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Tecnología Enzimática

Elizabeth Torres Pérez


mayo, 2010
 Tipo hidrolasa.
 Producida en el intestino delgado y se
sintetiza durante la infancia de todos los
mamíferos.
 Se produce en el borde de cepillo de las
células que recubren las microvellosidades
intestinales.
 Su acción: hidroliza a
la lactosa
(disacárido), en sus
componentes, glucosa
y galactosa.
 Propiedades
funcionales muy
superiores a las de la
lactosa.
 Aumentar el poder
edulcorante del
producto hidrolizado
isomerizando la
glucosa obtenida en
fructosa, mediante
la glucosa
isomerasa.
 De este modo se
evita la adición de
azúcar durante la
producción.
 Intolerancia a la
lactosa.
 Malabosorción de
lactosa.
 Deficiencia primaria
de lactasa.
 Deficiencia
secundaria de
lactasa.
 Este azúcar tiene una solubilidad
relativamente baja (aproximadamente 180
g/L a 25ºC.)
 Es de difícil fermentación, lo que provoca
problemas de contaminación y limita las
posibilidades de revalorización directa.
 Su poder edulcorante es cinco veces menor,
aproximadamente, que el de la sacarosa.
 Conversión de suero de queso en un jarabe
dulce rico en proteínas que se pueden
utilizar en productos horneados y helados.
 La aplicación del enzima inmovilizada en la
producción de edulcorante por hidrólisis de
la lactosa en sueros.
 Como suplemente digestivo.
 Adaptada al frío, se puede utilizar para
hidrolizar la lactosa en productos lácteos
procesados en plantas refrigerados.
 Con la ayuda de bacterias, levaduras y
mohos.
 Saccharomyces lactis
 Kluyveromyces fragilis
 Aspergillus niger
 A. niger
 T. harzianum 1567 D2
 T. harzianum D3 1073
 T. harzianum D2 1620
 T. harzianum D1 1041
 T. viride 1897 A2
 T. viride ATCC 32098
 T. viride
 Penicillium sp.
 P. spinulosum
 Rhizopus sp.
 Fusarium culmorum
 F. accumulatum
 Lactosa 10.0
 Peptona 1.5
 Extracto de levadura 1.0
 KH2PO4 1.0
 (NH4)H2PO4 7.0
 MgSO47H2O 1.0
 CaCl2 0.3
Inóculo 1mL
Determinar Determinar
esporas/50mL
crecimiento. actividad
medio.

Estabilidad Estabilidad
temperatura pH
 Enzima + ONPG (substrato).
 1mL substrato + muestra  incubar 50°C, 5 min.
 Para reacción, 1mL carbonato de sodio.
 Abs 420nm UV-Vis.
 [ONPG] a partir de curva estándar.

 Actividad= cantidad de enzima que produce


1µmol de glucosa (ONPG) / minuto.
 Incubó la enzima en buffers.
 pH = 3 – 7.5
 1h, TA.

 Enzima a temp. 20 – 70°C


 1h

 Ensayo con condiciones estándar.


 Trichoderma spp. es una alternativa eficaz
para la producción de lactasa.

T. viride ATCC 32098


T. harzianum 1073 D3 T. viride 1897 A2
 La estabilidad de temperatura y pH de la
producción lactasa eran considerablemente
altos.
 Temperaturas entre 20 y 60 °C
 pH = 3.0-7.5

 Implicaque puede ser utilizada a escala


industrial para varios aplicaciones,
especialmente en la industria lechera.

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