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BOVINOS Obed.
QU ES LA CRIOPRESERVACIN?
Es el proceso en el cual clulas, tejidos, rganos o individuos completos son congelados a
muy bajas temperaturas, generalmente entre -80C y -196C (el punto de ebullicin del
nitrgeno lquido) para disminuir las funciones vitales de una clula o un organismo y
poderlo mantener en condiciones de vida suspendida por mucho tiempo.
QU PASA A BAJAS TEMPERATURAS?
A esas temperaturas, cualquier actividad biolgica, incluidas las reacciones bioqumicas que
produciran la muerte de una clula, quedan efectivamente detenidas.
QU SE USA PARA LOGRARLO?
Cmara de congelacin:
Suero fetal
Buffer fosfato
PBSS
PUNTOS A TRATAR
Los embriones son cargados en pajuelas de 0.25 ml y colocados en el refrigerador
hasta el momento de realizar la trasferencia. Si bien el almacenaje de los embriones
se realiza en poco tiempo, un fenmeno comnmente observado es el colapso de los
blastocitos, el cual puede ser revertido luego de un breve periodo de tiempo.
Y tambin para conservar embriones hasta que las receptoras asincrnicas alcancen la
sincronizacin adecuada
Para evitar este fenmeno perjudicial para los embriones se induce a la formacin de hielo en el medio extracelular, a
esto se le denomina seeding, entre los -4C a -7C tocando el envase de los embriones con una pinza enfriada
previamente a -196C
La temperatura a la que se detiene la congelacin lenta y a la que los embriones son inmersos en el nitrgeno
liquido, cuando se le detiene en -30 o -40C es posible realizar la descongelacin de manera rpida,
sumergiendo los embriones en bao maria a 20-37C durante 20 o 30 segundos, si el enfriamiento lento se
extiende hasta -70C, la congelacin debe efectuarse lentamente.
El embrin es acondicionado en el
segmento medio de la pajuela, separados Para la descongelacin, las soluciones se
por burbujas de aire de los extremos que mesclan agitando la pajuela permitiendo
contienen sucrosa en concentracin isomolar que las soluciones se mexclen
con la del medio de congelacin
METODO DE ONE STEP
El mtodo de one step presenta una gran ventaja practica, dado de posibilita transferir embriones
congelados a campo de manera similar a lo que ocurre con la IA.
Por otro lado los porcentajes de prees tienen una gran variabilidad.
METODO DE TRANSFERENCIA DIRECTA
METODO DE TRANSFERENCIA DIRECTA
DOS VARIANTES
Soluciones altamente
concentradas de uno o
mas crioprotectores
permeables
CONGELACIN ULTRARRPIDA
CONCLUSIONES
La congelacin convencional resulta una tcnica para la criopreservacin de
embriones. Ha alcanzado gran aplicacin prctica, a partir del empleo del mtodo
de transferencia directa donde se utiliza etilenglicol como crioprotector.
La vitrificacin y la congelacin ultrarrpida de embriones aparecen como opciones
mas simples y econmicas que la congelacin convencional, no obstante para que
tenga aplicacin practica ser necesario superar los fenmenos de embriotoxicidad
que generalmente provocan.
En las distintas tcnicas de crioperservacin se observan diferencias de viabilidad
de acuerdo al estadio de los embriones y al mtodo utilizado, por lo tanto; resulta
de inters realizar estudios tendientes a encontrar las condiciones optimas para
cada situacin.
Teniendo en cuenta la evolucin de la biotecnologa de la reproduccin, en
investigaciones futuras deber presentarse especial atencin en resolver los
problemas que se presentan actualmente con la crioperservacin de embriones
producidos in vitro o sometidos a micromanipulacin.