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CEPARIO
Material de referencia
Requisitos:
Viabilidad: Células microbianas capaces de crecer.
Cultivos de referencia.
Pureza: Debe ser un cultivo puro.
Estabilidad: Estabilidad genética (Genotípica y fenotípicamente)
CEPARIO
Los CR son necesarios para la evaluación de la calidad de los medios de
cultivo y controles de calidad internos durante la ejecución de los ensayos.
Los controles de calidad a los reactivos son necesarios, así como realizar
pruebas confirmatorias.
SEGUNDA OPCIÓN
Proveedores comerciales certificados por ISO 9001 que comercializan repiques de
cepas de referencia adquiridas de una colección reconocida, generalmente tercer o
cuarto repique.
Se requiere para la compra, el certificado de orígen donde conste el número de
repique y el orígen.
RECONSTITUCIÓN DE CEPAS DE
REFERENCIA
Al llegar deben ser registradas, se almacenan de 0-5°C hasta su uso,
se reconstituyen y se siembran. Se realiza control de viabilidad y pureza y
se registra.
Registro de cepas de referencia:
• Identificación de la cepa.
• Género y especie del microorganismo.
• Tipo y N° de colección.
• N° de lote.
• Control de calidad con la cepa referenciada conforme (Sí/No)
• Fecha de caducidad de la cepa.
• Personal responsable.
CONTROL DE CALIDAD VIABILIDAD Y
PUREZA
A diferentes niveles del proceso con el fin de asegurar que las cepas conservan su
viabilidad y características bioquímicas.
La frecuencia será establecida por el laboratorio.
De no presentar las características solicitadas, se deben ejecutar las acciones
correctivas establecidas en el procedimiento.
REGISTRO DE CONTROL DE PUREZA Y
VIABILIDAD DE LAS CEPAS.
Fecha del control.
Identificación de la cepa. Género y especie del microorganismo. Tipo y N° de
colección.
Tipo de cepa (Cepa de referencia, reserva o trabajo).
Coloración de Gram.
Características de las colonias en medios selectivos.
Pruebas bioquímicas y serológicas.
CEPAS DE RESERVA
Son preparadas en el laboratorio y conservadas como fuente de preparación de
cultivos de trabajo.
Lugar destinado para el almacenamiento, señalado como cepas potencialmente
peligrosa y su manejo exclusivo por personal autorizado.
MÉTODOS PARA LA PRESERVACIÓN Y
MANTENIMIENTO DE CEPAS DE RESERVA
Obtenidas a partir de cepas de
referencia.
Liofilizadas
Agentes crioprotectores:
Leche descremada de calidad
microbiológica al 10 o 20% P/V.
Puede conservarse en refrigeración o a
temperatura ambiente por años.
Congelación a bajas temperaturas.
Agentes crioprotectores:
Leche descremada de calidad
microbiológica al 10 o 20% P/V.
Glicerol al 10%
Caldo BHI con glicerol 20%.
PROCESO DE CONGELACIÓN
Equipos e insumos: Congelador o cámara de Nitrógeno líquido.
°T de congelación: Deseanle a -70 ó -80°C, temperaturas más altas como -20°C no
es lo ideal.
Envases: Uso criovial o tubo estéril.
Productos: Se puede conservar en la temperatura de congelación por años.
Inconveniente: Problemas y pérdida de las cepas, la falta de suministro de energía,
falta de insumos o avería del equipo.