Blgo.

Mario Alcarraz Curi

Laboratorio de
Bioprocesos Industriales
 DESARROLLO HISTORICO DE LAS
FERMENTACIONES INDUSTRIALES

Pasteur: siglo XIX

Participacin de levaduras
Enfermedades de la cerveza
Hansen: 1886
Cultivos puros (cerveza)
Produccin de vinagre, etanol,
lixiviacin microbiana, Postulados de
Koch, aplicacin de vacunas
DESARROLLO HISTORICO DE LAS
FERMENTACIONES INDUSTRIALES
1914
1914 Glicerol, acetona

1938 Penicilina, Estreptomicina

Avances recientes
Manipulacin gentica:
Mejoramiento del
germoplasma microbiano.
 SISTEMAS MICROBIANOS

La Biotecnologa
potencialmente usa
todas las formas de vida;
sin embargo, los
microorganismos
siempre han destacado
en el desarrollo de esta
disciplina
VENTAJAS RESPECTO A LOS OTROS :

1. Facilidad de cultivar en masa

2. Velocidad de crecimiento

3. Medios de cultivo barato

4. Diversidad de metabolitos

5. Posibilidad de manipulacin
 MICROORGANISMOS DE INTERES
INDUSTRIAL

1. Producir la sustancia de inters

2. Genticamente estable
3. Crecer en cultivo a gran escala
4. Produccin de esporas
5. Crecimiento y produccin en
tiempos breves
6. Crecimiento en medios baratos
 MICROORGANISMOS DE INTERES
INDUSTRIAL
7. No patgeno
8. Facilidad para retirar del
cultivo
9. Mayor tamao
10. Mantenimiento por
periodos prolongados
11. Susceptible de
manipulacin gentica
 BIODIVERSIDAD

ALIMENTOS Y BEBIDAS

1. Cerveza y vino S. cerevisiae

2. Quesos azules Penicillium roquefortii
3. Quesos Camembert Penicillium camembertii
4. Salsa de soja Arpergillus oryzae
5. Yogur y leches
fermentadas Lactobacillus y Streptococcus
6. Vinagre Acetobacter aceti
ADITIVOS ALIMENTARIOS
1. cido glutmico Corynebacterium glutamicum
2. Lisina y aminocidos Brevibacterium flavum
3. Ribonucletidos Corynebacterium glutamicum
4. Vitaminas Varias levaduras y bacterias

PROTEINAS UNICELULARES
1. A partir de alcanos Methylophilus methylotrophus
2. A partir de suero Kluyveromyces fragilis
3. A partir de polisacridos Fusarium graminearum
PRODUCTOS QUIMICOS INDUSTRIALES
1. Etanol Saccharomyces cerevisiae
Zymomonas mobilis
2. n-Butanol Clostridium sp
3. cido ctrico Aspergillus niger

4. cido lctico Lactobacillus sp

POLISACARIDOS
1. Xantanos Xanthomonas campestris
2. Dextrano Leuconostoc mesenteroides
3. Alginatos Azotobacter vinelandii
PRODUCTOS MEDICOS

1. ESTEROIDES
E. hidroxilados Mycobacteria y relacionadas
cortisona, hidrocortis. Rhizopus arrhizus

2. ANTIBIOTICOS
Hongos filamentosos
Actinomicetos
Bacterias no filamentosas

TOXINAS PARA INSECTOS

1. Contra larvas (Lepid.) Bacillus thuringiensis
2. Contra mosquitos B. thuringiensis var. israeli
ORIGEN DE LAS CEPAS INDUSTRIALES

1. Ambiente natural
2. Colecciones de cepas
industriales
3. Patentes (nuevos procesos
industriales)
4. Colecciones de plsmidos,
genes clonados y vectores
para sus uso en ingeniera
gentica
 AISLAMIENTO

1. Identificacin de mercado para

un producto
2. Bsqueda de un
microorganismo productor
adecuado
3. El producto debe mostrar
cualidades:

. Actividad
. Estabilidad
. Atoxicidad
 MANTENIMIENTO Y CONSERVACION DE
CULTIVOS MICROBIANOS

Cultivos aislados,
previo screening
primario (inters
industrial)
MANTENIMIENTO Y CONSERVACION DE
CULTIVOS MICROBIANOS

cultivos Stock:
1. Seleccin secundaria
2. Pruebas semi-industriales
3. Preparar inculos industriales
Ordinariamente sufren
degeneracin:
- Reduccin de rendimiento
(transferencias)
- Aparicin de mutantes.
 SUBSTRATOS PARA LA FERMENTACIN
INDUSTRIAL

Medio de cultivo

Material celular Produccin de metabolitos

Medios:
Laboratorios definidos
Fermentacin industrial Sustratos complejos
Sub productos,
por lo que:
1. ptimamente
equilibrado
- Para lograr mxima
produccin
- A veces suplementado
de elementos crticos

2. La composicin
constantemente
adaptada al proceso
- Lotes nuevos de
sustratos: evaluados
previamente
3. Fermentaciones de prueba, debe evaluar
- Rendimiento del producto
- Recuperacin del producto

4. Si existe represin
- Optimizacin de nutrientes
- Manejo adecuado
- Cepas mutantes desrreguladas
UN BUEN SUSTRATO

1. Bajo costo
2. Rendimiento del producto
3. Disponibilidad (transporte)
4. Recuperacin:
- impurezas
. dificultan
. incrementan costos.
 PRODUCTOS
INDUSTRIALES
1. CELULAS

BIOMASA

Bacterias Levaduras
Protenas Protenas
Industria
Alimentacin
2. SUSTANCIAS SINTETIZADAS

Enzimas Amilasas
Antibiticos Estreptomicina
Combustibles Etanol, Metano
Solventes Butanol
cidos Orgnicos cido actico
Aminocido Glutamato
Vitaminas Vitamina B12
Otras
3. BIOCONVERSION

Esteroides
Antibiticos
Pesticidas
Otros
 SINTESIS DEL PRODUCTO

Productos metablicos

1. METABOLITOS PRIMARIOS

Formacin en la fase primaria

de Crecimiento
En paralelo con el crecimiento
 Metabolitos Secundarios

Metabolitos
Primarios
 CONCENTRACIN
DE CELULAS,
ALCOHOL Y
AZUCAR

METABOLITO
PRIMARIO
T I E M P O
2. METABOLITOS
SECUNDARIOS

Formacin en la fase
estacionaria

Posiblemente los ms
comunes e importantes
METABOLITO
SECUNDARIO

CONCENTRACION
DE CELULAS,
AZUCAR Y
ANTIBIOTICOS

METABOLITO
SECUNDARIO

TIEMPO
 TROFOFASE E IDIOFASE

1. TROFOFASE
Fase de crecimiento

La produccin de
metabolitos depende:
- Condiciones apropiadas
para el crecimiento
- Alteracin adecuada
de las condiciones
- Momento oportuno
2. IDIOFASE

Fase de Produccin de
metabolitos a partir de:
- Productos intermedios
acumulados:

- En el medio
- En las clulas
- Algunos requieren inductores especficos:

- Alcaloide Ergolina (Claviceps purpure)

requiere L-Triptfano en la fase
exponencial. No es precursor, es inductor del
sistema enzimtico

- Algunos generan sus propios inductores,

induccin natural
FERMENTADOR

A entrada de aire
B salida de aire
C agitador de la columna
E Paletas agitadoras
F Agente antiespumante
G salida del gas
K regulador de la temperatura
X recolector del desecho

X
 METODOS DE FERMENTACION

1. DISCONTINUA (BATCH)
- Condicin fisiolgica del inculo
- Concentracin del inculo
- Caractersticas del nuevo medio
- Velocidad independiente de la
Concentracin del sustrato
-Medios complejos: 2 fases log
-Diauxia, induccin de enzimas:
2do Sustrato
 METODOS DE FERMENTACION

2. ALIMENTADA (FED BATCH)

. Los sustratos se aaden escalonadamente

. Razn: represin catablica
. La concentracin se mide indirectamente
. Parmetros correlacionados con el sustrato
 METODOS DE FERMENTACION

3. CONTINUA
. Control del crecimiento

- Concentracin del sustrato

- Sustrato limitante: C, N,
sales, O2, etc.
- Control de la turbidez
 METODOS DE FERMENTACION

BATCH CONTINUO FEED- BATCH

 RECUPERACION DE PRODUCTOS

Productos celulares
Productos intracelulares
Productos extracelulares
Considerar:
- Actividad biolgica
- Caractersticas
fisicoqumicas del producto
- Costos operativos
- otros
LABORATORIO DE
BIOPROCESOS INDUSTRIALES