Medio utilizado para la diferenciacin de enterobacterias, en base a la

capacidad de usar citrato como nica fuente de carbono y energa.

MEDIO DE CITRATO DE SIMMONS INDICADOR DE PH AZUL DE BROMOTIMOL
Ingredientes
Acido pH :6 color amarillo
Sulfato de magnesio
0.2g Alcalino pH :7.6 color azul de Prusia oscuro
Fosfato monoamnico
1g Medio no inoculado pH :6.9 color verde
Fosfato dipotsico
1g
Citrato de sodio
2g
Cloruro de sodio
5g
Azul de bromotimol
0.08 g Caractersticas del medio: es verde
Agua desionizada
1000 mL
Agar
15 g
pH final: 6.9 0.2
 Sirve para determinar si un microorganismo puede crecer utilizando citrato
como nica fuente de carbono debido a la sntesis de la enzima citrato
permeasa la cual permite la introduccin del citrato al interior de la clula,
una vez dentro, el citrato es incorporado al ciclo de los cidos tricarboxilicos
o ciclo de Krebs. , con la consiguiente produccin de alcalinidad.

El metabolismo del citrato se realiza, en aquellas

bacterias poseedoras de citrato permeasa
 Oxalacetato +
Citrato Piruvato +2
acetato

Este ltimo, en presencia de un medio alcalino, da origen a cidos

orgnicos que, al ser utilizados como fuente de carbono, producen
carbonatos y bicarbonatos alcalinos. El medio entonces vira al azul y
esto es indicativo de la produccin de citrato permeasa.
-Positivo: crecimiento y color azul en el pico, alcalinidad.

-Negativo: el medio permanece de color verde debido a que no hay desarrollo

bacteriano y no hay cambio de color.
37C por 24 hrs
PRUEBA K. E. coli B. subtilis S. typhi S. S. aureus P. P.
pneumoniae flexneri aeruginosa vulgaris

CITRATO + - - + - - + +
 Limitaciones
-Si se usa un inculo denso para sembrar el medio de cultivo, puede variar el color
del pico del verde al amarillo-amarronado.
Esto no afecta el color verde del resto del medio de cultivo, pero puede afectar la
visualizacin azul de un resultado positivo.
-Inculos muy densos, pueden originar resultados falsos positivos.
-Cuando se siembra una serie de pruebas bioqumicas a partir del mismo cultivo,
se debe esterilizar la aguja de inoculacin antes de inocular la prueba del citrato o
sino inocularla primero. Cualquier arrastre de materia orgnica puede originar
resultados falsos positivos.