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m
p La reacción en cadena de la polimerasa (PCR)
permite a los investigadores para producir
millones de copias de una secuencia específica
de ADN en aproximadamente dos horas. Este
proceso automático evita la necesidad de
utilizar bacterias para amplificar el ADN.
En un tubo de ensayo el ADN de la especie objeto de estudio. Se añade en
dicho tubo un par de oligonucleótidos que actúen como cebadores para la ADN
polimerasa. Los cebadores o primers son los delimitan la región a amplificar y
deben ser complementarios a cada uno de los extremos 3´ de la región a
amplificar.
Añadir al tubo de reacción los 4 tipos de desoxirribonucleótidos trifosfatos
(dNTPs) que componen el ADN (dATP, dGTP, dTTP y dCTP,) por último
también la ADN polimerasa.
Taq-polimerasa, aislada de la bacteria Thermus aquaticus polimerasa especial
capaz de resistir las elevadas temperaturas a la que vamos a someter a
nuestro tubo de reacción
Por último, facilitar que la polimerasa lleve a cabo
la síntesis de ADN utilizando como cebadores los
extremos 3´ de los primers utilizados. Así,
nuestra reacción constaría de 3 pasos:
. Ú
Se
conseguiría elevando la temperatura
del tubo de reacción hasta 94oC,
durante, por ejemplo, un minuto (este
tiempo puede variar entre ½ minuto
y 2 minutos)
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