TCNICAS DE SEPARACIN

CONTENIDOS
1.

Conceptos fundamentales

2.

Fundamento de algunas tcnicas de separacin: destilacin,

precipitacin, extraccin y cromatografa

3.

Clasificaciones de las tcnicas de separacin

1. Conceptos fundamentales

Determinacin individual de una especie qumica

ETAPA DE SEPARACIN EN EL MTODO DE ANLISIS

Qu es una separacin?

A, B

A(C0), B(C0)

A, B

A, B

A(C1), B(C1)

C2>C0>C1

A(C2), B(C2)
3

1. Conceptos fundamentales

TCNICA DE SEPARACIN

pre
m
e
i
s

av

ece

Proceso fsico

Proceso qumico

Ej: Extraccin lquido-lquido para extraer el pentaclorofenol contenido en

una alcuota de vino en pentano.
1: Proceso qumico: reaccin de derivatizacin
C6Cl5-OH + (CH3-CO)2O C6Cl5-O-CO-CH3 + CH3-COOH
2: Proceso fsico: transferencia del producto derivado
a la fase orgnica
Segunda fase: pentano (menos densa que la fase inicial)
Fase inicial: alcuota de muestra
Fig.1

1. Conceptos fundamentales

Cundo es necesario aplicar una tcnica de separacin?

Eliminacin de
interferencias

Incremento de
la concentracin
del analito

Incremento de la
selectividad

Incremento de la
sensibilidad

Eliminacin de interferencias
e incremento de la
concentracin del analito

Incremento de la
selectividad y la sensibilidad

2. Fundamento de algunas tcnicas de separacin

SEPARACIONES POR DESTILACIN

APLICACIN PRINCIPAL
Compuestos orgnicos

Termmetro

Cabeza de
destilacin

Columna de
fraccionamiento

Si sus Tebullicin difieren

entre 60 y 80 C

Co
n

Si sus Tebullicin difieren

entre 30 y 60 C

ns
ad

or

Refrigerante

Fase inicial

DESTILACIN
SIMPLE

de

Destilado

DESTILACIN
FRACCIONADA
Fig.1

2. Fundamento de algunas tcnicas de separacin

SEPARACIONES POR PRECIPITACIN

APLICACIN PRINCIPAL
Compuestos inorgnicos

Reactivos inorgnicos
Reactivos orgnicos: Mayor selectividad

SEPARACIONES POR EXTRACCIN LQUIDO-LQUIDO

Coeficiente de reparto
Fase
lquida 2
Fase
lquida 1
Fig.1

S (en la fase 1) S (en la fase 2)

[ S ]2
K
[ S ]1
7

2. Fundamento de algunas tcnicas de separacin

Concentracin remanente de soluto en la fase inicial tras i etapas de

extraccin con un disolvente orgnico.
Si llamamos 1 a la fase inicial y 2 a la segunda fase:
i

V1
[ S ]1
[ S ]1,0
V1 V2 K

[S]1,0= Concentracin de soluto en

la fase inicial antes de llevar a cabo
la separacin
V1= volumen de fase inicial
V2= volumen de la segunda fase

S + S

2. Fundamento de algunas tcnicas de separacin

SEPARACIONES CROMATOGRFICAS
Fase
estacionaria

Fase mvil

Fase
estacionaria

B
A

Fase
mvil

CROMATOGRAFA
PLANA
CROMATOGRAFA
EN COLUMNA
9

2. Fundamento de algunas tcnicas de separacin

ELECTROFORESIS CAPILAR
Capilar de slice fundida

Detector

Electrolito
de fondo

Fuente de
alimentacin

10

3. Clasificacin de las tcnicas de separacin

DESDE EL PUNTO DE VISTA QUMICO-ANALTICO:

1er Grupo: Separacin y deteccin discontinuas
2 Grupo: Separacin y deteccin continuas
DESDE EL PUNTO DE VISTA DE COMO SE OBSERVE EL PROCESO:
A. Criterios estticos:
A.1. Segn la naturaleza de las fases implicadas
A.2. Segn el origen de la 2 fase

B. Criterios dinmicos:
B.1. Segn el contacto entre las fases
B.2. Segn el flujo relativo entre las fases
11

3. Clasificacin de las tcnicas de separacin

A.1. SEGN LA NATURALEZA DE LAS FASES IMPLICADAS:

FASES

Tcnica

Esquema de la separacin

S-L

Precipitacin

(A + B)L + Reactivo precipitante AS + BL

Lixiviacin

(A + B)S + Disolvente AS + BL

Cromatografa lquida de adsorcin

(A + B)L + Slido AS + BL

Cromatografa de intercambio inico

(A + B)L + Resina AS + BL

Cromatografa de exclusin

(A + B)L + Gel poroso AS + BL

S-G

Cromatografa gas-slido

(A + B)G + Slido AS + BG

Sublimacin

(A + B)S [ + Calor] AS + BG

L-L

Extraccin lquido-lquido

(A + B)L1 + Lquido-2 AL1 + BL2

Cromatografa lquida de reparto

(A + B)L1 + Soporte (Lquido-2) AL1 + BL2

Destilacin

(A + B)L [+ Calor] AL + BG

Cromatografa gas-lquido

(A + B)G + Lquido AL + BG

L-G

L=lquido; S=slido; G=gas

12

3. Clasificacin de las tcnicas de separacin

A.2. SEGN EL ORIGEN DE LA SEGUNDA FASE

Directamente: provocacin in situ de un fenmeno que provoque la aparicin de la 2 fase.
Precipitacin

fenmeno qumico
2 fase: Slido amarillo

Fase inicial
(Disolucin
Incolora)

Pb(NO3)2 + KI PbI2 + KNO3

Reactivo precipitante
(Disolucin incolora)

Fig.2
Fig.1

Destilacin

fenmeno fsico

El aumento de temperatura provoca

la aparicin de la 2 fase (gas)
13

3. Clasificacin de las tcnicas de separacin

Indirectamente: la 2 fase es una fase externa al sistema inicial que es incorporada.

Segunda fase

Cromatografa lquido-slido

Flujo de fase mvil

Extraccin lquido-lquido

Especie ms retenida
por la fase estacionaria

Fase inicial
Especie menos retenida
por la fase estacionaria

Fig.1

14

3. Clasificacin de las tcnicas de separacin

B.1. SEGN EL TIPO DE CONTACTO ENTRE LAS FASES

a. A travs de una interfase
bien definida
Cromatografa de adsorcin
en columna
Partculas
de fase
estacionaria

b. En el seno de la fase inicial

Extraccin lquido-lquido
Agitacin
vigorosa

Fig.1

15

3. Clasificacin de las tcnicas de separacin

B.2. SEGN EL FLUJO RELATIVO ENTRE LAS FASES

D=

Concentracin de soluto en la 2 fase

Concentracin de soluto en la fase inicial

0 < D < +
Supongamos (A + B)fi Afi + Bf2

Coeficiente de distribucin

fi: fase inicial; f2: segunda fase

Separacin simple: DA ~ 0 y DB es muy alto

Separacin repetitiva: DA~ 0 y DB no es muy alto
Separacin mltiple: DA~ 0 y DB es bajo,
DA y DB son significativos

16

3. Clasificacin de las tcnicas de separacin

A+B

Separacin
simple

A+B
A

Separacin
mltiple

Separacin
repetitiva

+ B

Fase inicial y 2 fase se

ponen en contacto infinitas veces
Cmo?
Flujo de
fase 2

A+B

Fase
inmvil

+ B

Flujo de
fase mvil

+ B
B

17

Flujo de
fase 1

INTRODUCCIN A LAS
SEPARACIONES CROMATOGRFICAS

18

CONTENIDOS

1.

Fundamentos

2.

Clasificacin

3.

El proceso cromatogrfico

4.

Parmetros fundamentales

5.

Aplicaciones de la cromatografa

19

1. Fundamentos

1903: us columnas de adsorcin para separar

pigmentos vegetales
Fase
Pigmentos

mvil

vegetales
Fig.1

Tswett (1872-1919)

Fase
estacionaria

Chroma: color
CROMATOGRAFA

Graphein: escribir

20

2. Clasificacin

2A. Segn la disposicin de la fase estacionaria:

Cromatografa plana:
Cromatografa en capa fina
Cromatografa en papel

Cromatografa en columna
Cromatografa de lquidos
Cromatografa de gases
Cromatografa de fluidos supercrticos

21

2. Clasificacin

CROMATOGRAFA PLANA
Papel

Cromatografa en papel

Fase estacionaria
Cromatografa

Adsorbente sobre soporte

Gel de slice, poliamida.

en capa fina

Lmina de vidrio, de plstico o

Tapadera

metlica

METODOLOGA DE TRABAJO
Papel

Frente de
fase mvil

Fase
mvil

Fig.1

22

2. Clasificacin

Fase
mvil

Fase
estacionaria

CROMATOGRAFA EN COLUMNA
Muestra
(A+B)

23

2. Clasificacin

2B. Segn el tipo de fase mvil:

Cromatografa de lquidos (LC)

En columna o en superficie plana

Cromatografa de gases (GC)

En columna

Cromatografa de fluidos supercrticos (SFC)

24

2. Clasificacin

CLASIFICACIN DE LOS MTODOS CROMATOGRFICOS EN COLUMNA

Mtodo

Tcnica

Fase estacionaria

Tipo de equilibrio

LC

Reparto

Lquido adsorbido sobre un slido

Distribucin entre lquidos

inmiscibles

Adsorcin

Slido

Adsorcin

Intercambio inico

Resina de Intercambio Inico

Intercambio inico

Exclusin por
tamaos

Lquido en intersticios de un slido

polimrico

Distribucin/Exclusin

Gas-lquido

Lquido adsorbido sobre un slido

Distribucin entre gas y lquido

Gas-slido

Slido

Adsorcin

Especies orgnicas enlazadas a

superficie slida

Distribucin entre fluido

supercrtico y superficie
enlazada

GC

SFC

25

3. El proceso cromatogrfico
Muestra
(A+B)

Fase
mvil

Fase
estacionaria

Seal analtica

Detector

Tiempo, min

t0

t1

t2

t3

t4

t5

t6

A
B

t0

t1

t2

t3

t4

t5

t6

26

3. El proceso cromatogrfico

ENSANCHAMIENTO DE BANDAS
Columna
Comienzo

Fig.1

Perfil de concentracin

Fig.2

Tiempo
27

Respuesta del detector

4. Parmetros fundamentales

CH4

Octano

No
identificado

Nonano

Tiempo
Inyeccin

Fig.1

tr = tr - tm
28

4. Parmetros fundamentales

Factor de retencin (k)

t t
t
k r m r
tm
tm

k << 1: elucin demasiado rpida

k~ 20-30: elucin demasiado lenta
2 < k < 10: elucin ideal

Factor de selectividad ()

kB

kA

= 1: Los compuestos no estn separados

> 1: Los mximos de los picos cromatogrficos
estn separados

Volumen de retencin (Vr)

Vr tr ur

ur : caudal de la fase mvil

29

4. Parmetros fundamentales

ANCHURAS CARACTERSTICAS

wi
tr
Respuesta del detector

Punto de
inflexin

wh

t=0
Inyeccin

Tiempo

wi = 2
wh = 2,35
wb = 4

wb

Fig.1

wb = 2wi
wb = 1,7wh

30

4. Parmetros fundamentales

EFICACIA DE UNA COLUMNA: H, L

L
N
H
Martin y Synge

H
L

wb = 4

tR
N 16
wb

L
H

n compuestos en el cromatograma:

N
i 1

31

4. Parmetros fundamentales

Factor de resolucin (Rs)

Fig.1

Rs 1,5: separacin ideal

Rs=

wb,A + wb,B
2

1,5 > Rs > 1: separacin aceptable

Rs < 1: separacin inaceptable

32

4. Parmetros fundamentales

Resolucin
= 0,75
Seal

Seal

Resolucin
= 0,5

Seal

Seal

Resolucin
=1

Tiempo

Resolucin
= 1,5

Tiempo

F1

33

5. Aplicaciones de la cromatografa

ANLISIS CUALITATIVO

Seal analtica

Disolucin estndar
F1

CH4

Octano

Nonano

Decano

Tiempo

Seal analtica

Muestra

La muestra no contiene
metano ni octano.
Si los contiene ser a
concentraciones inferiores
a los correspondientes
lmites de deteccin

Octano Nonano? Decano?

CH4

Tiempo

Identificacin positiva: - Comparacin de datos de retencin

- Uso de detectores en lnea

34

5. Aplicaciones de la cromatografa

ANLISIS CUANTITATIVO
rea

Seal analtica

Altura, h

Fig.1
tm

tr

Tiempo

MTODOS DE ANLISIS CROMATOGRFICO CUANTITATIVO

1. Calibracin con patrones
Preparacin de disoluciones patrn
Obtencin de sus cromatogramas

35

5. Aplicaciones de la cromatografa

B. Mtodo del estndar interno

Se aade a disoluciones
patrn y a muestras

Seal analtica

Analito 1

Estndar
interno

Analito 2

Tiempo
Fig.1

36

CROMATOGRAFA LQUIDA
DE ALTA RESOLUCIN

37

CONTENIDOS

1.

Fundamentos

2.

Instrumentacin

3.

Optimizacin de la separacin cromatogrfica

4.

Aplicaciones

38

1. Fundamentos

Tcnica

L columna, cm

Dimetro de partcula, m

LC

50 500

150 200

HPLC

3 30

3 10

UPLC

Hasta 5

<2

LC: Liquid Chromatography

HPLC: High Performance Liquid Chromatography or
High Pressure Liquid Chromatography
UPLC: Ultra Performance Liquid Chromatography
39

1. Fundamentos

CLASIFICACIN DE LAS TCNICAS DE CROMATOGRAFA LQUIDA

Mtodo Tcnica

Fase estacionaria

Tipo de equilibrio

LC

Reparto

Lquido adsorbido sobre un

slido

Distribucin entre
lquidos inmiscibles

Reparto con fases

enlazadas

Especies orgnicas enlazadas

a una superficie slida

Distribucin entre
lquido y superficie
enlazada

Adsorcin

Slido

Adsorcin

Intercambio inico

Resina de Int. Inico

Intercambio inico

Exclusin por tamao Lquido en intersticios de un

slido polimrico

Distribucin/Exclusin

40

1. Fundamentos

LC DE INTERCAMBIO INICO

Flujo de fase mvil

- y + : Especies a separar

Intercambiador inico (aninico)

- ++ +
+ - -- + +
+- +
+
+
- +
+ + +-

Las especies con carga negativa se unen a la resina que est

cargada positivamente, quedando retenidas.
Las especies con carga positiva son repelidas por la resina
siendo eludas de la columna.

EQUILIBRIOS DE INTERCAMBIO
Intercambiador catinico:
xRSO3-H+ + Mx+ (RSO3-)xMx+ + xH+
slido

disolucin

slido

disolucin

Intercambiador aninico:
xRN(CH3)3+OH- + Ax- [RN(CH3)3+]xAx- + xOHslido

disolucin

slido

disolucin

41

1. Fundamentos

LC DE EXCLUSIN POR TAMAOS

Bolas de gel: fase estacionaria

Flujo de fase mvil

y : especies a separar

Las molculas ms pequeas penetran

en los intersticios o canales del gel,
viajando a menor velocidad

Las molculas ms grandes no pueden penetrar

en los canales del gel y por tanto viajan a mayor
velocidad.

42

2. Instrumentacin

COMPONENTES DE LA INSTRUMENTACIN
Depsitos de fase mvil

Bomba cromatogrfica

Sistema de inyeccin
Depsito
de residuos

Compartimento para la columna

cromatogrfica: Columna
Detector
Fig.1

43

2. Instrumentacin
Columna
cromatogrfica

Detector
fluorimtrico

Vlvula de
inyeccin

Fase mvil
Bomba
cromatogrfica

44

2. Instrumentacin

SISTEMA DE BOMBEO

Proporciona presiones superiores a 6000 psi

Salida de disolventes libres de impulsos
Velocidades de flujo habituales de 0,1 5 mL/min
Reproducibilidades de flujo de, al menos, 0,5%
(Ej. 2 mL min-1: 1,99 2,01 mL/min)

Resistencia a la corrosin

Fig.1

45

2. Instrumentacin

SISTEMA DE INYECCIN: - Muestreadores automticos

- Vlvulas de bucle de muestreo
Fig.1

Lazo o bucle de
inyeccin (5 500 L)

Salida hacia
la columna

Entrada de fase mvil

desde la bomba
Microjeringa

Orificio para inyeccin

mediante microjeringa

Palanca para
cambio de posicin

46

2. Instrumentacin
Microjeringa

Microjeringa

A
residuos

Hacia la
columna
Entrada de
fase mvil
Fig.1

POSICIN DE
CARGA

Lazo de
muestra
Entrada de
fase mvil

Hacia la
columna

POSICIN DE
INYECCIN
47

2. Instrumentacin

MUESTREADOR AUTOMTICO
Brazo de
inyeccin

Bandeja

Viales de
lavado

Viales de
muestras
48

2. Instrumentacin

COLUMNA CROMATOGRFICA
Entrada

Columnas: L=10-30 cm. D.I.= 4-10 mm.

Guardacolumna

Fritas de
titanio poroso

Rellenos de tamao de partcula: 5-10 m.

N/m= 40000-60000

Microcolumnas: L=3-7cm. D.I.=1-4 mm.

Carcasa de
alumnio
anodizado

Rellenos de tamao de partcula: 3-5 m.

N/m= 100000
Fig.2

Columna principal
(plstico)
Fig.1

Frita de titanio
poroso
Salida

49

2. Instrumentacin

Columnas de LC

COLUMNA

PRECOLUMNA

Flujo de
fase mvil

50

2. Instrumentacin

TERMOSTATIZACIN DE LA COLUMNA

Columna

Compartimento de termostatizacin
51

2. Instrumentacin

SISTEMAS DE DETECCIN

Algunos de los detectores comerciales ms usados

Detector

Lmite de deteccin
aproximado, ng

Intervalo de linealidad
en decenas

Absorbancia

0,1 1

3-4

Fluorescencia

0,001 0,01

Electroqumico

0,01 - 1

4-5

Conductividad

0,5 - 1

ndice de refraccin

100 - 1000

Espectrometra de
masas

0,1 - 1

52

2. Instrumentacin

ESQUEMAS BSICOS DE DETECTORES

ESPECTRMETRO DE ABSORCIN
VISIBLE-ULTRAVIOLETA
Salida de flujo
Entrada
de flujo

Fuente
de luz

ESPECTRMETRO DE MASAS
Fuente de
iones

Identificacin:
Espectros de masas

Detector

Detector
de iones

Analizador
de masas

Adquisicin
de datos

Abundancia

Fig.1

Fig.2
Entrada
de flujo

53

3. Optimizacin de la separacin cromatogrfica

Parmetros a considerar:

A. SELECCIN DEL TIPO DE LC

Aumento de la polaridad
Insoluble en agua

Soluble en agua

No polar

Peso molecular
Solubilidad
Polaridad
Estructura qumica

Inico
Polar no inico
Reparto

102
Adsorcin

(Reparto
en fase
reversa)

(Reparto
en fase
normal)

Intercambio
inico

Peso molecular

103

104
Exclusin

105

Fig.1
(En gel permeable)

(Filtracin en gel)

54
10

3. Optimizacin de la separacin cromatogrfica

B. SELECCIN DE LA FASE MVIL

Descartar los disolventes incompatibles por sus propiedades fsicas
Ajuste de la fuerza de los disolventes
Selectividad de los disolventes
Fase mvil ptima

55

3. Optimizacin de la separacin cromatogrfica

AJUSTE DE LA FUERZA DE LOS DISOLVENTES

Fig.1

Separacin de 8 compuestos
Fase mvil:
Mezclas agua (A)/acetonitrilo (B)
ELUCIN ISOCRTICA
56

3. Optimizacin de la separacin cromatogrfica

AJUSTE DE LA FUERZA DE LOS DISOLVENTES

ELUCIN EN GRADIENTE

Fig.1

57

3. Optimizacin de la separacin cromatogrfica

LC DE REPARTO
Tcnica

Fase
Fase
estacionaria mvil

Fase normal

polar

Fase reversa apolar

apolar

4>3>2>1

polar

1>2>3>4
Polaridad de los compuestos

Respuesta del detector

Fig.1

Inyeccin
Tiempo
58

4. Aplicaciones

LC DE REPARTO
Sulfonamidas en miel

Fase reversa.
Elucin en gradiente con mezcla
ACN:agua.

PAHs, pesticidas, sulfonamidas, vitaminas, drogas y sus metabolitos,

antibiticos, esteroides, analgsicos, colorantes, cidos grasos,
nucletidos .

59

4. Aplicaciones

LC DE ADSORCIN
ORDEN EN TIEMPO DE RETENCIN
Olefinas
Hidrocarburos aromticos
Haluros, sulfuros
teres
Nitrocompuestos
steres, aldehdos, cetonas
Alcoholes, aminas
Sulfonas
Sulfxidos
Amidas
cidos carboxlicos

60

4. Aplicaciones

LC DE INTERCAMBIO INICO
A

Anlisis y control de calidad de aguas

C

Fig.1

D
61

4. Aplicaciones

LC DE EXCLUSIN

Fig.1

62

CROMATOGRAFA DE GASES

63

CONTENIDOS

1.

Conceptos bsicos

2.

Instrumentacin

3.

Aplicaciones

64

1. Conceptos bsicos

Fase estacionaria

Tipo de equilibrio

Gas-lquido

Lquido adsorbido sobre

un slido

Distribucin entre
gas y lquido

Gas-slido

Slido

Adsorcin

Mtodo

Tcnica

GC

REQUISITOS DE LAS ESPECIES BAJO ANLISIS

Ser voltiles
Ser trmicamente estables

CAMPO DE APLICACIN LIMITADO A:

Compuestos orgnicos voltiles
Compuestos organometlicos voltiles

Fase mvil

GAS PORTADOR
65

2. Instrumentacin

COMPONENTES DE UN CROMATGRAFO DE GASES

Septum de
silicona

Entrada de
gas portador

Puerto de
inyeccin

Ordenador

Detector

Gas Portador
Sistema de
inyeccin

Columna

Horno y
columna

Horno
Fig.1

Detector
66

2. Instrumentacin

GAS PORTADOR
- Transporta los compuestos a travs de la columna.

- Debe ser qumicamente inerte, puro (99,99%) y seco.

- El ms empleado es He. Aunque tambin se usan H2 y
N2.
- Caudales comnmente empleados:
25 - 150 mL/min para columnas de relleno
0,5 - 4 mL/min para columnas capilares

67

Fig.1

2. Instrumentacin

SISTEMA DE INYECCIN
CON DIVISIN DE FLUJO

Hacia
venteo

Una fraccin de la muestra

inyectada va a residuos

Zona de evaporacin
de la muestra

Pared
metlica

Camisa de
vidrio silanizado

Cmara
de mezcla

Punto de
divisin

Inyeccin
Controlador
de flujo

Regulador
de presin

Columna
cromatogrfica

Fig.1
Entrada de
gas portador

SIN DIVISIN
DE FLUJO
El volumen total inyectado va a la columna.
El tubo de vidrio no tiene cmara de mezcla

Venteo

68

2. Instrumentacin

INYECCIN CON
DIVISIN DE FLUJO

Disolvente

INYECCIN SIN
DIVISIN DE FLUJO

Disolvente

Fig.1

Tiempo, min
69

2. Instrumentacin

COLUMNAS

TIPOS: - Columnas de relleno

- Columnas capilares
L de 10 a 75 m
Pared externa de la columna
D.I.
0,1 0,53 mm

Gas portador
Fig.1

Fig.2

Fase estacionaria
0,1 5 m espesor
Fase estacionaria
lquida

Slido soporte recubierto

con la fase estacionaria Fase estacionaria
slida
lquida

Fig.3

70
Pared de la columna

2. Instrumentacin

FASES
ESTACIONARIAS

Estructura

Polaridad

Intervalo de
temperatura, C

No polar
No polar
Polaridad
intermedia
Polaridad
intermedia
(Difenil)x(dimetil)1-x
polisiloxano

Polaridad intermedia

(Cianopropilfenil)0.14(dimetil)0.86
polisiloxano
Polaridad muy alta
Carbowax (poli(etilen glicol))

Polaridad muy alta

Fig.1

(Biscianopropil)0.9(cianopropilfenil)0.1
polisiloxano

71

2. Instrumentacin
Fig.1

HORNO

Control T de la columna = alta repetitividad en los tR

Separacin de 16 hidrocarburos (C5-C21)

Respuesta del detector

Separacin isoterma a 150 C

C5, C6 y C7 eluyen
antes que el disolvente
Tras 95 min, C16 a C21
todava no han eludo

Tiempo, min

Fig.2

72

2. Instrumentacin

PROGRAMA DE TEMPERATURA

Respuesta del detector

50 250 C a 8 C/min

Tiempo, min
Fig.1

Los 16 hidrocarburos son eludos en menos de 40 min con alta resolucin

73

2. Instrumentacin
Fig.2

Fig.1

74

2. Instrumentacin

Factores que afectan la eficiencia de una columna capilar

Naturaleza de la fase estacionaria
Dimensiones de la columna (Longitud, dimetro y espesor
de fase estacionaria).
Temperatura de la columna
Velocidad del gas portador
Cantidad de muestra inyectada

75

2. Instrumentacin

DETECTOR
Requisitos de un detector ideal para GC:
- Adecuada sensibilidad para los analitos
- Buena estabilidad y reproducibilidad
- Respuesta lineal en varios rdenes de magnitud
- Intervalo de T de trabajo de 25 400 C

Necesarios

- Tiempo de respuesta corto e independiente

del caudal de fase mvil
- Manejo sencillo
- No destructivo

Deseables

No existe ningn detector que cumpla

simultneamente todas estas caractersticas
76

2. Instrumentacin

DETECTOR DE IONIZACIN DE LLAMA

FID
Destructivo

Fig.1

Ctodo
(colector de
iones CHO+)
nodo
(soporte de
la llama)
Bovina de
ignicin
Aislante de vidrio

Alta sensibilidad
Ionizacin de las molculas
orgnicas:
CH + O CHO+ + e-

Difusor de aire
Entrada
de aire

Flujo
de gas
desde la
columna
Entrada de hidrgeno

77

2. Instrumentacin

DETECTOR DE CONDUCTIVIDAD TRMICA

TCD
Conexiones elctricas a
la fuente de alimentacin
y al circuito exterior
No destructivo
Bloque

Salida del
flujo de gas

Flujo
de gas
desde la
columna

Filamento (Au, Pt W)

Fig.1
78

2. Instrumentacin

DETECTOR DE CAPTURA DE ELECTRONES

ECD
Aislante

Emisor de partculas

No destructivo

Flujo
de gas
desde la
columna

Alta sensibilidad y sensibilidad para

compuestos con grupos electronegativos
Electrodo +

Electrodo 79

2. Instrumentacin

DETECTOR DE MASAS

MS
Destructivo

Flujo
de gas
desde la
columna

Cmara de
ionizacin

Analizador

Multiplicador
de
electrones:
Detector

Sistema de
adquisicin de
datos

Sistema de alto vaco

ALTA SELECTIVIDAD: - Deteccin de iones seleccionadas

- Deteccin de una reaccin seleccionada
80

2. Instrumentacin

Detector

Lmite de
deteccin

Intervalo
lineal

Tratamiento
soluto

Ionizacin en llama

2 pg/s

> 107

Destructivo

Conductividad trmica

400 pg/mL
(propano)

> 105

No destructivo

Captura de electrones

5 fg/s

104

No destructivo

Espectrmetro de
masas

25 fg a 100 pg

105

Destructivo

Fotometra de llama

< 1 pg/s (P)

< 10 pg/s (S)

> 104
> 103

Destructivo

Nitrgeno-fsforo

100 fg/s

105

Destructivo

81

3. Aplicaciones

Determinacin de pesticidas
Determinacin de VOCs, halofenoles, haloanisoles
Determinacin de PAHs
Determinacin de PCBs
Determinacin de compuestos organometlicos (As, Se,
Mn, Sn)

y si mis analitos no son voltiles?

Uso reacciones de derivatizacin

82