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Citotecnología.

Agrupa a las tecnólogos médicos del área de anatomía
patológica y laboratorio clínico, que se dedican a la
lectura del la citología ginecológica y la no ginecológica,
con el fin de brindar tamizajes adecuados y óptimos
para contribuir a un diagnostico preciso.
Citotecnología.

 Citodiagnosis /Citodiagnóstico:también llamado examen
citológico o simplemente citología, es el diagnóstico
morfológico basado en los caracteres microscópicos de
células y componentes extracelulares, desprendidos de los
órganos espontáneamente u obtenidos por
procedimientos que, en general, son menos invasivos que
la biopsia.
 Citogenética: Estudio de la estructura y función de los
cromosomas celulares.
 Citología: Parte de la biología que estudia la célula.
 Citólogo/ga: Persona especializada en citología.
Tipos de estudios
citológicos:

 Citología vaginal: Citología de toma única del
fondo vaginal o de cérvix uterino.
 Citología triple toma (Wied): Cuando de forma
protocolizada se toman muestras de fondo vaginal,
cérvix uterino y de endocérvix.
 Citología endometrial: Cuando por métodos de
sondas o cánulas se realiza toma endouterina.
 Citología de secreción: Cuando se obtiene material
citológico por medio de la expresión de una glándula
o zona anatómica.

Tipos de estudios
citológicos:

 Citología de excreción. Cuando se realiza de
residuos metabólicos, como la orina.
 Citología por punción (PAAF). Cuando se obtiene
material citológico mediante punción con aguja de
una lesión habitualmente no accesible externamente.
 Impronta. Cuando se obtienen células por
aproximación de un tejido u órgano al portaobjetos.

CITOTECNÓLOGOS:
DEFINICIÓN Y
FUNCIONES

 Es un técnico especialista en el area de laboratorio
patológico que examina las células bajo el
microscopio para detectar anormalidades o pistas
que indican que una célula es maligna, premaligna o
enferma.
Funciones.

 Nº citología 60 en un lapso de 8 horas.
 Archivo
 Escribir informes
 Control de calidad
 Desarrollar la correlación de los casos para aumentar
la calidad del tamizaje
 Las funciones pueden cambiar dependiendo del tipo
de servicio ya sea publico o privado
Citotecnólogos en El
Salvador.

Se cuenta con un numero considerable de ellos/as. No
se realizar estudios de citología extra-vaginal. Ya que
esto es realizado por el patólogo.
No se cuenta con una asociación, que respalde el
proceso legal de los mismo.
Para el control de calidad siempre se necesita al
patólogo para sellar el tamizaje.
Trabajo del
Citotecnólogo/a

 Se realiza el Diagnostico precoz de cáncer, como una
herramienta fundamental para evitar el cáncer
servicio uterino.
 Diagnóstico de vaginitis con estudio de las células y
los gérmenes.
 Valoración hormonal, pero muy pocas veces se
realiza.
Datos del CA de cervico
uterino en E.S.

En el Lab 2009 240
Central del
MSPAS 2008 290

Ins del CA 2005 517


Res de
Tumores 2006 258
VIRUS DEL PAPILOMA
HUMANO.

 Familia Papillomaviridae.
 Compuestos de ADN, de 8000 pares de bases.

 Su estructura, es compartida por más de 100 tipos


secuenciados hasta la fecha

 Su actividad transformante se explica principalmente por


la actividad de sus oncoproteinas E6 y E7.
VIRUS DEL PAPILOMA
HUMANO.

 Virus sin envoltura
 Capside proteica
 Infecta sólo a células epiteliales.
 Son virus DNA compuestos por tres regiones.
 Región temprana E (Early), la cual codifica para las proteínas virales (E1, E2, E4, E5,
E6 y E7), necesarias para la replicación del DNA viral, la regulación de la trascripción
y la transformación e inmortalización celular.
 Región Tardía L (Late), que codifica para proteínas estructurales (L1 y L2).
 Region reguladora conocida como región larga de control LCR (Long Control
Región), que contiene la secuencia de DNA que permiten el control de la replicación
y de la expresión del genoma viral.
VIRUS DEL PAPILOMA
HUMANO.

VPH.

 Los virus tipos 1, 3 y 5 pueden causar las verrugas en
piernas y brazos

 Los tipos 6 y 11 pueden provocar lesiones verrugosas en


los genitales masculinos y femeninos.

 Los tipos 16, 18, 31, 33, 35, 45 y 58 pueden provocar


alteraciones celulares en la vagina y el cuello uterino;
displasias y representan casi el 95% de los casos de
canceres cervicouterinos en todo el mundo
VPH

Vacunas para contra el
VPH.

Vacunas Profilácticas:
Inducen la formación de Anticuerpos humorales que
Neutralizan al VPH.
Vacuna tetravalente recombinante contra los tipos 6,
11, 16 y 18.
 Ayudaría al sistema inmunológico a reconocer y
destruir el agente antes de que la infección quede
completamente establecida

Estudios citológicos en
El Salvador.

 Se realizan las citologías cervico-uterinas
convencionales.
 Se han hecho estudios desde el 2002 para ver la
sensibilidad y la especificidad con la inspección
visual de acido acético (IVAA).
 Actualización de coloración de PAP, propuesto por
el JICA, en el 2010.
 Se esta tratando de introducir la citología liquida a
nivel del MSPAS pero esta en proceso de prueba, el
alto costo de reactivos
Estudios citológicos en El
Salvador.

 No se realizan por parte de citotecnólogos/as,
lectura de citologías extra-vaginal.
 En el ultimo simposio de prevención del Cáncer
Cervico-Uterino se habla de tomar medidas para
mejores los tamizajes de la detección temprana del
cáncer en nuestro país.
Avances científicos en
E.S

 El método IVAA.
 Se puede realizar una inspeccion visual con Acido
acetico al 3% o 5%.
 No se necesita de material especializado.
 Personas con capacitacion tecnica pueden elaborarlo.
 Proporciona datos especificos en en un 65%
Avances científicos en
E.S

Avances científicos en
E.S.

 Se trata de introducir la citología liquida a nivel
publico por las siguientes razones:
 Logra conservar el 100% de la muestra.
 Se pueden montar varias laminas por paciente.
 No requiere equipo costoso para su procesamiento.
Avances científicos en
E.S.

 Limpia el 60% de la inflamación ,moco y sangre.
 Incrementa en un 64.73% los diagnósticos de lesiones
intraepiteliales de bajo y alto grado .
 Disminuye los diagnósticos inflamatorio en un 31.3%
 Incrementa los diagnósticos negativos para células
malignas en un 34.6%

Que rumbo tomar en los A.
C. en E.S

 Realizar investigación científica, con la ayuda de
países cooperantes.
 Tener centros de formación permanente en citología
cervico-vaginal.
 Capacitar al personal de salud para realizar
citologías extra-vaginal.
APLICACIÓN DE LA
INMUNOCITOQUIMICA
A LA CITOLOGÍA.

 Las indicaciones de realización de técnicas
inmunocitoquimicas a los estudios citológicos son las
mismas que las de las biopsias:
 - Apoyo al diagnóstico y tipificación de tumores
indiferenciados.
 - Localización del tumor primario en lesiones
metastásicas.
 - Diferenciar los adenocarcinomas de los mesoteliomas.
APLICACIÓN DE LA
INMUNOCITOQUIMICA

A LA CITOLOGÍA.
 A diferencia de las biopsias, no existe estandarización
metodológica en la realización de la técnicas
inmunocitoquimicas en los estudios citológicos, por lo
que se debe ser muy prudente en la interpretación de los
resultados y siempre en un contexto clínico y
morfológico.
APLICACIÓN DE LA
INMUNOCITOQUIMIC
A A LA CITOLOGÍA.

 Aunque la técnica se puede realizar sobre
extensiones directas procedentes de
citologías convencionales o de medio liquido,
ya sean fijadas o teñidas con Papanicolaou, se
obtienen mejores resultados con los bloques
celulares, ya que el procesamiento es similar
al de las biopsias, permiten aplicar varios
anticuerpos a las mismas células así como
utilizar controles.
APLICACIÓN DE LA
INMUNOCITOQUIMIC
A A LA CITOLOGÍA.

 Las técnicas inmunocitoquímicas se
pueden realizar sobre cualquier material
citológico (PAAF, derrames, cepillados,
orinas, etc ), aplicando los mismos
paneles de anticuerpos que en las
biopsias. En las citologias ginecológicas
con sospecha de lesiones de alto grado,
preferentemente las que utilizan medio
líquido, se puede utilizar P16 ,CINTEC
Plus y ProEx C.
APLICACIÓN DE LA
INMUNOCITOQUIMICA
A LA CITOLOGÍA.

 Identificación del virus del papiloma humano de alto
riesgo utilizando la prueba inmunohistoquímica
Viroactiv-HPV en pacientes con resultados
citológicos de células ASCUS en un laboratorio de
Patología Medellín-Colombia 2005-2006.
APLICACIÓN DE LA
INMUNOCITOQUIMIC
A A LA CITOLOGÍA.

 Se realizó un estudio descriptivo
trasversal de cohorte, se tomaron 45
mujeres, pertenecientes principalmente a
los estratos socioeconómicos 2 (24
pacientes) 53,33% y 3 (14 pacientes)
31,11% sexualmente activas con resultado
de ASCUS en la citología, que accedieron
a participar en el estudio y que
respondieron las preguntas del
formulario propuesto.
APLICACIÓN DE LA
INMUNOCITOQUIMIC
A A LA CITOLOGÍA.

De las 45 pacientes, un total de ocho (17,7%)
tuvieron alguna anormalidad en la colposcopia. De
estas ocho pacientes, tres (37,5%) no se habían
realizado una nueva citología de control y mantenían su
clasificación de ASCUS, mientras que cuatro (50%) tenían
una citología de control posterior a la colposcopia y
posterior al tratamiento normal. Una sola paciente (12,5%)
tenía en su citología un resultado igual al de la colposcopia.
APLICACIÓN DE LA
INMUNOCITOQUIMIC
A A LA CITOLOGÍA.

De estas 45 pacientes, solamente dos (4,4%)
resultaron positivas para VPH de alto riesgo
mediante la prueba Viroactiv HPV

APLICACIÓN DE LA
PATOLOGIA
MOLECULAR A LA
CITOLOGIA.

 Como sucede con la inmunocitoquímica
cualquier técnica de patología molecular se
puede aplicar al material citológico.
 CITOLOGIAS GINECOLOGICAS
La citología en medio líquido permite, tras
evidenciar morfológicamente la lesión, la
utilización de material para análisis ADN-VPH
Las técnicas más empleadas son:
- PCR
- Captura de Híbridos
- Hibridación in situ
PCR en citología.

ARTÍCULOS DE INVESTIGACIÓN

Estudio comparativo de detección del virus papiloma


humano (VPH) en muestras citológicas y biopsias de cuello
uterino
PCR en citología.

 Pacientes. Se incorporaron al estudio 44 pacientes del
Policlínico de Patología Cervical del Hospital
Hernán Henríquez Aravena de Temuco, entre junio
y agosto de 2002. Todas con antecedentes de lesiones
cervicales en citologías o biopsias previas.
 Muestras. A cada paciente se les tomo muestra:
obtenida mediante cepillado (CB).
PCR en citología.

 La muestra fue obtenida una vez realizado el PAP, se
colocó el cepillo en un tubo de 15 ml que contenía 3
ml de buffer TE pH 7.4 (10 mM Tris.Cl, 1 mM EDTA
pH 8). Este material fue procesado de inmediato o
mantenido a 4°C por un máximo de 24 h, hasta
realizar la extracción del ADN.
PCR en citología.

 Detección y tipificación de VPH por PCR. Se utilizó una PCR
de consenso en nido para los genes E6/ E7, usando para
la primera amplificación los iniciadores LCRs/E7as que
producen un segmento de 650 pares de bases (pb). Para la
segunda amplificación, que genera fragmentos entre 230-
270 pb, se usaron los iniciadores PU1M-PU2R, que
permitieron subtipificar los tipos virales en AR (HPV 16,
18, 31, 33, 35, 52) y PU2R-PU-31B en los de BR (HPV 6,
11).
PCR en citología.

 En cada PCR se incluyeron 2 controles positivos de VPH
de AR y BR (plásmidos VPH16 y VPH11), un control
blanco y un control negativo (ADN normal). Los
productos PCR se visualizaron mediante electroforesis en
geles de agarosa al 2% teñido con bromuro de etidio.
 Condiciones de las PCR en nido ("nested"). 30 ciclos (primera
amplificación) y 40 ciclos (segunda amplificación), con
temperaturas de hibridación de 40° a 55°C
PCR en citología.

 Detección VPH. PCR alto riesgo: 1-3. Muestras
citobrush. 4. Control BR (VPH 11). 5. Control AR
(VPH 16). 6. Blanco. PCR bajo riesgo: 1-3. Muestras
citobrush. 4. Control BR (VPH 11). 5. Control AR
(VPH 16). 6. Blanco.
APLICACIÓN DE LA
PATOLOGIA
MOLECULAR A LA

CITOLOGIA.
PCR
Cualquier técnica de PCR puede realizarse sobre material
citológico, ya sea fresco, fijado en alcohol o teñido con
Papanicolaou. El uso mas generalizado de esta técnica es en:
- PAAF de linfomas no Hodgkin
- PAAF de sarcomas
Material citológico de lesiones inflamatorias para detección
de agentes infecciosos y secuencias virales.
APLICACIÓN DE LA
PATOLOGIA
MOLECULAR A LA

CITOLOGIA.
CITOLOGIAS NO GINECOLOGICAS
La aplicación de técnicas moleculares a las
citologías no ginecológicas no es tan
generalizada como sucede con el material
de biopsias, sin embargo su uso es cada vez
mayor, fundamentalmente en el material de
PAAF
APLICACIÓN DE LA
PATOLOGIA
MOLECULAR A LA

CITOLOGIA.
FISH o hibridación fluorescente in situ.
Se aplica fundamentalmente en:
- PAAF de tumores pediatricos
- PAAF de sarcomas
- PAAF de linfomas no Hodgkin
- PAAF de carcinomas mamarios ( HER2
Neu )
- Citologias de orina en carcinomas
uroteliales ( UroVision FISH TesT )
PAAF de carcinomas pulmonares ( EGFR )

Bibliografia.

 http://www.medicasuis.org/anteriores/volumen20.2/doc3.pdf
 http://www.scielo.cl/scielo.php?script=sci_arttext&pid=S0034-98872005000600003
 Alonso de Ruiz P., Lazcano E., Hernández M.. "Cáncer Cervicouterino. Diagnóstico
Prevención y Control". Editorial medica, Panamaricana.
 Alonso Patricia, Lazcano Eduardo, Hernandez Mauricio. (2005). Cancer Cervicouterino
Diagnostico, Prevención y Control. Mexico: Editorial Medica Panamericana.
 Coll, C. (1992). Psicología y currículum. España: Editorial Paidós.
 Organización Panamericana de la Salud. (2002). Manual de Procedimientos del
Laboratorio de Citología. Washington, D. C.: Organización Mundial de la Salud.
 Solomon Diane, Nayar Ritu. (2005). El Sistema Bethesda para informar la citología
cervical. Buenos Aires, Argentina: Ediciones Journal Junín 873.
 Viguer Jose María, García Raimundo. (1995). Laboratorio y atlas de citología. Madrid,
España: McGRAW-HILL -INTERAMERICANA .

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