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Skoog D.A., Holler F.J. y Nieman T.A. (2001). Principios de análisis instrumental. MacGraw
Hill Interamericana de España, 1028 p.
Tipos de
Cromatografía
Absorción
Fase Inversa
Capa Fina
Intercambio Iónico
Filtración de gel
Afinidad
Cromatografía de Absorción
O
R
O H
H H H
H O
O
O O O
O Si Si
Si Si
Series Índice de
eulotrópicas polaridad, P’ Índice de polaridad
Hexano 0.001; 0.1 mezcla
Diclorometano 0.42 P´AB = x· P´A + x· P´B
Acetato de etilo 0.58; 4.4
2 propanol 0.82 k´2/ k´1 = 10(P2 - P1)/2
Ácido acético 1
Agua 10.2
↓ Polaridad ↑ Polaridad
C B A A B C
Tiempo Tiempo
C B A A B C
Tiempo Tiempo
• Concentraciones de
muestra:0.0001 al 0.1%.
• Detector UV. dM
Peso mayor
Separa las moléculas por
tamaño. Los solutos grandes
pasan mas rápido.
Peso menor
Volumen de retención es
función lineal del log. del PM
VR = a0 + a1•log(PM)
Cromatografía de Filtración en Gel
Aplicaciones
• Separación por tamaños
• Elución
• Transporte de una especie a través de una columna por la
adición continuada de nueva fase móvil.
• Fase móvil
• Liquido o gas que transporta los analitos a través de una
fase estacionaria sólida o liquida.
• Fase estacionaria
• Sólido o liquido inmovilizado sobre el cual se reparte la
especie de analito durante el paso de una fase móvil.
Nomenclatura
• Coeficiente de distribución
• K= [S]e/[S]m. [S] e concentración molar del soluto en la fase
estacionaria y [S] m es la concentración molar en la fase
móvil.
• Tiempo de retención
• Tiempo entre la inyección en una columna cromatográfica y
la llegada de un pico de analito al detector. Se identifica con
la nominación tR.
• Tiempo muerto
• Tiempo entre la inyección en una columna cromatográfica y
la llegada de un pico de un analito no retenido al detector. Se
identifica con la nominación tM.
Nomenclatura
• Factor de retención
• Termino empleado para describir la migración de una
especie a través de una columna cromatográfica. Su valor
numérico esta dado por k=(tR – tM)/tM. tM es el tiempo
muerto.
• Factor de selectividad
• α, proporciona una medida de que tan bien separa una
columna a dos analitos.
• Altura de plato
• Cantidad que describe la eficiencia de una columna
cromatográfica.
Nomenclatura
• Difusión longitudinal
• Migración de especies en una solución desde una región de
concentración alta hasta una mas diluida.
• Difusión en remolino
• Movimiento del soluto por varios caminos en la columna.
Esta dado por el diámetro de las partículas que componen
el relleno de la columna.
• Resolución de la columna
• Medida de la capacidad de una columna para separar dos
bandas de analito.
Nomenclatura
• Efluyente
• Fase móvil eluída.
• Eluyente
• Fase móvil que transporta solutos a través de una fase
estacionaria.
Absorción Adsorción
(Partición)
Cromatografía de
elución en
columna
•Velocidad media,
depende de la
fracción de tiempo
que el soluto reside
en la fase móvil.