa reversa viral cataliza la
síntesis de una cadena de ADN.
3.- Se cataliza la formación de una segunda
cadena de ADN.
4.- Este ADN entra en el núcleo y se integra en
el ADN cromosómico
5.- El genoma viral integrado se con el ADN de
la célula huesped.
6.-El ADN proviral produce tránscritos de ARN.
7.- Sirven como moléculas de mARN que
dirigen la síntesis de proteínas virales
8.- Los nuevos virus «brotan» de la membrana
plasmática
Traducción del ARNm y
biosíntesis de proteínas
Traducción
 Traducción, fundamentos.
Paso del lenguaje de los nucleótidos al de proteínas.

Problema fundamental
de la traducción:

El número de
diferentes nucleótidos
y de aminoácidos
existentes.
Esto hace que la
traducción 1 a 1 no sea
posible.

Las “reglas” con que

un mRNA es traducido
a proteína se conocen
como el código
genético.
 SÍNTESIS DE PROTEÍNAS

La síntesis de proteínas o traducción tiene lugar en los ribosomas del

citoplasma.
Los aminoácidos son transportados por el RNA de transferencia, específico
para cada uno de ellos, y son llevados hasta el RNA mensajero.
Una vez finalizada la síntesis de una proteína, el RNA mensajero queda libre
y puede ser leído de nuevo.

Tres bases codón aminoácido

La información está codificada en tripletes

Estas reglas de correspondencia entre codones y aminoácidos constituyen el

código genético.
 CODIGO GENETICO
El código genético está compuesto por codones (codón= 3 bases nitrogenadas) que definen el proceso
de traducción

Código genético:
conjunto de reglas que
relacionan la secuencia de
nucleótidos, el
correspondiente codón de
mRNA y la secuencia de
aminoácidos obtenida.

43 = 64 codones

Existen 64
posibilidades de
combinaciones
El código es
Total 64 codones (4x4x4).
redundante
(degenerado) 3 de termino y 61 para codificar aminoácidos
Código genetico
 Traducción
Requerimientos

•Molde: RNA mensajero

•Materia prima: aminoácidos
•Energía: ATP
•Maquinaria: RNA transferencia y Ribosomas
 Los componentes de la traducción: el ribosoma
•Es el sitio donde se lleva a cabo la traducción.
•Permite que este proceso sea rápido y cuidadoso.
•Está formado por dos subunidades.
•Se compone de ARNr y proteínas.

Poseen 4 sitios de unión

para ARNm
Sitio A : sitio aminoacil
Sitio P : sitio peptidil
Sitio E : sitio de salida.
Sitio de unión para el
ARNm

Existen algunas diferencias entre los ribosomas de procariontes y eucariontes, pero son
similares en cuanto a estructura y función
Sitios Ribosómicos: A, P, E

48
Los ribosomas llevan a cabo la síntesis
de polipéptidos
Los componentes de la traducción: RNA de
transferencia (tRNA).
•Actúan como adaptadores.

•Son capaces de unir un aminoácido y

reconocer la secuencia del codón.

•Presentan una estructura en forma de

trébol. Están compuestos por unos 80
nucleótidos.

•Dos regiones que están desapareadas son

las responsables de su función: el
anticodón y el extremo 3’.

•Reconocimiento está dado por

apareamiento de bases.
Las moléculas de RNA de transferencia
llevan los aminoácidos al ribosoma
ARN transferencia

Unión CODON / ANTICODON

mRNA / tRNA
 Traducción

3 fases
•Iniciación
•Elongación
•Terminación

P A
La síntesis de proteínas
Codón: unidad de información del
mRNA.
El tRNA reconoce el codón por su
anticodón complementario y aporta
el aminoácido correspondiente
Los aminoácidos son enlazados a la
proteína hasta completar la
secuencia

• 1. El mRNA va al citoplasma donde

se enlaza a los ribosomas.

• 2. Los ribosomas se mueven a lo

largo del mRNA y van adosando los
aminoácido correspondientes a
cada codón.

• 3. Los aminoácidos se unen entre si

por enlaces péptidos.
 Definiciones

MUTACIÓN: Cambio en la
secuencia de ácidos
nucleicos de un organismo

MUTANTE: organismo que *Puede resultar hereditaria e

presenta una mutación implica una modificación de sus
características.

MUTÁGENO: Agentes que causa un aumento

en la tasa de mutaciones
Mutación
 Tipos de mutaciones:
MUTACIONES PUNTUALES
Tipos de mutaciones puntuales:

1. Sustituciones
Modificaciones o
cambios
 MUTACIONES PUNTUALES

Tipos de mutaciones puntuales:

2. Deleciones
(Pérdida o eliminación)
3. Inserciones
Efectos de mutaciones puntuales

4
 Regulación de la expresión génica
• Los genes que se mantienen siempre activos se
denominan genes constitutivos (ejemplo los
genes que codifican las enzimas de la glucolisis).
• Los genes que están altamente controlados de
forma que la cantidad final de producto del gen
está ajustada a las necesidades de la célula se
llaman genes regulados (codifican enzimas de
procesos metabólicos que, a diferencia de la
glucolisis, no se requieren constantemente).
 REGULACIÓN DE
EXPRESIÓN GÉNICA
EN PROCARIONTES
 Las rutas catabólicas y anabólicas están
reguladas por inducción y represión de genes
• Las enzimas que catalizan estas rutas suelen estar
reguladas coordinadamente; es decir, la síntesis de
todas las enzimas implicadas en una ruta concreta se
activan o desactivan al mismo tiempo.

• Por lo tanto veremos:

• Rutas catabólicas e inducción por sustrato. (pasos de
la ruta catabólica que degrada la lactosa en azúcares
sencillos)
• Rutas anabólicas y represión por producto final. (ruta
de síntesis del aminoácido triptófano)
 Operón.
• Conjunto de genes bajo
el control de un mismo
promotor.
• Los genes presentes en
un operón codifican para
enzimas involucradas en
una misma vía
metabólica.
• Dependiendo del tipo de operón la presencia o
ausencia del sustrato activa su expresión.
 •Promotor (P)

•Operador (O)

•*Gen regulador (i)

•Genes estructurales

Región
Región
Componentes del gen procariota (1)
•El promotor (P): se trata de un elemento de control que
es una región del DNA con una secuencia que es
reconocida por la RNA polimerasa para comenzar la
transcripción. Se encuentra inmediatamente antes de los
genes estructurales. Abreviadamente se le designa por la
letra P.

•El operador (O): se trata de otro elemento de control que

es una región del DNA con una secuencia que es
reconocida por la proteína reguladora. El operador se
sitúa entre la región promotora y los genes estructurales.
Abreviadamente se le designa por la letra O.
Componentes del gen procariota (2)

•El gen regulador (i): secuencia de DNA que codifica

para la proteína reguladora que reconoce la
secuencia de la región del operador. El gen regulador
está cerca de los genes estructurales del operón pero
no está inmediatamente al lado. Abreviadamente se
le denomina gen i.

•Genes estructurales: llevan información para

polipéptidos. Se trata de los genes cuya expresión
está regulada.
•Los operones bacterianos suelen contener varios
genes estructurales, son policistrónicos o poligénicos.
Hay algunos operones bacterianos que tienen un solo
gene estructural.

•Durante la transcripción los genes estructurales de

los operones se transcriben juntos en un mismo
mRNA, es decir el mRNA es policistrónico o
poligénico. En eucariontes los RNA mensajeros son
monocistrónicos.
 Los genes implicados en el
catabolismo de la lactosa
• (1) el gen lacZ, que codifica la β-galactosidasa
(la enzima que hidroliza la lactosa y otras β-
galactosidasas)
• (2) el gen lacY, que codifica la galactósido
permeasa (la proteína de membrana que
transporta la lactosa a la célula)
• (3) el gen lacA, que codifica una transacetilasa
(que añade un grupo acetilo a la lactosa
cuando es tomada por la célula)
• Estos tres genes pertenecen a una única
unidad reguladora, operón.
• El operón es un grupo de genes con funciones
relacionadas que están agrupados con
secuencias de ADN que permiten que estos
genes sean activados y desactivados
simultáneamente
Operón lactosa: mRNA multigénico o policistrónico

El operón lac es un
operón requerido
para el transporte y
metabolismo de la
lactosa en la bacteria
Escherichia coli y en
otras bacterias
entéricas. Presenta
tres genes
estructurales
adyacentes, un
promotor, un
terminador y un
operador.
Operón lac

mARN polisitrónico
Operón lac reprimido
Operón lac activo
 Regulación del operón Lac

1. El producto del gen regulador, el represor Lac, 2. Cuando el inductor, lactosa, está en alta
es constantemente expresado. El inductor concentración, se une al represor y lo inactiva.
(lactosa) está ausente o en muy baja El operón está activo.
concentración. El operón está apagado.
 EL OPERÓN TRIPTÓFANO
El operón triptófano (operón trp) es un sistema de
tipo represible, ya que el aminoácido triptófano
(Correpresor) impide la expresión de los genes
necesarios para su propia síntesis cuando hay
niveles elevados de triptófano.

Sin embargo, en ausencia de triptófano o a niveles

muy bajos se transcriben los genes del operón trp.

Consiste de 5 genes estructurales: trpE, trpD, trpC, trpB y trpA que

codifican para enzimas involucradas en la conversión del acido
corismico a triptófano
 Los genes implicados en la síntesis de
triptófano (trp) están organizados en
un operón reprimible
• los operones que regulan enzimas implicadas
en rutas anabólicas son operones reprimibles;
son inactivados normalmente por un efector,
que es el producto final de la ruta.
• El operón trp contiene los genes que
codifican las enzimas que catalizan las
reacciones implicadas en la biosíntesis de
triptófano y para regular la producción de
estas enzimas.
Operón trp reprimido
Operón trp activado
 REGULACIÓN DE
EXPRESIÓN GÉNICA
EN EUCARIONTES
 Regulación de la expresión génica
• Las células de un organismo eucariota NO son
todas iguales.

• Los distintos tipos celulares transcriben

diferentes conjuntos de genes, lo que le dan la
especificidad.

Esto genera la diferenciación celular

Niveles de regulación
Existen distintos niveles de
regulación de la exp. génica
 Niveles de regulación
Cromatina
 Niveles de regulación: DNA
Características asociadas con cromatina transcripcionalmente activa e inactiva.

Características Cromatina Cromatina transcripcionalmente

transcripcionalmente activa inactiva

Conformación de Conformación abierta y Conformación altamente

la cromatina extendida condensada, particularmente en
heterocromatina (facultativa y
constitutiva)

Metilación del Relativamente no metilada, Metilada, incluyendo

DNA especialmente en regiones regiones promotoras
promotoras
Metilación de Histonas no Histonas metiladas
histonas metiladas

Acetilación de Histonas Histonas

histonas acetiladas desacetiladas
 Niveles de regulación:
transcripción

Transcripción
 Para la transcripción de un gen
eucariota se requiere:
• Una secuencia regulatoria promotora o promotor:
secuencias de nucleótidos necesarias para la fijación de
la ARN polimerasa y factores de transcripción basales.

• Secuencias reguladoras: existen dos tipos

– Intensificadoras (del inglés, enhancers): secuencias que
estimulan la transcripción y cuya localización puede ser a
miles de nucleótidos de distancia "río arriba o abajo" del
promotor.
– Silenciadoras (del inglés silencers): secuencias que inhiben
la transcripción. También pueden hallarse muy distantes
del promotor.
 Para la transcripción de un gen
eucariota se requiere:
• Factores basales de transcripción: complejo
proteico que interacciona con el sitio promotor.
Son esenciales para la transcripción pero no
pueden aumentar o disminuir su ritmo.

• Factores específicos de la transcripción:

complejo de proteínas reguladoras que pueden
ser activadoras o represoras.
– Proteínas activadoras : interaccionan con las
secuencias intensificadoras del gen.
– Proteínas represoras: interactúan con las secuencias
silenciadoras del gen.
Factores basales de transcripción
Factores específicos de la transcripción
 Regulación de la expresión génica en eucariotas
Genes monocistrónicos

La iniciación de la transcripción en eucariotas requiere:

•Factores de transcripción BASALES que se unen al promotor

•Factores de transcripción ESPECÍFICOS activadores (mayoritariamente) o
represores, que se unen a secuencias reguladoras intensificadoras o silenciadoras
que pueden actuar a gran distancia y en cualquier orientación.
•Estas controlan la estructura de la cromatina y REGULAN la tasa
de transcripción.
Actuación conjunta de los elementos de control
del ADN y de los factores de transcripción
 Niveles de regulación en eucariotas

Modificaciones
Postranscripcionales
 CONTROL A NIVEL DEL
PROCESAMIENTO DEL ARNm
• El mecanismo por el cual puede obtenerse de
un mismo gen dos proteínas relacionadas se
denomina empalme alternativo. Este proceso
consiste en unir covalentemente diferentes
combinaciones de exones del pre-ARNm
obteniéndose dos ARNm maduros con distinta
información y por lo tanto dos productos
proteicos que difieren en uno o más tramos
de su secuencia aminoacídica
 Regulación post-transcripcional
Procesamiento (splicing) alternativo
 CONTROL A NIVEL DEL
PROCESAMIENTO DEL ARNm

Empalme alternativo
 Mecanismos de control a nivel de la
traducción
• Control de la estabilidad del ARNm. La integridad
de la cola poli A es determinante para la
supervivencia del mensaje. El acortamiento
gradual de la cadena de adeninas por acción de
nucleasas, reduce en algunos casos la vida media
del ARNm.
• Unión de micro ARN. Se asocian a la región
3’ UTR de los ARNm blanco. Un ARNm puede
estar regulado por diferentes miRNA.
• Unión de proteína represora al ARNm
 Ej. Tasa de traducción del ARNm que
codifica para la proteína ferritina
Cuando la concentración
intracelular de hierro es baja,
la proteína aconitasa se une a
una secuencia nucleotídica
específica en el ARNm,
llamada elemento de
respuesta al hierro
(ERH), provocando un
plegamiento del ARNm a
modo de bucle, que bloquea
la traducción.
 Mecanismos de control a nivel de la
traducción
Control de la estabilidad del ARNm.
La integridad de la cola poli A es
determinante para la supervivencia
del mensaje. El acortamiento
gradual de la cadena de adeninas
por acción de nucleasas, reduce en
algunos casos la vida media del
ARNm.

Unión de micro ARN. Se asocian a

la región 3’ UTR de los ARNm
blanco. Un ARNm puede estar
regulado por diferentes miRNA.
Mecanismos de control después de la
traducción
• Dos factores son determinantes de la vida media
de una proteína citosólica:
– Su correcto plegamiento
– Su secuencia aminoacídica de su extremo
aminoterminal.

• Respecto del extremo aminoterminal, existen

secuencias aminoacídicas estabilizadoras, que
asegurarían una vida media prolongada y otras
desestabilizadoras, las cuales favorecerían la
marcación de las proteínas en dicho extremo.
Regulación traduccional y post-traduccional

•Velocidad de síntesis de proteínas

EQUILIBRIO SEGÚN LAS NECESIDADES

•Velocidad de degradación de proteínas

•Modificaciones post-traduccionales

•Destino diferencial

ESTO DEPENDE DE LAS SEÑALES QUE RECIBA

LA CÉLULA…
 Niveles de regulación proteica
• Si una proteína adquiere un plegamiento
anómalo, o se ha desnaturalizado pasa a
un proceso de ubiquitinización. La
ubiquitinización consiste en la adición de varias
moléculas de ubiquitina.
• Las proteínas desnaturalizadas son conducidas
por chaperonas Éstas pueden recuperar el
plegamiento nativo de la proteína, en tanto se
unan a ella en una etapa previa o temprana de la
ubiquitinización
 Técnicas de
Biología molecular
 Técnicas de ADN recombinante
• Son herramientas de la biología molecular o
ingeniería genética.
• Se basa en la posibilidad de manipular los genes,
es decir:
A) tenerlos aislados
B) amplificarlos, en el sentido de tener muchas
copias de la misma secuencia
C) conocer la secuencia exacta
D) una vez aislado poderlo expresar fuera de su
localización natural
 Enzimas de restricción

• Familia de
enzimas aisladas
de bacterias, que
cortan las
moléculas de ADN
exógenos en
secuencias
específicas de
reconocimiento
Figure 8-31 Molecular Biology of the Cell (© Garland Science 2008)
 Genoteca o biblioteca genómica
• El genoma cortado en pedazos por enzimas de
restricción puede ser clonado (cada pedazo inserto
en un vector) para posteriormente estudiarlo.
 Plasmidios recombinantes

Figure 8-39 Molecular Biology of the Cell (© Garland Science 2008)

La reacción en cadena de la polimerasa
(PCR)
Amplificación mediante PCR
PCR: Reacción en cadena de la polimerasa
Amplificación mediante PCR
PCR: Reacción en cadena de la polimerasa
 Síntesis de cDNA

Figure 8-43 Molecular Biology of the Cell (© Garland Science 2008)

DEL ADN A LA PROTEÍNA: CÓMO
LEEN LAS CÉLULAS EL GENOMA