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Microorganismos y Patogenicidad I:

BACTERIAS
T.M. Adolfo Ros Alcorta

BACTERIAS

Bacterias
Tamao: 0.3 - 5 m,

Formas:
Cocos (redondeadas):

Diplococos (duplete)
Streptococos (cadena)
Staphylococos (racimo)

Baciliformes (Filamentosas)
Espirilos (Espiraladas)
Vibrios (Curvas)
Micoplasmas
Chlamydias
Rickettsias

Genoma: Doble hlice de DNA circular libre


en el citoplasma,

Carecen de ncleo.

Plasmidios:
esenciales

Estructuras

genticas

no

Bacterias
Membrana citoplasmtica:
Permeasas
Enzimas de sntesis de pared
celular,
Protenas sensoras
Protenas de secrecin
Enzimas
de
la
cadena
respiratoria (bacterias aerobias),
Pared celular: Murena
Gramnegativas
Grampositivas

BACTERIAS

Componentes Bacterianos
Nucleoide:

Madeja de DNA de doble hebra no


rodeada por membrana
Localizacin citoplasmtica

Aspecto: Molcula de DNA circular

Escherichia coli: 4.63x106 pb; codifican


4288 protenas distintas

Plsmidos:

DNA circular enrollado no esenciales


Tamao: 100-1000 veces ms pequeas
que nucleoides
Se reproducen autnomamente

Portan genes de resistencia y virulencia

Componentes Bacterianos
Citoplasma:
Solutos de alto y bajo peso molecular
(Glicgeno, metafosfatos polimerizados,
lpidos y otros metabolitos)
RNA
~20000 ribosomas70s/ clula: 2500
KDa
Subunidad menor 30s: ~900 Kda; tRNA
16s (1540 nucletidos + ~21 protenas)
Subunidad mayor 50s: 1600 Kda; 1
fragmento 5s (120 nucletidos) + 1
fragmento 22s (2900 nucletidos) + 34
protenas
Funcin: Sntesis proteica

Membrana
fosfolipdica
numerosas

citoplasmtica:
Bicapa
con protenas integrales

Permeasas: Transporte activo de nutrientes


contra gradiente de concentracin
Protenas de secrecin: Mecanismos de
virulencia
Protenas seal: Activan modulacin
funcional por transferencia de informacin
a protenas reguladoras
Bacterias aerbicas: Enzimas de la cadena
respiratoria
Gram positivas presentan mesosomas
unidos a membrana: artefactos de
tcnica?

Pared Celular
Proteccin contra noxas externas
Mantencin gradiente osmtica
entre ambiente intracelular y
medio
externo
(presiones
internas 500-2000 kPa)
Define forma celular externa
Facilita comunicacin con entorno
Murena:
Peptidoglicanos
en
red
polimrica de polisacridos
Encadenados
por
pptidos
entrecruzados (sculos)

cidos Teicoicos:

Activacin complemento
Secrecin macrofgica de citokinas

Protena A

Factor de acoplamiento
Protena de unin a fibronectina
(Staphylococcus aureus)
Protena M (Streptococcus pyogenes)

Zonas de anclaje:

Unin covalente componentes peptdicos

Protenas
asociadas
Determinantes patgenos

Adherencia especfica
Proteccin contra fagocitos).

pared:

Gram positivas:
Sculos de murena: 40 capas; 15-80 nm de
grosor; 30% masa seca pared celular
cidos lipoteicoicos (membrana):
membrana citoplasmtica

Anclaje

cidos teicoicos (pared): Acoplamiento covalente a


murena
Funcin cido teicoico:

Regulacin actividad autolisinas (crecimiento y


fisin transversa)

Gram negativas:
Pared celular: 2 nm espesor; 10% masa seca
Membrana externa:

Protenas y lipopolisacridos de relevancia clnica

Tincin de Gram
Tincin
diferencial
para
visualizacin de bacterias
Colorantes utilizados:
Cristal violeta (azul-violeta):
Gram positivas
Safranina o fucsina bsica
(rosado): Gram Negativas

Bacterias
Gram negativos:
Membrana externa porosa
Cara externa: lipopolisacridos
responsables de la patognesis
infecciosa
Gram positivos:
No tienen membrana externa
Patogenicidad:
Gruesa pared celular de
murena
cido teicoico
Protenas asociadas a pared

Bacterias
Cpsulas polisacridas: Proteccin contra
fagocitosis
Pilli de unin o fimbria: Adhesin a
hospederos
Bacterias mviles: Flagelos
Biopelcula bacteriana: Infecciones por
cuerpos extraos
Se deposita en superficies inertes
Esporas bacterianas: Formas quiescentes
altamente resistentes a noxas fsicas y
qumicas
Reconocimiento:

Microscopa de contraste de fases (s/teir)


Microscopa ptica (tincin)
MET/MEB

Grampositivas
Gruesa
cubierta
(Peptidoglicano)

de

Murena

2 Clases de cidos teicoicos:


cido Lipoteicoico:

Superficial
Empotrado en la capa de
peptidoglicano
Unido a la membrana citoplsmica

cido teicoico:

Pared superficial superficie


Se une slo a la capa
peptidoglicano

Responsable
del
antignico bacteriano

de

determinante

Gramnegativas
Capa delgada de Mureina unida a
una membrana
exterior por
lipoprotenas
Membrana exterior:
Protena
+
lipopolisacrido.

fosfolpido

Lipopolisacrido:

Lpido A:

Porcin lipdica embebida en el


fosfolpido

Txico

Antgeno
superficial

Lpido A
Endotoxina

O:

Polisacrido

Antgeno

O:

Gramnegativas
Porinas: Poros de la pared celular
Transporte de substancias de
bajo peso molecular
Espacio periplsmico:
Entre membrana citoplsmica
y pared celular
Enzimas hidrolticas
Enzimas inactivadoras
de antibiticos
Protenas de transporte

Protenas de membrana externa:

OmpA: Protena de membrana externa A

Forma puente entre membrana externa y murena

Porinas:

Paso sustancias hidroflicas de bajo


molecular en el espacio periplsmico

Protenas asociadas a membrana externa:

Unin a receptores de hospederos

Omps: Protenas de transporte

LamB (maltosa)
FepA (enteroquelina, siderforo frrico)

Lipopolisacridos (LPS): Endotoxinas

Lipoide A
Polisacridos de ncleo
Cadena polisacrido O- especfica

peso

Lipoide A o Lpido A: Toxicidad (libre o


complejo lipopolisacrido)
LBP:
Protena
Lipopolisacrido

de

unin

Lpido A + LBP:

Activacin
citokinas

Sntomas clnicos de endotoxinas

CD14

(M),

Interleukina 1 (IL-1) /
Necrosis Tumoral (TNF):

Produccin

Factor

de

Aumentan sntesis de Prostaglandina


E2 (PG-E2) hipotalmica

Estado
febril:
Alteracin
termorregulador superior

centro

Otros efectos:

Granulopoyesis
Agregacin y degeneracin tromboctica
Coagulacin intravascular (factor de
activacin VII)
Descenso presin sangunea
Caquexia (compromiso del estado
general)

LPS activan Complemento


Altas [endotoxinas]: Shock sptico o
endotxico
Esterilizacin con vapor no inactiva
endotoxinas
Frmacos
parenterales
se
deben
preparar en material pirgeno o libre de
endotoxinas

Antgeno O: Cadena polisacrida


especfica-O
Tipificacin bacteriana: Variabilidad
antignica
L-formas (Instituto Lister):
Bacterias con defectos de murena
(efectos de betalactmicos)
Muy inestables bajo influencia de la
osmosis
Resistentes
a
betalactmicos
(frmacos
bloqueadores
de
la
biosntesis de murena)
Reversibles a formas normales tras
discontinuar
antibioterapia
betalactmica

Cpsula:
Polmero sintetizado por enzimas
bacterianas extracelulares
Ubicacin externa
Composicin: Polisacridos
Clasificacin en serovares o
serotipos dentro de 1 especie
segn composicin qumica

Flagelo: Movilidad bacteriana


Composicin: Flagelinas (protenas
lineales)
Distribucin flagelos:
Monotricos
Lophotricos
Peritricos

Cuerpos basales atraviesan pared


celular y membrana citoplasmtica
anclando el flagelo (propulsin por
giro sobre su eje)
Antgenos H: Antgenos flagelares
de enterobacteriaceas
Junto a antgenos O determinan
serotipificacin bacteriana

Pili de unin (Fimbria)


Pili de Conjugacin
Pili de Unin:
Microfibrillas proteicas
0.1-1.5 nm (grosor) x 4.8 nm de
longitud en Gram (-)

Anclaje a membrana externa de


la pared celular y se extienden
radialmente desde la superficie
Unin
especfica
receptor

ligando-

Intercambio
interbacterias

gentico

Pili de unin (Fimbria)


Pili de Conjugacin
PAP o
pili P: Pili asociado a
Pielonefritis
E. coli Uropatognica (UPEC): Unin
a receptor urotelial y antgeno de
grupo sanguneo P
Infecciones urinarias espontneas en
pacientes no obstruidos
CFA1
y
CFA2:
Colonizacin

Factores

de

Unin especfica de enteropatgenos


a mucosa colnica
Pili de unin gonoccica: Facilita
unin de gonococos a urotelio

Biopelcula Bacteriana
Comunidad bacteriana incluida
en una matriz polimrica
autosecretada que se une a
una superficie interte o a tejido
vivo
Espesor: Varios milmetros
Zona profunda:
Aislamiento bacteriano contra
Sistema inmune y antibiticos

Polmeros:
(glicoclix)

Glicsidos

Localizaciones

Implantes de prtesis
Catteres
Vlvulas
Marcapasos

Composicin:
Fibringeno
Fibronectina
Vitronectina
Laminina

Placa bacteriana: Sobre esmalte


dentario
Biopelculas de streptococcos sobre
vlvulas cardacas (endocarditis)

Endosporas o Esporas Bacterianas


Formas quiescentes o latentes
Desarrollo desde bacterias en estado
vegetativo (sin asimilacin de nutrientes
externos)
Aspecto: Esfricas u ovaladas
Pared de espora gruesa:

Gran resistencia a qumicos y noxas fsicas


Condiciones son adversas.

Patgenos humanos: Clostridium y Bacillus


Termorresistente:

Altas temperaturas en procedimientos de


esterilizacin por calor

Factores potenciales de resistencia a temperatura


Estructuras de su gruesa pared celular
Deshidratacin de la espora
Entrecruzamiento de las protenas por
sales de piridina-2,6-dicarboxilato de calcio

Dificulta denaturacin proteica

Condiciones favorables:

Medio nutritivo
Temperatura
Presin osmtica
pH
PCO2
HRA (Humedad Relativa)

Retorno a estado vegetativo: Reproduccin

Metabolismo
Reacciones
bacterianas:

metablicas

Interaccin con hospedero

Vas anablicas o sintticas de


consumo energtico
Catabolismo generador de energa
Bacterias foto o quimiosintticas
Patgenos humanos:

Quimiosintticos
Organotrficos
Quimioorganotrofos

Metabolismo
Vas catablicas:
Digestin:
Exoenzimas
bacterianas quimiotcticas
Obtencin
nutrientes
degradados
a
molculas
pequeas extracelulares

Captacin:
Permeasas
membrana citoplasmtica

de

Difusin pasiva o transporte


activo transmembrana

Preparacin para la oxidacin:


Corta grupos carboxilo o amino
Fosforilacin
Otros pasos

Oxidacin:
Remocin
electrones
hidrogeniones
Entrega Hidrgeno a aceptor

Respiracin:
Oxgeno: Aceptor de hidrgenos
Respiracin
anaerbica:
Oxgeno
parte
de
sales
inorgnicas

Fermentacin:
Compuesto
orgnico aceptor de hidrgenos
Energa generada:
Fermentacin < Respiracin

Tipos de fermentacin:
Alcohlica
Lctica
Butrica

Almacenamiento Energa liberada:


Tiosteres (acetil-Co A)
Fosfatos orgnicos (ATP, FAD,
NAD, FADH, NADH)

Aplicaciones:
Industria
veterinaria

alimentaria

Vas de uso del oxgeno:


Transferencia de 4 electrones a
oxgeno resultando en 2 iones
oxgeno 2 O2-.
Transferencia de 2 electrones a
oxgeno resultando en 1 anin
perxido 1 O22-.
Transferencia de 1 electrn a
oxgeno resultando en 1 anin
superxido 1 O2-.

Requerimiento de oxgeno:

Anaerobias facultativas: Pueden


oxidar nutrientes por respiracin y
fermentacin
Aerobias estrictas: Solamente se
reproducen en presencia de oxgeno
Anaerobias estrictas: Mueren en
presencia
de
oxgeno,
su
metabolismo est adaptado a bajo
potencial RedOx y las enzimas
vitales son inhibidas por oxgeno
Anaerobias
aerotolerantes:
Oxidan nutrientes sin usar oxgeno,
aunque pueden sobrevivir en
presencia de l.

Fases
del
Crecimiento
Bacteriano:

i) Fase de latencia o de
adaptacin: Crecimiento inicial

Cantidad de bacterias estable


Metabolismo acelerado
Formacin intermediarios
Acumulacin RNA

ii)
Fase
exponencial:
ascendente

logartmica
o
Crecimiento

Multiplicacin poblacional
En esta fase se calcula el tiempo
de generacin

iii) Fase estacionaria mxima: Meseta de la


grfica

Cese de la multiplicacin en cantidad de la


colonia
Breve Equilibrio entre bacterias viables y
bacterias inactivadas
Agotamiento de nutrientes
Acumulacin detritus
Acidificacin pH
Ambiente nocivo,
resistentes

sobreviven

las

ms

iv) Fase de declinacin o muerte logartmica:

Diagonal
descendente,
muerte
supervivencia y multiplicacin

Se reproducen slo las ms resistentes

Condicionantes::
falta
de
nutrientes,
concentracin critica de productos txicos
del metabolismo y viraje del pH.

>

Importancia del genoma en la


infeccin bacteriana:
1 cromosoma circular nico
Genes codificantes:
Componentes estructurales
Enzimas
Plsmidos
(informacin
adaptativa)
Plsmidos
de
virulencia
(enterotoxinas, hemolisina)
Plsmidos
de
resistencia
(contra
agentes
antiinfecciosos)

Transformacin bacteriana:
Cambios ambientales
Incorporacin genes por accin
de bacterifagos

Conjugacin bacteriana:
Intercambio
informacin
gentica
Aumento probabilidades de
supervivencia de colonias

BACTERIAS

VIRUS

COMPARACIN ENTRE MICROORGANISMOS PROCARIONTES Y EUCARIONTES


CARACTERSTI
CAS

PROCARIONTES

EUCARIONTES

Estructura
Complejo de DNA y protenas
Nuclear
DNA circular no cubierto de protenas
bsicas (histonas)
Localizacin de Red densa de DNA citoplasmtica, carece
la estructura
de membrana nuclear; tiene nucleoide o Dentro de un ncleo envuelto
nuclear
equivalente nuclear
por una membrana nuclear
DNA

Nucleoide y plsmidos

En ncleos y mitocondrias

Citoplasma

Sin mitocondrias ni retculo endoplsmico,


tiene ribosomas 70S

Pared Celular

Generalmente rgida con una capa de


murena, excepto los micoplasmas

Poseen mitocondrias y RE,


ribosomas 80S
Presente slo en hongos:
glicanos, mananos, quitina,
quitosano, celulosa

Asexual por fisin binaria transversa

Sexuada en la mayora de los


casos, posiblemente asexual

Reproduccin

Teora Celular
La clula es la unidad estructural y funcional
de la vida
Todos los seres vivos estn formado por
clulas
Toda clula proviene de otra

Teora Celular
Theodor Schwann (histlogo y fisilogo alemn) y
Matthias Schleiden (botnico alemn): 1er y 2 ppos.
"Todo en los seres vivos est formado por clulas o
productos secretados por las clulas
"La clula es la unidad bsica de organizacin de la
vida

Rudolf Virchow (mdico, patlogo): 3er ppo


'"Toda clula se ha originado a partir de otra clula, por
divisin de sta". (Omnia celula ex celula", Virchow 1855)

Principios de la Teora Celular


Todos los seres vivos estn formados por clulas o por sus
productos de secrecin.
La clula es la unidad estructural de la materia viva, y una clula
puede ser suficiente para constituir un organismo.
Todas las clulas proceden de clulas preexistentes, por la
divisin de stas.
Es la unidad de origen de todos los seres vivos.
Las funciones vitales de los organismos ocurren dentro de las
clulas, o en su entorno inmediato, controladas por sustancias que
ellas segregan.

Principios de la Teora Celular


Cada clula es un sistema abierto, que intercambia materia y
energa con su medio.
En una clula caben todas las funciones vitales, de manera que
basta una clula para tener un ser vivo.
La clula es la unidad fisiolgica de la vida.
Cada clula contiene toda la informacin hereditaria necesaria
para el control de su propio ciclo y del desarrollo y el
funcionamiento de un organismo de su especie, as como para la
transmisin de esa informacin a la siguiente generacin celular.
La clula tambin es la unidad gentica.

Dogma Central
Biologa Celular (1 gen= 1 protena?)

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