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LAS PROTEINAS
Mutaciones bioqumicas
Prdida o cambio de alguna funcin bioqumica, como una
actividad enzimtica. Por ejemplo, los mutantes auxtrofos
no pueden crecer en medio mnimo.
El propsito es
introducir en la clula
receptora fragmentos
de ADN.
3. Mtodos de introduccin
del vector
3.1Transformacin.
Ocurre espontneamente
en ciertos tipos de
bacterias y se consigue
artificialmente
sometiendo a la clula
bacteriana a tratamientos
fsicos y qumicos.
La clula capta molculas
de ADN que se
encuentran en el medio
externo, las introduce en
su interior y las incorpora
a su genoma. En las
siguiente animacin puede
verse el proceso.
Transduccin
Este mtodo consiste en introducir el ADN en la clula
hospedadora mediante un virus, utilizando como vector de
clonacin el genoma del virus.
El nmero 1 corresponde al
virus aproximndose a una
bacteria. Se puede
observar como lleva un
genoma ya con el gen que
interesa clonar. El siguiente
momento 2, corresponde al
contacto entre el virus y la
pared bacteriana, en cuya
zona de contacto se
produce un poro por donde
como vemos en la etapa 3,
el virus inyecta su ADN al
interior de la clula
bacteriana.
Procedimiento en animacin...
Clonado del ADN
Una vez que se ha conseguido
la poblacin de bacterias
transformadas, llevan adems
del gen de inters otro gen.
Luego se ponen a las bacterias
en un medio de cultivo
apropiado para que se
multipliquen. A la vez que se
reproducen las bacterias lo
hace tambin el plsmido con
el gen que interesa. Se
pueden formar por tanto
diferentes clones con genes de
inters para el hombre. Este
conjunto de clones se
denomina biblioteca genmica.
SECUENCIACION:
TECNICA DEL
DIDESOXI
Una tcnica propia de la Ingeniera
Gentica es la determinacin de la
secuencia de nucletidos de un ADN,
conocida como secuenciacin de dicho
cido nuclico.
Se ha conseguido gracias a las enzimas
de restriccin y a la posibilidad de
obtener numerosas copias de un cido
nuclico por clonacin.
TECNICA DEL DIDESOXI
Se denomina as
por ser necesarios
los di-
desoxirribonucleti
dos
Los cuales han
perdido su grupo
alcohol OH del
carbono 3'.
TECNICA DEL
DIDESOXI
Como los nucletidos se
unen por este grupo OH
del carbono 3', hay que
pensar que si nos
encontramos con un
didesoxinucletido ser
imposible que se una otro
nucletido y la cadena
terminar aqu. (Es
necesario tener esto
presente para comprender
la tcnica del didesoxi)
REACCION EN CADENA DE
LA POLIMERASA
Permite duplicar un nmero ilimitado de veces
un fragmento de ADN en un tubo de ensayo.
Se pueden generar millones de molculas
idnticas, a partir de una molcula de ADN. En
en unas pocas horas. La reaccin es muy sencilla,
necesita cantidades de ADN muy pequeas y slo
se precisa un tubo de ensayo, algunos reactivos,
una fuente de calor y unas pequeas cadena de
nucletidos que actan como cebadores.
REACCION EN CADENA DE LA POLIMERASA
La reaccin es un proceso cclico:
REACCION EN CADENA DE LA POLIMERASA
En esta animacin puede verse simplificado el proceso.
APLICACIONES DE LA PCR
1. Secuenciacin
Genera suficiente cantidad de ADN molde para su secuenciacin. Es
mucho mas sencillo y rpido que la clonacin en clulas.
2. Estudios evolutivos
Con la amplificacin genes de organismos ya extinguidos, como del
mamut, o restos antiguos humanos, se pueden comparar estos genes
con los genes semejantes de organismos actuales y poder reconstruir
rboles filogenticos. El PCR tambin se ha utilizado para conseguir el
mapa del genoma humano.
3. Huellas dactilares del ADN.
Es posible comparar muestras diferentes de ADN para comprobar si
pertenecen al mismo individuo o no, o si existe parentesco entre ellas.
Se aplica en Medicina forense e investigaciones policiales, con el fin de
identificar individuos a partir de muestras biolgicas, como sangre,
semen, piel o cabellos. Tambin se utiliza en las pruebas de paternidad.
APLICACIONES
MEDICAS
DE LA INGENIERIA
GENETICA
OBTENCIN DE VACUNAS
RECOMBINANTES
El sistema tradicional de obtencin de
vacunas a partir de microorganismos
patgenos inactivos, puede comportar un
riesgo potencial.
Muchas vacunas, como la de la hepatitis
B, se obtienen actualmente por ingeniera
gentica. Como la mayora de los factores
antignicos son protenas lo que se hace
es clonar el gen de la protena
correspondiente.
DIAGNTICO DE ENFERMEDADES DE
ORIGEN GENTICO
Conociendo la secuencia de
nucletidos de un gen
responsable de una cierta
anomala, se puede diagnosticar
si este gen anmalo est
presente en un determinado
individuo. En el siguiente dibujo
se explica brevemente la base
del diagnstico
TERAPIA
GENETICA
La terapia gnica consiste en la aportacin de un gen
funcionante a las clulas que carecen de esta
funcin, con el fin de corregir una alteracin
gentica o enfermedad adquirida. La terapia gnica
se divide en dos categoras.
1. Alteracin de clulas germinales (espermatozoides
u vulos), lo que origina un cambio permanente de
todo el organismo y generaciones posteriores. Esta
terapia no se utiliza en seres humanos por
cuestiones ticas.
2.Terapia somtica celular. Uno o ms tejidos son
sometidos a la adicin de uno o ms genes
teraputicos, mediante tratamiento directo o previa
extirpacin del tejido. Esta tcnica se ha utilizado
para el tratamiento de cnceres o enfermedades
sanguneas, hepticas o pulmonares.
TRANSGENESIS EN
ANIMALES
La transgnesis es la introduccin de ADN
extrao en un genoma, que sea estable y
se herede y afecte a todas las clulas en
los organismos multicelulares.
MAPAS FISICOS
HASTA LA PRXIMA