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Caractersticas tintoriales
Caractersticas Tintoriales
Colorante:
Son compuestos orgnicos, aromticos y
coloreados, con un anillo arilo conteniendo
sistemas de electrones deslocalizados y que
tienen la capacidad de teir.
Los colorantes tienen como estructura base
al benceno
Colorantes
Los colorantes constan de:
1) Un anillo aromtico (Base)
2) Un grupo cromforo (color)
3) Un grupo auxcromo (carga)
Anillo aromtico (benceno)
Es un sistema cerrado de dobles enlaces
conjugados
Colorantes
Grupos Cromforos
Estos grupos imparten al compuesto la propiedad de color.
Configuraciones usuales
de cromforos
-C=C-,-C=N-,-C=O-
- N = N - (Azo) , - NO2 (Nitro) , Anillos Quinoideos , N = O (nitroso),
R1-N2O-R2 (Azoxi), C=N-N=C (Azina), N = (Indmico), C=S
(Tiocarbonilo), Tiazina
Colorantes
Cromgenos
Es la unin de un anillo aromtico con un
grupo cromforo
Colorantes
Grupos Auxcromos
Son grupos que incrementan el color unindose a
una molcula ionizable, reteniendo su capacidad de
ionizarse
Grupos auxcromo
usuales
- NH2
- COOH
- HSO3 ,
- OH
Efecto de un auxcromo
naftaleno, incoloro.
OH-
NO2-
OH-
b) En funcin de su carga
- cidos: carga negativa, tien
estructuras bsicas (carga +)
- Bsicos: carga positiva, tien estructuras
cidas (carga -)
- Neutros: Sales de un colorante cido y otro
bsico, algunos son liposolubles (tien
inclusiones citoplsmicas lipdicas)
Fucsina Verde de Malaquita
b) Fijacin:
Proceso que desnaturaliza o coagula las protenas del
microorganismo, para que ste quede adherido al
cristal del portaobjeto y mueran.
- Calor, Formaldehdo, Metanol, Tetraxido de osmio
Tinciones
Tipos de tinciones:
1) Tincin simple
2) Tincin combinada o compleja
3) Tincin diferencial
4) Tincin selectiva
5) Tincin negativa
6) Tincin vital
Tinciones
Tipos de tinciones:
1) Tincin simple: un solo colorante.
Forma, agrupacin, tamao y presencia de
esporas
2) Tincin combinada o compleja
Intervienen dos o ms colorantes
Tincin de Gram,
Tincin de Ziehl-Neelsen
Tincin de Shaeffer y Fulton.
Tinciones
3) Tincin diferencial
Distingue un grupo de MOs de otro tomando un color
diferente, (criterio taxonmico)
Capacidad metablica
Produccin de enzimas especficas
4) Tincin selectiva
Pone de manifiesto las estructuras de la clula
aprovechando las propiedades fsicas o qumicas de
algunos de sus componentes, (afinidad a los
colorantes).
Tincin de: pared, esporas, flagelo, etc.
Tinciones
5) Tincin negativa
La estructura de la clula no es teida por el
colorante, solo proporciona un contraste para
ponerla de manifiesto, en base a su bajo ndice de
refraccin.
Colorantes cidos
Cpsula
6) Tincin vital
Los MOs vivos pueden tomar el colorante por lo que
quedan teidos y los MOs muertos no adquieren el
color.
Actividad metablica
Azul de tetrazolio
Tinciones
Tincin de Gram
a) Gram positivas
b) Gram negativas
GRAM POSITIVA
PEPTIDOGLICANA
(POLISACRIDOS Y GLICOPPTIDOS)
MEMBRANA CITOPLSMICA
(FOSFOLPIDOS, PROTENAS Y OLIGOSACRIDOS)
GRAM NEGATIVA
FOSFOLPIDOS MEMBRANA
LIPOPOLISACRIDOS EXTERNA
Y PROTENAS
GRAM NEGATIVA
PEPTIDOGLICANA
(POLISACRIDOS Y GLICOPPTIDOS)
MEMBRANA CITOPLSMICA
(FOSFOLPIDOS, PROTENAS Y OLIGOSACRIDOS)
Tincin de Gram
Caractersticas de la Pared
Clostridium tetani
Corynebacterium diphtheriae
Gram negativos
Escherichia coli
Bordetella pertussis
Tincin de Ziehl-Neelsen
Tincin diferencial
Desarrollada inicialmente por Paul
Ehrlich para poner de manifiesto la
presencia de los bacilos causantes de
tuberculosis en muestras clnicas de
pacientes.
Ziehl
Neelsen
Tincin de Ziehl-Neelsen
1.-Hacer un frotis con la cepa de prueba, dejar secar al aire y
fijarlo al calor.
2.-Cubrir el portaobjetos con fucsina fenicada.
3.-Calentar suavemente con el mechero hasta la emisin de
vapores (5 min.). El colorante no debe hervir ni secarse,
aadir ms colorante si es necesario.
4.-Lavar con agua
5.-Decolorar exhaustivamente con alcohol-cido.
6.-Lavar con agua.
7.-Cubrir el frotis con azul de metileno durante un minuto
8.-Lavar con agua, escurrir, dejar secar.
9.-Observar con objetivo de inmersin.
ZN+ o BAAR: color rojo intenso.
NAAR: color azul.
Tincin de Ziehl-Neelsen
Pared celular Mycobacterium
Fundamento de la tincin
de Ziehl-Neelsen
Mycobacterium y Nocardia
Pared celular un alto contenido de cidos grasos de
cadena muy larga: ceras, cidos miclicos y nocrdicos,
respectivamente.
Importancia