MTODOS DE CALIBRADO

En muchos tipos de anlisis qumico se mide la respuesta del

procedimiento analtico a cantidades conocidas de analito, y
basndose en ellas se puede interpretar la respuesta de una
muestra de contenido desconocido

MTODO PATRN EXTERNO

Comparacin de las seales de la muestra con un conjunto de

seales que ofrecen individualmente "muestras de calibracin",
(disoluciones patrn)
Estndares de diferente concentracin del analito que han sido preparados
artificialmente para que su matriz sea semejante a la de la muestra real.
No deben usarse estndares puros, puede conducir a errores
sistemticos importantes.
Se someten al proceso analtico las muestras de calibracin y la
muestra problema de forma independiente.
El conjunto de las seales de calibrado permite establecer una
relacin inequvoca entre la seal y la concentracin de analito, que
comnmente se denomina "recta de calibrado" y que idealmente es
una relacin lineal seal-concentracin en el intervalo dado de
concentraciones.
La concentracin de analito en la muestra se consigue por
interpolacin

REGRESIN LINEAL SENCILLA O DE REGRESIN POR MNIMOS

CUADRADOS

Proporciona una relacin lineal entre la cantidad de analito (x) y la

magnitud de la variable medida (y) que incluye a la mayora de los
puntos
Los errores en los valores de y son mayores que los errores en los
valores de x
Las desviaciones estndar en los valores de y son similares
Desviacin vertical (residual) = di
La mejor lnea recta ser la que sePueden ser + o -, por ello usamos
dedi las
2
obtiene por minimizacin
di = yi y = yi (m xi + b)
desviaciones verticales entre los puntos ydla
i =lnea
2
(yi y)
(la =distancia
2
(yi m xentre
i - b) los
2

puntos experimentales y la recta sean mnimas para todos y cada uno de los
 Y
Y

x iy i

C C
Ecuacin de la recta: y = m x + b

m = pendiente = y
xy (x y)/N
m= x
b = ordenada en el origen cuando x = 0
x2 (x)2 /N

b=ymx
Si la relacin entre seal y concentracin no es lineal, puede
resultar complejo encontrar la funcin de calibracin
correspondiente. Es ms practico reducir el margen de aplicacin
del procedimiento analtico al rango de concentraciones en el que
existe linealidad.
Coeficiente de correlacin
Se emplea como una medida de la correlacin entre dos variables
Indica si la minimizacin que se ha llevado a cabo es correcta.
Ello indicar que existe el mismo n de puntos por arriba y por debajo de
la recta y
r = 1,000 o muy prximo a dicho valor

Curva de calibracin Siempre debe grafic

2 ADICIONES PATRN (ADICIN ESTNDAR)

El mtodo de la adicin estndar es aconsejable cuando se quiere

asegurar la correcta similitud entre el comportamiento de patrones y
el problemas.

En las muestras complejas o con matrices difcilmente

reproducibles en los patrones (alimentos, muestras biolgicas o
medio ambientales) es aconsejable el uso de la adicin estndar.
Son mtodos para estandarizar y analizar dentro de la propia matriz
de la muestra (calibracin metodolgica "in situ").

PROCEDIMIENTO

-Consiste en preparar los patrones con la misma muestra a analizar y

aadir una cantidad conocida de la especie qumica a determinar.

-A n alcuotas de disoluciones de calibracin con concentraciones

crecientes se la aaden la misma cantidad de muestra.
Todas las disoluciones contienen una concentracin de analito que es la
suma de la original de la muestra (se busca) y la aadida

-Se someten las n alcuotas de muestras reales enriquecidas al proceso

analtico, obtenindose una seal para cada alcuota.
-Se representan las seales en funcin de la concentracin del estndar
aadido. Se obtendr una recta de calibrado paralela a la que se obtendra
con los estndares sin adicin de muestra

-La seal sobre el eje de ordenadas es la que origina la muestra no

enriquecida.

-La concentracin de analito en al muestra se obtiene por extrapolacin de la

recta de calibrado, su cruce con la prolongacin del eje de abscisas
proporciona el dato buscado.

Y Siendo C= Cx + Cs

Concentracin del patrn

adicionado

Concentracin del problema

Cs Y
Yx = Seal debida al problema
Cx
Ys = Seal debida al patrn
3 MTODO DEL ESTNDAR INTERNO

OBJETIVO: -minimizar fluctuaciones instrumentales

-establecer referencias con fines cualitativos y
cuantitativos.

Se utiliza un estndar o patrn interno (I) diferente al empleado en

la calibracin convencional. El patrn interno es una cantidad conocida
de un compuesto o elemento, no presente en la matriz de la muestra, que
se adiciona tanto a los estndares como a la muestra problema

PROCEDIMIENTO

Supongamos una muestra que contiene el analito X que queremos

determinar, el procedimiento consiste en preparar:

1.- Mezclas conocidas del patrn interno (I) y de los patrones del
analito/os a determinar (X) para construir una curva patrn.

2.- Cuando una cantidad conocida de patrn se agrega a una muestra

problema, la curva de calibrado puede utilizarse para hallar la
concentracin del problema.
3.-Las fluctuaciones en la seal afectan por igual al analito y al patrn
pero no a la relacin.

Seal debida X
Seal debida I Y I

Concentracin X
Concentracin I

Caractersticas del patrn interno

-compatibilidad (p.e. solubilidad) con la muestra y el patrn
-caractersticas qumicas y fisico-qumicas similares al
analito
-respuesta discriminada respecto del analito