Princpios da Gentica Microbiana

Definio

Gentica (do grego genno; fazer nascer);

a cincia da hereditariedade e da variabilidade dos organismos;
 Material gentico cromossomo nico
circular consistindo de uma nica molcula
circular de DNA sem protenas associadas.
Cromossomo circular
procarionte
 Bacteria
Ribossomo
procarionte
70 S (Svedberg)
Ribossomos so
compostos por
duas subunidades
associadas com 50 S
uma protena de
um tipo de RNA
(RNA ribossmico); 30 S
Sntese de
protenas
Em Archaea tanto histonas
quanto DNA girase
 Ncleo Eucariontes
O Ncleo atua na reproduo celular. Tambm portador das
caractersticas hereditrias e coordena as atividades celulares.
 Eucariotos: superenovelamento estabilizado pelas
histonas
Ribossomos Ribossomo eucarionte

eucariontes
80S
Partculas ricas
em rRNA
(ribossmicos) +
protenas; 60S

Tem a funo de
sntese protica
40S
 Conceitos bsicos
Nucleotdeos

- Genoma: toda a informao

gentica contida em uma clula; A=T
- Cromossomos: so estruturas CG
(partes) do genoma que
transportam fisicamente a
informao gentica;
- Genes: so segmentos de DNA
que codificam produtos finais;
- Gentipo: composio gentica,
a informao que codifica todas
as caractersticas do organismo;
- Fentipo: propriedades
expressas de um organismo,
manifestao do gentipo;
Estrutura do DNA
 Procariotos: duplicao do material gentico

Os microrganismos apresentam
elevadas velocidades metablicas.

Em algumas horas vrias geraes

podem surgir

Ex: E. coli: 3 geraes em 1 hora.

clones
 Replicao do DNA em Procariotos

Nogueira & Silva Filho, 2010

Esquema de duplicao (replicao) do DNA
Eucariontes: replicao do material gentico

Os cromossomos existem em diferentes

estados durante a vida celular;
DNA: deve replicar e expressar (funcionar)
independente do DNA-me;
Replicao do DNA em Eucariotos
 Transcrio, Traduo e Sntese de Protenas

Transcrio (DNA RNA)

Uma fita do DNA serve de molde (sense strand);

Tem Uracil (U) no lugar de Timina (T);
RNA fita simples;
Trs tipos de RNA com diferentes funes:
mRNA (RNA mensageiro): especifica a sequncia de
aminocidos (aa);
tRNA (RNA de transferncia): usa a informao contida no
mRNA e traduz essa informao em uma sequncia de aa;
rRNA (RNA ribossmico): forma os ribossomos responsveis
pela traduo do RNA em protenas;
 Transcrio do DNA

Pelczar et al., 2009

RNA E SNTESE PROTICA
(Transcrio)

U C
UUU (Phe/F) Fenilalanina
UUC (Phe/F) Fenilalanina
U UUA (Leu/L) Leucina
UUG (Leu/L) Leucina
CUU (Leu/L) Leucina
CUC (Leu/L) Leucina
C CUA (Leu/L) Leucina
CUG (Leu/L) Leucina
1a
base AUU (Ile/I) Isoleucina
AUC (Ile/I) Isoleucina
A AUA (Ile/I) Isoleucina
AUG (Met/M) Metionina, Start
GUU (Val/V) Valina
GUC (Val/V) Valina
G GUA (Val/V) Valina
GUG (Val/V) Valina
2a base
A G
UCU (Ser/S) Serina UAU (Tyr/Y) Tirosina
UCC (Ser/S) Serina UAC (Tyr/Y) Tirosina
UCA (Ser/S) Serina UAA "Ocre" (Stop)
UCG (Ser/S) Serina UAG "mbar" (Stop)
CCU (Pro/P) Prolina CAU (His/H) Histidina
CCC (Pro/P) Prolina CAC (His/H) Histidina
CCA (Pro/P) Prolina CAA (Gln/Q) Glutamina
CCG (Pro/P) Prolina CAG (Gln/Q) Glutamina
ACU (Thr/T)Treonina AAU (Asn/N) Asparagina
ACC (Thr/T)Treonina AAC (Asn/N) Asparagina
ACA (Thr/T)Treonina AAA (Lys/K) Lisina
ACG (Thr/T)Treonina AAG (Lys/K) Lisina
GCU (Ala/A) Alanina GAU (Asp/D) cido asprtico
GCC (Ala/A) Alanina GAC (Asp/D) cido asprtico
GCA (Ala/A) Alanina GAA (Glu/E) cido glutmico
GCG (Ala/A) Alanina GAG (Glu/E) cido glutmico
UGU (Cys/C) Cistena
UGC (Cys/C) Cistena
UGA "Opala" (Stop)
UGG (Trp/W) Triptofano
CGU (Arg/R) Arginina
CGC (Arg/R) Arginina
CGA (Arg/R) Arginina
CGG (Arg/R) Arginina
AGU (Ser/S) Serina
AGC (Ser/S) Serina
AGA (Arg/R) Arginina
AGG (Arg/R) Arginina
GGU (Gly/G) Glicina
GGC (Gly/G) Glicina
GGA (Gly/G) Glicina
GGG (Gly/G) Glicina
 Transcrio, Traduo e Sntese de Protenas

Traduo (DNA Protenas)

Participao do: mRNA e tRNA

cdon anticdon

Aminocidos
Protenas
 Variabilidade em Microrganismos

A variabilidade est associada a duas propriedades:

Gentipo: potencial gentico total herdado;

Procariotos: cromossomo + qualquer DNA presente (p. ex.
Plasmdeos)
Eucariotos: cromossomo + DNA organelas (mitocndrias e
cloroplastos)

Fentipo: expresso de uma poro do gentipo;

Condies ambientais tambm podem influenciar o
fentipo
Ex. Azomonas spp.
- meio com sacarose: colnias mucosas e grandes

- meio sem sacarose: colnias secas e pequenas

 VARIAES GENOTPICAS
Ocorre graas a dois mecanismos:
1) Mutaes
Alteraes (hereditrias) na sequncia de

nucleotdeos de um gene.
- Geralmente resultam em pequenas alteraes
genticas (uma em vrios milhes de clulas)

2) Recombinao gentica
Elementos genticos contidos em dois genomas

diferentes so reunidos numa unidade nova combinao de

genes.
- Provoca alteraes mais significativas.
VARIAES GENOTPICAS
Mutaes
Mudanas hereditrias na sequncia de
nucleotdeos de um gene
Diferentes tipos
Substituiode bases (troca de bases)
Mutaes de remoo (remoo de bases)

Adio ou perda de bases (protenas no funcionais)

Mutaes sem sentido (trmino da cadeia de aa)

Mutaes silenciosas (no acarreta efeito no fentipo)

AGENTES MUTAGNICOS

Agentes qumicos: anlogos de base

Radiaes: raios-X, luz ultra-violeta

Transposons
AGENTES MUTAGNICOS

Agentes qumicos: anlogos de base

Radiaes: raios-X, luz ultra-violeta

Transposons
 Agentes mutagnicos e seu modo de ao
Agente
Anlogos de base
5-bromouracil
2-aminopurina
Qumicos que reagem com o DNA
cido nitroso (HNO2)
Hidroxilamina (NH2OH)
Agentes alquilantes
Monofuncional (ex. sulfonato de
etil metano)
Bifuncionais (ex. gs mostarda,
nitrosoguanidina)
Corantes intercaladores
Acridinas, brometo de etdio
Radiao
Ultravioleta
Radiao ionizante (ex. raios X)
Ao
Substitui T, mas pareia
com G
Substitui A, mas pareia
com C
Desamina A e C
Reage com C
Metilao de G, que passa
a parear com T
Ligao cruzada das fitas de
DNA, a regio cortada
pela DNA polimerase
Inserem-se entre nucleotdeos
Formao de dmeros de
pirimidina
Formao de radicais livres que
quebram o DNA
Resultado
Troca de AT por GC
Troca de AT por GC
Troca de AT por GC
Troca de GC por AT
Troca de GC por AT
Troca de GC por AT
Mutao pontual e
deleo
Microinseres e
microdelees
Reparos podem levar
erros ou delees
AGENTES MUTAGNICOS

Agentes qumicos: anlogos de bases

Radiaes: raios-X, luz ultra-violeta

Transposons
Mutagnese por elementos
transponveis
* transposase
* repeties invertidas
* baixa frequncia: 10-5 a 10-7 por gerao (1/10,000,000)
RECOMBINAO GENTICA

Formao de um novo gentipo

Trocas de material gentico entre dois

cromossomos homlogos (crossing over)
eucariotos: MEIOSE
procariotos:RECOMBINAO
RECOMBINAO GENTICA

Transformao
Avery, MacLeod & McCarthy (1944)

Conjugao
Ledeberg & Tatum (1946)

Transduo
Zinder & Ledeberg (1952)
 Recombinao Gentica
Transformao
 Recombinao Gentica
Conjugao
Natureza:
- Contato entre clulas
- Plasmdeo ou cromossomo

Nogueira & Silva Filho, 2010

 Recombinao Gentica
Transduo
Natureza:
- Vrus como vetor (bacterifagos ou fagos)
- Generalizada e Especializada