ANALISIS E INTERPRETACIN DE LAS ALARMAS,

DISPERSOGRAMAS E HISTOGRAMAS
Analizador Hematolgico BC-5800

Lic. TM Javier Quiroz Castillo

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Dpto./de
Marketing
Ingeniera Medica
 Familia de
Productos Mindray
Oficinas
Shenzhen,
P.R.China
Ingresos:
547.5 Mill.
USD (2008)
Empleados:
5580
Posicionamiento
de Mercado:
Mayor compaa
China en2 Desarrollo
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Familia de Analizadores
Hematolgicos

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Imagen del BC-5800
5 diferenciales, 29 parametros

Hasta 90 muestras por hora

Laser scatter + Chemical dye +
Flow cytometry technology

Canal independiente y mtodo optico

para la medicin de Basfilos

Powerful capability to flag abnormal cells

Optional autoloader, barcode scanner
Large TFT touch screen
Large storage capacity: up to 40,000 samples
Recommended or customizable decision rules
for re-exam abnormal samples

Support uni- or bi-directional LIS

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 Estudio de Clulas Sanguneas
Neutro

Eos RBC

Mono

PLT
Baso
Lymph

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 Tecnologa 3 diff?

Secuencia normal de
Tamao
Despus de los Lisantes

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 Tecnologa 5 diff?

Cinco grupos Leucocitarios

Lymphocyte 25 ~ 30%
Monocyte 3 8 %

Neutrophil 50 ~70%
Basophil 0 1 %
Eosinophil 0.5 3%

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 Similitudes y diferencias

Grnulos pequeos,
ncleo multilobular

Grnulos grandes y
Gran ncleo que ocupa oscuros; ncleo
casi toda la clula lobulado

Grnulos grandes
rojo/naranja; ncleo
prpura bilobulado
Ms citoplasma que el linfocito

Estructura simple y diferente tamao Estructura compleja y tamao medio

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 Diferenciacin de Leucocitos
5 Diff.
Existen 5 diferentes tipos de Leucocitos ( WBC)

Lymphocyte Monocyte Neutrophil Eosinophil Basophil

Tamao pequeo, gran Grande, citoplasma sin Grnulos en citoplasma Grnulos de color Menos comn de todos,
ncleo con relacin a grnulos, interviene en la de color rosado, marcador naranja, gruesos , grnulos de color azul
citoplasma, el mayor ingestin de partculas de etapa aguda de la relacionados con oscuro, relacionados con
constituyente del extraas, como bacterias o inflamacin. infecciones parasitarias. infecciones micticas.
sistema inmune. parsitos.

Granulocitos

LYM MON NEU EOS BAS

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WBC: White Blood Cell
Combinacin de Tamao y Complejidad

Tamao
A C
B

D E

Complejidad, grnularidad (vacuolas, artefactos)

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 Cmo Diferenciar los Diferentes
Tipos de Leucocitos?
Utilizando sus diferentes caractersticas, TAMAO Y
COMPLEJIDAD CELULAR

Para eso utilizaremos cuatro tecnologas combinadas:

Citometra de Flujo
Dispersin de Laser
Tincin Citoqumica
Impedancia Elctrica

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Dpto./de
Marketing
Ingeniera Medica
Tecnologa Avanzada
WBC 5-diff technology

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 WBC Tecnologa
Citometra de Flujo
Celulas inyectadas en una
cmara de flujo que esta
localizado en el paso ptico de
una fuente de luz, usualmente un
laser.
La cmara de flujo contiene un
lquido que fluye rapidamente : el
fluido envolvente que lleva la
muestra a alta velocidad por el
paso de luz.
Las clulas mantienen su
orientacin y posicin en el fluido
debido a que obedecen las
caracterstricas del flujo laminar y
atraviesan en fila de uno el paso
ptico.

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WBC Tecnologa
La dispersin de Luz ocurre
Dispersin de Luz Laser
cuando la partcula reflacta la
luz que incide sobre ella, esto
depende de las caractersticas
fsicas de la partcula.

-Forward scatter (FS): Tamao

-Side scatter (SS): Complejidad

1 - 5
6 - 20

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 Dispersin de Laser de ngulo Mltiple

Dispersin de ngulo
mayor (MAS)8~20
5
Granularidad (Complex)

3 4
Dispersin de ngulo
Menor (LAS)2~5
Volumen
1 Muestra
2 Laser
3 Lentes

1
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 Teora de Mie
En clulas diferentes de diferente tamao (Monoc. y Linf.)
El ngulo bajo las diferencia por tamao

Laser

LAS

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 Teora de Mie

En clulas diferentes pero del mismo tamao (granulocitos)

ngulo mayor refleja la complejidad celular

Laser

MAS

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WBC Tecnologa
Tincin Qumica

EOS

Otros
WBC

RBC

Cmara de diferencial

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WBC technology
Chemical dye

BASO

other
WBC

RBC

BASO Channel

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BASO scattergram
WBC/Baso

WBC BAS%

BAS# can be calculated according to BAS%

WBC total result is counted in BASO channel

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5 part result
Finally

NEU% LYM% MON% EOS% BAS%

* WBC = BAS#

*
NEU# LYM# MON# EOS#

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 DISPERSOGRAMA / SCATTERGRAMA

DEFINICIN
Grfico estadstico que
representa la distribucin de
dos variables en una
muestra. Una variable se
representa grficamente en
el eje vertical; la otra en el
horizontal. Un
dispersograma demuestra
el grado o tendencia de
presentacin de las
variables en relacin mutua.

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Dpto./de
Marketing
Ingeniera Medica
 INTERPRETACIN DEL
DISPERSOGRAMA

Neu

Mon

Lymph

Ghost

FS : Frontal Scatter / Dispersin Frontal / Informacin

sobre el Tamao celular
SS : Side Scatter / Dispersin Lateral / Informacin sobre
Complejidad Celular

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Dpto./de
Marketing
Ingeniera Medica
 Entendiendo el Dispersograma Normal

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 Dispersograma de una muestra NORMAL

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 Dispersograma de una muestra normal

Neu

Mono

Eos
Lymph Baso

RBC Ghost 4 Parts

Dispersograma BASO
1. The 4 parts except BASO should be close to the lower left corner.
2. The profile of lower part should be smooth, not cut by a straight line.

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 DIFF

Grande

Neutro es complejo y
grande

Mono es ms grande que

el Linfo

Estructura interna del

Linfo es mas simple que la
del EOS.

Pequeo

Estructura simple Estructura compleja

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 BASO

Grande

Baso mantiene su
mismo tamao

Lymph
Neutro
Eos
Mono
Disminuyen
grandemente
Pequeo

Estructura simple Estructura compleja

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 Dispersograma Anormal y Su Significado

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 Muestras Anormales:
Banderas
Left Shift
LIC

Mon

ALY

Lym ALY

NRbc
Ghost

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 Dispersograma de una muestra ANORMAL

Leucopoenia Eosinophilia

Lymphocytosis Neutrophilia Monocytosis

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 Dispersograma de una muestra ANORMAL

ATL LIC

Left shift Lyse resistant

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 Dispersograma Anormal

Mov Izq.

LIC

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 Dispersograma Anormal

ALY

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 Ganancia inadecuada

Ganancia baja Ganancia alta

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 Celda de flujo sucia o con cogulos

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 DEFINICIN
ALARMA
Seal por medio
de la cual se
informa sobre la
presencia real o
inminente de
una amenaza,
aviso de la
probabilidad de
que ocurra un
suceso.
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Marketing
Ingeniera Medica
 SISTEMA DE ALARMAS
2.
Banderas

1.
Lmite
Excedido

3.
Se Requiere
Confirmacin
Microscpica

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Por qu se requiere
confirmacin microscpica?
En estado patolgico las RUO

clulas alteran sus Atypical

Lymphocytes (#,%)

caractersticas celulares Large Immature

Cell (#,%)

normales
Tamao : clulas
activadas son mas grandes
Complejidad : Clulas
activadas desarrollan
estructuras que
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Dpto. de Ingeniera Medica
 Superposicin de poblaciones

Como
consecuencia de
esto las clulas no
se encontraran en 35
65

las zonas donde

normalmente se
ubicaban. Y es
posible que las
poblaciones se
superpongan no
permitiendo asi una
identificacin
definitiva.
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ocasiones, mi
lmina no
concuerda con Diferencia de mtodo,
el resultado recordar que el analizador
del cuenta miles de clulas y
analizador? el observador 100.
Extensin de la muestra,
de la aguja, o del tubo?
Recordar que en Fragilidad de los
raras ocasiones la eosinfilos
lectura microscpica
hecha por dos Tcnica de lectura (incluyo
operadores los extremos?)
diferentes coincide Alteraciones debido a la
completamente preparacin del colorante.
Densidad de la muestra.
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 HISTOGRAMAS, EL
PRINCIPIO DE
COULTER
Luego de producida la accin del
lisante las clulas son medidas y
contadas por el mtodo de
impedancia (recordar que por el
principio de Coulter el nmero de
pulsos producidos por el paso de una
partcula con carga de una solucin a
otra conectas y unidas mediante un
registrador de voltaje equivale al
nmero de partculas que se
desplazan de una solucin a otra, y la
duracin del pulso es directamente
proporcional al volumen de la
partcula.)

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HISTOGRAMAS
En estadstica, es la
representacin grfica de
una variable, en forma de
barras, donde la superficie
de cada barra es
proporcional a la
frecuencia de los valores
representados.
En el eje vertical se
presentan las frecuencias.
En el eje horizontal se
presentan los valores de las
variables

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HISTOGRAMAS
El histograma es un grafico
construido mediante la
representacin de dos variables:

a.- Volumen de la partcula, en el eje

X (Horizontal), en femtolitros
b.- Nmero de partculas, eje Y
(Vertical)

El analizador presenta 3 histogramas

WBC, Baso
Glbulos Rojos
Plaquetas

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HISTOGRAMAS

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HISTOGRAMAS

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HISTOGRAMA DE
PLAQUETAS
Observe que la distribucin de la
poblacin no es simtrica, esto es
normal debido a que las plaquetas son
restos celulares de forma y tamao
variable, una plaqueta joven es de
mayor tamao que una senescente, si
bien el lmite aceptado para una
plaqueta normal son 12 fl. Eso quiere
decir que el promedio de la poblacin
(el pico) debera encontrarse siempre al
lado izquierdo de la flecha, como se
observa en el grfico.

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 HISTOGRAMA DE
PLAQUETAS

Un grfico que siga la lnea roja debe

interpretarse como posible agregacin
plaquetaria (el origen intra o
extravascular de la misma no puede
determinarse) o con un aumento en el
nmero de plaquetas grandes,
fragmentos celulares (membranas de
glbulos rojos)
Un grfico que siga la lnea verde debe
interpretarse como interferencia
producida por microcitosis marcada,
glbulos rojos de menos de 30
fl.(recordar que tanto plaquetas como
glbulos rojos se miden por impedancia
en una misma cmara y de manera
simultnea.)

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HISTOGRAMA DE
PLAQUETAS

Una agregacin plaquetaria lleva

consigo una disminucin en el
nmero de plaquetas (2 o ms
plaquetas agregadas son contadas
como una de mayor tamao).
Por lo tanto cada vez que se
encuentre una alteracin en la
forma del histograma de
plaquetas, debe investigarse
microscpicamente la muestra en
busca de agregacin plaquetaria.

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PLT series
P-LCC/P-LCR

S2 represents the number of larger platelet cells, and S1+S2 represents the total PLT
count.

P-LCC = PLT * P-LCR

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 HISTOGRAMA DE
GLOBULOS ROJOS
El Histograma de Glbulos Rojos se
aprecia como una distribucin
cercana a la normal.
Observe la distribucin casi simtrica
de la poblacin con el pico de la
poblacin cercana a los 87 fl.
Observe adems que existen
hemates debajo de los 50 fl. Y
encima de los 100 fl.
El ancho de base de la campana
representa el nivel de variabilidad de
la poblacin,
(Anisocitosis/poiquilocitosis)
La posicin de la campana sobre el
eje horizontal representa la tendencia
Micro, Normo o Macroctica de la
poblacin.

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 HISTOGRAMA DE
GLOBULOS ROJOS

Lnea Verde: Microcitosis sin anisocitosis.

Lnea Roja: Macrocitosis sin anisocitosis.

Lnea Amarilla: Anisocitosis, y/o

Poiquilocitosis.

Lnea Azul: Doble poblacin.

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 Case Presentation

Normal people, the RBC Dimorphologic RBC histogram,

histogram shape is in perfect indicating anisocytosis. From a
Gaussian distribution. rectal cancer patient

Microcytosis, the RBC Dimorphologic RBC histogram.

dominant peak moves to left. From a recovery of Iron-
From a 34-year old deficiency anemia treatment
outpatient. patient.

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4 channels for BC-5800
5 reagents in 4 channel
LYM
MON

Flow Cytometry
NEU

Laser Scatter
DIFF Channel EOS

Scattergram
Sample BAS
Rotatory
Valve WBC
BASO Channel

Colorimetry
LH Lyse
HGB
HGB
HGB Channel

Impedance RBC
RBC
Aperture PLTPLT
RBC Channel

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