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Laborat

orio
7

La membrana y el
transporte celular

Marcela Bernal Mnera


BIOL3051
Objetivos
Describir los componentes de las membranas biolgicas.

Discutir los factores que pueden afectar la integridad de las


membranas.

Explicar como la difusin y la smosis son importantes para la


clula.

Mencionar los factores que afectan la velocidad de difusin.

Explicar que son soluciones hipotnicas, hipertnicas e


isotnicas.

Explicar que es osmolaridad en los tejidos.


Las membranas celulares
Las membranas celulares
son barreras selectivas
que separan las clulas y
forman compartimentos
intracelulares.

Entre sus funciones estn:

Permitir la entrada o
salida de molculas de la
clula o del organelo.

Generar seales para


modificar el metabolismo.

Adherir clulas para


formar tejidos.
Composicin de la
membrana
Doble capa de
fosofolpidos, Glicoprotena

protenas y Protena
Protena
perifrica
Periferal Canal de
carbohidratos: Transporte

- Fosfolpidos:
Barrera
hidrofbica entre
Colesterol
los Fosfolpidos Protena

compartimentos Integral

acuosos de la
clula.
Composicin de la
membrana
- Protenas: Permiten paso de molculas
hidroflicas a travs de la membrana y determinan
funciones especficas de la membrana, incluyen
bombas, canales, receptores, molculas de
adhesin, transductores de energa y enzimas.

- Carbohidratos: Comunicacin intercelular y


adhesin.

- Colesterol: Determina la fluidez de la membrana.


Caractersticas de la
membrana
La membrana es una estructura funcional
activa, con mecanismos enzimticos que
desplazan molculas especficas
penetrando o saliendo de la clula con un
gradiente de concentracin.

En las clulas vegetales existe una pared


celular que presenta numerosos orificios
diminutos por donde pueden pasar
sustancias de un lugar a otro.
Caractersticas de la
membrana
El acceso de las sustancias depende de:

La permeabilidad selectiva: para mantener la


homeostasis de la clula.

El tamao de las molculas.

La carga elctrica: no polares o hidrofbicas


(pasan por la capa de lpidos), las polares o
hidroflicas (pasan por los canales).

Gradiente de concentracin: Diferencia de


concentracin en 2 lugares.

La solubilidad.
Movimiento
Browniano
El movimiento que
lleva a cabo una
partcula muy Modelo
pequea que est
inmersa en un fluido.

Se caracteriza por
ser continuo y muy
irregular.

La trayectoria que
sigue la partcula es
en zigzag.

Es la fuerza motrz
de la difusin.
Difusin
Es el movimiento de
molculas de una regin
de alta concentracin a
otra de menor
concentracin producido
(hasta que se iguala) por
la energa cintica de
las molculas.

No requiere gasto de
energa (movimiento
pasivo). Movimiento
activo requiere gasto de
ATP.
Osmosis
El componente principal de la clula es el
agua, que acta como solvente (el agente
que disuelve) de solutos orgnicos e
inorgnicos. El movimiento de agua a
travs de una membrana selectivamente
permeable se llama osmosis (difusin de
agua) y sucede siempre del rea de mayor
concentracin de agua (con menor
concentracin de soluto) al rea de menor
concentracin de agua (con mayor
concentracin de soluto).
Osmosis
Cuando la clula contiene una concentracin de
solutos mayor que su ambiente externo, se dice que
la clula est en una solucin hipotnica, y como
consecuencia, el agua entra a la clula causando
que se expanda.

Si la concentracin de solutos es mayor fuera de la


clula, se dice que la clula est en una solucin
hipertnica; la clula pierde agua y se encoge.

Si las concentraciones de soluto son iguales en


ambos lados de la membrana, se dice que la clula
est en una solucin isotnica, donde el
movimiento neto es cero
Comportamiento de la
clula animal y la vegetal:
Clula animal: Clula vegetal:
Crenacin: ocurre Plasmolisis: ocurre
cuando la clula est cuando la clula est
expuesta a un ambiente expuesta a un ambiente
hipertnico y se arruga hipertnico y pierde
agua. Se observan areas
al perder agua.
blancas.

Hemlisis: ocurre Turgencia: ocurre


cuando la clula est cuando la clula est
expuesta a un ambiente expuesta a un ambiente
hipotnico y explota al hipotnico y esta
llenarse de agua comienza a llenarse de
agua, pero no explota
porque la pared celular
la protege.
Figura 12
Presin osmtica
Se entiende por presin osmtica la
presin que sera necesaria para detener
el flujo de agua a travs de la membrana
semipermeable.

Cuando una clula se sumerge en un


lquido con diferente concentracin a la
de su interior, la presin osmtica puede
ocasionar plasmlisis o turgencia.
Presin osmtica
Se entiende por presin osmtica la presin que sera
necesaria para detener el flujo de agua a travs de la
membrana semipermeable.

Las clulas animales funcionan ptimamente en


ambientes isotnicos. En las clulas vegetales, sin
embargo, cuando la vacuola se llena de agua, sta
ejerce presin contra la pared celular hasta llegar a un
punto donde se impida que entre ms agua ( presin
de turgencia) y la clula se encuentra trgida (firme),
lo cual es el estado ideal de estas clulas. Por otra
parte, si la clula vegetal pierde agua, la clula sufre
plasmlisis al separarse la membrana celular de la
pared celular, lo cual suele ser letal para la clula.
Ejercicio 1. Osmolaridad en
clulas vegetales
Observar cmo soluciones con diferentes molaridades
afectan el equilibrio y el funcionamiento de las clulas
vegetales.

Procedimiento:
1. Rotule 6 vasos para cada solucin de sacarosa (0.1 a 0.6
M) y un vaso para agua destilada (0.0 M).

2. Aada 100 ml de la solucin correspondiente a cada


vaso.

3. Con el sacabocado obtenga 7 cilindros de papa de 1 cm


de largo (cubrirlos con papel toalla hmedo).

4. Pese los cilindros de papa, anote el peso inicial para


cada uno y transfieralos inmediatamente a los vasos
rotulados.
Ejercicio 1. Osmolaridad en
clulas vegetales
5. Deje los cilindros en los vasos por dos horas.

6. Saque los cilindros, remueva el exceso de agua


con papel toalla y anote el peso final de cada
uno. Asegurese de mantener saparados los
cilindros correspondientes a cada vaso.

7. Anote si hubo cambios en textura (blandos o


duros) y anote en la Tabla 1 el peso final de los
cilindros.

8.Con los datos de la Tabla 1, calcule el cambio en


peso paraCambio
cada cilindro
en peso (%) =
y prepare una grfica
peso final peso inicial X

sealando100los cambios en peso.


peso inicial
Tabla 1. Molaridades de las soluciones
0.0 0.1 0.2 0.3 0.4 0.5 0.6

Peso
inicial (g)

Peso
final (9)

Cambio
en peso
(%)

Nota: REPORTE CORTO DE LOS RESULTADOS DE ESTE


EJERCICIO
* Osmolaridad: expresa concentracin (nmero total de
Grfica cambio en peso vs
molaridad

Cambio
en
0
peso
(%)

0.0 0.1 0.2 0.3 0.4 0.5 0.6

Osmolaridad

Nota: Seleccione una escala apropiada para el eje Y de la


grfica (el cero debe colocarse en el centro del eje). El
aumento de peso se grafica sobre el cero y la disminucin en
Ejercicio 2. Efecto de la
temperatura sobre las
membranas celulares.
Se utilizar la planta de remolacha (Beta vulgaris), cuyas
clulas almacenan en la vacuola central el pigmento
violeta betacianina.

Procedimiento:

1. Corte 6 pedazos de remolacha (1 cm) con un sacabocado y


cloquelos en tubos de ensayo rotulados del 1 al 6.

2. Aada en el tubo 6, 3 ml de agua y llvelo al congelador


por 30 minutos.

3. Coloque en el tubo 5, 3 ml. de agua y pngalo en bao de


hielo por 30 minutos.

4. Coloque en el tubo 4, 3 ml de agua y deje a temperatura


ambiente por 30 minutos.
Ejercicio 2. Efecto de la
temperatura sobre las
membranas celulares.
5. Aada al tubo 1, 3 ml de agua y colquelo en un bao
de agua caliente a 70 C por 1 minuto, despus de 20
minutos sacar el pedazo de remolacha del tubo.

6. En un bao de agua a 55 C haga lo mismo con el tubo


2.

7. Repetir el proceso con el tubo 3, pero a 40 C .

8. Comparar intensidad de color al finalizar el


experimento.

9. Coloque los resultados intensidad de color vs.


temperatura en la tabla 2.
Tabla 2. Efecto de la temperatura

Tubo Temperatura (C) Intensidad de


color

1 70

2 55
3 40
4 Ambiente (24)
5 Bao de hielo
6 Congelador

* (1 = menos intenso; 6 = mas


intenso)
Ejercicio 3. Efecto de los
solventes sobre las
membranas celulares.
Ejercicio preparado por instructor:
1. En 6 tubos de ensayo colocar un pedazo de
remolacha de 1 cm.

2. A los tubos 1, 2 y 3 se les aade 3 ml. de las


siguientes soluciones en orden: metanol de 1%,
25% y 50%.

3. A los tubos 4, 5 y 6 se les aade 3 ml de


acetona a 1%, 25% y 50%.

4. Esperar 30 minutos, remover la remolacha


colocar los tubos en orden de mayor a menor
intensidad de color.
Ejercicio 4. Efecto de los
solventes sobre lpidos y
protenas .
Ejercicio preparado por instructor:

1. Rotule 4 tubos adicionales y aada


lo siguiente a cada uno:
Tubo a: 1 ml aceite + 1 ml acetona
Tubo b: 1 ml aceite + 1 ml metanol
Tubo c: albmina + 1 ml de acetona
Tubo d: albmina + 1 ml de metanol
Ejercicio 5. Transporte celular:
Difusin + movimiento browniano
En este ejercicio se estudiar el movimiento browniano de las
molculas y el efecto de la temperatura sobre dicho
movimiento.

Procedimiento:
1. Aada agua a temperatura ambiente a un vaso y a otro vaso
aada agua fra.

2. Deje reposar los vasos por 10-15 min para que no haya
movimiento del agua.

3. Aada cuidadosamente una gota de colorante a cada


envase y observe la dispersin de la gota.

4. Afect la temperatura la difusin del tinte? Explica tu


observacin.
Ejercicio 6. Transporte celular: Difusin
a travs de una membrana
selectivamente permeable (dilisis).
Procedimiento:
1. Cortar bolsas de dilisis de 15 cm. Doblarlas al final y hacer un nudo
fuerte.

2. Aadir mitad de solucin de glucosa y mitad de almidn a la bolsa y


cerrar con un cordn (que se pueda abrir luego).

3. Mezclar el contenido interno y observar el color.

4. En un beaker con 100 ml de agua aadir varias gotas de solucin de


yodo hasta tener un color dorado.

5. Poner la bolsa dentro del agua y esperar 30 minutos.

6. Sacar la bolsa del agua y ponerla en un beaker vacio. Anotar el color de


las soluciones dentro y fuera de la bolsa y comprelas.

7. Realizar prueba de Benedict para las soluciones.


Ejercicio 7. Transporte celular:
Osmosis en clulas animales.
Tubo 1: agua con sal + sangre de res (soluci n hipertnica).
Tubo 2: agua + sangre de res (soluci n hipotnica).

Procedimiento:
Rotular y preparar 4 laminillas:
laminilla 1: gota de sangre, coloque el cubreobjeto y
observe los eritrocitos bajo el microscopio.
Laminilla 2: gota de la mezcla del tubo 1, coloque el
cubreobjeto. Observe bajo el microscopio y compare con
laminilla 1.
Laminilla 3: Repetir el procedimiento anterior con la
mezcla del tubo 2.

Eritrocitos en ambiente hipert nico: crenacin


Eritrocitos en ambiente hipot nico: hemolisis
Ejercicio 8. Transporte celular:
Osmosis en clulas vegetales.
Procedimiento:
1. Rotular 3 laminillas

2. Laminilla 1: hoja de elodea con una gota de agua de la


pecera (solucin isotnica).

3. Laminilla 2: hoja de elodea con una gota de la mezcla


agua + sal (solucin hipertnica).

4. Laminilla 3: hoja elodea con una gota de agua destilada


(solucin hipotnica).

Clula vegetal en ambiente hipertnico: plasmlisis


Clula vegetal en ambiente hipotnico : turgencia
Elodea (hipotnica)
Elodea (hipertnica)
Medio isotnico
Elodea Eritrocitos
Prxima semana
Parcial I (marzo 6): prcticas 1 al 6.
Cambiar mis horarios de atencin del
martes al lunes de 3 a 5.

Prueba corta (10 ptos.): 4 preguntas de


la prctica 7 y 1 de la 8.

Laboratorio 8. Respiracin celular.


Revise la presentacin de power point.

Traer bata y vestimenta adecuada.


Prxima semana
Elaborar reporte cientfico: Resultados del ejercicio
1: Osmolaridad en clulas vegetales (12.5 puntos). El
reporte debe ser en computador y debe tener:

- Texto describiendo los resultados ms relevantes: (4.5


ptos.)
- Tabla con los datos (4 ptos.)
- Grfica A MANO (4 ptos.)

Recuerde que en los resultados no se discute. No


olvide todos los detalles que deben tener las tablas y
grficas para estar bien construidas. SEA
CONCRETO.

Recomendaciones: Haga su informe a tiempo, evtese


inconvenientes, solo se recibir en la fecha indicada.

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