Aspectos gerais sobre

preparo de amostras
Joaquim A. Nbrega
djan@terra.com.br
 Tcnicas Espectroanalticas
- FAAS
- GFAAS
- ICP OES
- ICP-MS

- Aspecto comum: amostras so usualmente

introduzidas como solues
 A sequncia analtica: as
principais etapas de uma anlise
1. Definio do problema
2. Seleo do mtodo
3. Amostragem: coleta de uma amostra representativa; preparo
da amostra laboratorial; replicatas
4. Preparo da amostra: obteno de solues a partir da amostra
5. Separao: eliminao de interferncias
6. Execuo de medidas (sinal analtico x concentrao:
calibrao)
7. Clculo dos resultados e estimativa de confiabilidade
(validao)
8. Ao
 Preparo de Amostra

- A etapa de preparo da amostra

geralmente a mais cara e que envolve mais
consumo de tempo e esforo

- O tempo total envolvido na anlise pode ser

determinado pelo tempo gasto na etapa de
preparo da amostra (Amostragem e
preparo de amostra ainda determinam o
tempo total de anlise e so etapas
limitantes do processo.)
 Preparo de Amostra

- O melhor preparo de amostra no ter que

prepar-la (Determinao direta de Cd em
urina por ETV-ICP OES)
- Procedimentos Dilua-e-determine

- Determinao da composio inorgnica de

leite por ICPs
- Diluio com gua: resultados inexatos!
- Diluio com aminas: OK!
 Escolha do Mtodo

- Determinao de Ca em gua

- Determinao de Ca em carbonato de clcio

- Determinao de Ca em vidro
 Escolha do Mtodo

- Formas de Hg em urina

- Formas de As em frutos do mar

- Cr(VI) em ligas, cimentos, carros etc.

 Cr(VI) Especiao Redox

US EPA Mtodo 3060A: um procedimento

de digesto alcalina desenvolvido para
extrair compostos solveis e insolveis de
solos, lodos e sedimentos. O mtodo foi
desenvolvido para extrair todas formas
solveis, adsorvidas e precipitadas de
cromo hexavalente e ao mesmo tempo
assegurar que nenhum cromo trivalente
oxidado e que nenhum cromo hexavalente
reduzido.
 Cr(VI) Especiao Redox

- 2,5 g amostra
- 0,28 mol/L Na2CO3 + 0,5 mol/L NaOH
- 90 95 oC
- 1h

- Determinao?
 Escolha do Mtodo: Parmetros
- Quais espcies sero determinadas? Quais as
faixas de concentraes dessas espcies?
- Qual informao se busca? qualitativa
semiquantitativa quantitativa
- Qual o grau de exatido necessrio?
- Quais so os constituintes da matriz da amostra?
- Quais so as propriedades qumicas e fsicas da
amostra bruta? (homogeneidade)
- Quantas amostras sero analisadas? Qual a
quantidade de cada amostra disponvel para
anlise?
 Escolha do Mtodo: Requisitos Gerais

- Preciso
- Exatido
- Seletividade
- Sensibilidade
- Limite de deteco
- Frequncia analtica
 Esciolha do Mtodo: Requisitos Especiais

- Microanlise
- Controle de produo
- Qumica Forense
- Variao temporal
- Especiao qumica (As, Hg, Cr)
 Escolha do Mtodo: Restries

- Custo
- Espao laboratorial
- Infra-estrutura laboratorial
- Tempo disponvel
- Habilidade do analista
 Escolha do Mtodo: Questes
- Trata-se da aplicao de um mtodo padro ou
ser necessrio desenvolver ou modificar um
mtodo e demonstrar sua eficincia?
- Tratando-se da aplicao de um mtodo padro, o
mesmo se aplica para o tipo de matriz presente na
amostra?
- Quais os teores de analitos esperados nas
amostras?
- Qual a exatido e a preciso requeridas para
efetivo uso dos resultados gerados?
- Trata-se de uma amostra que implica em toxicidade
para o analista?
- A amostra requer algum procedimento especial de
manipulao (e.g. radioativa, sensvel ao ar,
higroscpica)?
 Escolha do Mtodo: Questes

- Quantas replicatas so necessrias?

- Qual a quantidade de amostra necessria?
- Qual a quantidade de amostra disponvel?
- Qual tipo de frasco deveria ser usado?
- As amostras devem ser preservadas?
- Qual o custo aceitvel para a anlise?
- Qual a urgncia (real) para emisso de
resultados?
 Pr-tratamento de Amostra
- Pr-tratamento da amostra inclui todos
procedimentos para o preparo da amostra no
laboratrio
- Pr-tratamento depende do estado original
da amostra
- A maioria das tcnicas instrumentais de
medida requer uma etapa prvia de digesto
da amostra
 Pr-tratamento de Amostra
- As principais razes para o pr-tratamento
de amostra so:
- Homogeneizao
- Dissoluo de materiais slidos
- Separao de substncias interferentes
- Pr-concentrao de analitos

- Ph. Quevauviller, Sci. Tot.

Environ.,176:141,1995.
 Pr-tratamento de Amostra
- Operaes preliminares de tratamento
geralmente so fsicas
- Moagem
- Secagem
- Filtrao
- Centrifugao
- Destilao
 Preservao de Amostras
- Liofilizao (meio aquoso, alimentos, resduos)
- Irradiao (amostras biolgicas) estabilidade do
analito precisa ser estabelecida
- Antioxidantes (amostras lquidas) avalie efeitos de
interferncia especficos
- Anticoagulantes (sangue e amostras clnicas)
contaminao
- Autoclave (fluidos biolgicos e solos) avalie efeitos
de interferncia especficos
- cidos (gua) evite hidrlise
Preparo de Amostra: Homogeneizao

- Homogeneizao visando obter uma

amostra representativa
- Etapa importante na anlise da maioria dos
materiais
- Grau de homogeneidade requerido depende
predominante/e do tamanho da subamostra
- Identificao de heterogeneidades por
anlises paralelas de vrias subamostras do
mesmo material
Preparo de Amostra: Homogeneizao

- Aspecto crtico: contaminao (amostra pode ser

mais dura que o material do dispositivo usado para
moagem)
- Reaes qumicas: oxidao Fe(II); perda de gua

- Materiais moles:
- Moinhos de alta velocidade
- Liofilizao pulverizao
- Materiais duros:
- Moinhos de bolas
Engelsen & Wibetoe, Fresenius J. Anal. Chem.,366:494,2000.

Temperatura ambiente Moagem criognica

 Sequncia Analtica
- Amostragem
- Moagem / homogeneizao (10 min 2 h)
- Amostra representativa
- Pesagem (3 - 5 min)
- Digesto (30 min to 48 h)
- Diluio (3 5 min)
- Medida (2 10 min)
 Digesto de Amostra

Dissoluo definida como o simples processo de

dissolver uma substncia em um lquido sob
temperatura relativamente baixa

O termo digesto (decomposio) se refere a um

processo mais complexo que geralmente
conduzido sob maior temperatura e/ou sob maior
presso com a ajuda de reagentes e dispositivos
especiais.
 Digesto de Amostra

Biolgica
C2H4 + 12 HNO3 12 NO2 + 8 H2O + 2 CO2

Geolgica
SiO2 + 4 HF 2 H2O + SiF4

Metais
Cu + 2 HCl H2 + Cu2+ + 2 Cl-
 Digesto de Amostra

A digesto de amostra desempenha uma

papel central na maioria dos processos
analticos, mas no frequentemente
reconhecida como uma etapa importante
em qumica analtica, com ateno especial
sendo direcionada para a etapa de
determinao.

H. Matusiewicz, Wet digestion Methods, In: Z. Mester and R.E.

Sturgeon, Eds., Sample Preparation for Trace Element
Analysis. Elsevier, 2003.
 Digesto de Amostra

1. Digesto por via mida

2. Combusto

3. Fuso
 Digesto de Amostra
1. Digesto por via mida
1.1. Sistemas abertos
1.2. Sistemas fechados

2. Combusto
2.1. Sistemas abertos
2.2. Sistemas fechados
2.3. Sistemas dinmicos

3. Fuso
 Digesto de Amostra
1. Digesto por via mida
1.1. Sistemas abertos
1.2. Sistemas fechados
com aquecimento convencional
com aquecimento assistido por radiao micro-ondas
2. Combusto
2.1. Sistemas abertos
Via seca
Combusto sob baixa temperatura
2.2. Sistemas fechados
Combusto em frasco fechado
com aquecimento convencional
com aquecimento assistido por radiao micro-ondas
2.3. Sistemas dinmicos
3. Fuso
com aquecimento convencional
com aquecimento assistido por radiao micro-ondas
 Preparo de Amostra Ideal

Segurana
Multi-elementar
Frequncia analtica (tempo)
Volume do digerido? Reagentes? Custo?
Resduos? (Qumica Verde)
Experincia do analista
Baixa acidez residual
Baixo contedo de slidos dissolvidos
Baixo teor de carbono residual (RCC)
 Efeito do Teor de Carbono Residual
sobre Determinaes Analticas

1. ICP-MS Interferncia poliatmica: e.g. 52Cr+ (12C40Ar+) e 53Cr+ (13C40Ar+)

2. HGAAS: As e Se (elevado sinal de fundo e supresso de sinal)

3. Polarografia: Supresso de sinal de Cd e Pb

4. Digesto incompleta pode diminuir a liberao do analito da matriz

 A etapa de pr-tratamento pode
afetar

- A exatido e confiabilidade do resultado.

- A quantidade total de tempo e esforo
envolvidos na execuo da anlise. Muitos
mtodos instrumentais de anlise requerem
pr-tratamento de amostra mais simples que
os mtodos clssicos.
 Avaliao de um procedimento de digesto

- Perda de analitos (As, Hg, S, Se, I)

- Contaminao (adsoro, dessoro)
- Eficincia de digesto (teor de carbono residual
RCC)
- Tempo
- Energia necessria
- Trabalho requerido
- Frequncia analtica
- Automao
 Preparo de Amostra Desafios Crticos

- Frequncia analtica
- Procedimentos gerais
- Reagentes: propriedades, compatibilidade com
tcnica instrumental, pureza, segurana e custo
- Anlise de Traos
- 1 ppb = 1 g / L 1 s em 31,7 anos
- Anlise de especiao
- Castanha do Par
- Elevados teores de Se
- Elevados teores de Ba
- Formas qumicas?