Vrus Transmitidos pela Transfuso

Paulo Roberto Santana de Melo

O sangue e seu Potencial Infeccioso

O sangue um fluido complexo que tem o potencial de
transmitir doenas infecciosas;
O homem pode ser infectado por uma infinidade de agentes
infecciosos contando com vrus, bactrias, protozorios etc.;
A transfuso sangnea apesar de ser controlada por testes
diagnsticos pode transmitir um agente infeccioso para o
receptor;
A condio bsica de transmisso que um dado patgeno
esteja na corrente sangnea do doador para que seja transmitido.

O sangue e seu Potencial Infeccioso

TRIAGEM CLNICA BEM

REALIZADA!!

Erros em tcnica de
diagnstico,
sensibilidade dos kits,
etc.

O sangue e seu Potencial Infeccioso

s vezes um candidato doao no apresenta sintomas mas
apresenta uma infeco (HIV, VHC, VHB, etc.);
De um modo geral as doenas virais mais importantes
transmitidos por transfuso so:
- Hepatite B (VHB);
- Hepatite C (VHC);
- Hepatite G (VHG);
- Vrus TT (VTT);
- Citmegalovrus (CMV);
- HIV-1;
- HTLV-I e II;
- Parvovrus B-19.

VHB e Transfuso Sangnea

Vrus da famlia Hepadnaviridae com genoma constitudo de
DNA com cerca de 3.200 nucleottdeos;

Pelo menos quatro regies codificantes deste vrus so

superpostas codificando diferentes protenas (superfcie, core
ncleo, protenas X e a polimerase);

Estrutura Molecular do VHB

Ciclo Vital do VHB

VHB

Reciclagem

Sntese da partcula
positiva do core

Sntese da
partcula negativa
do core

Entrada
do Vrus
na clula
Partcula
do Core

Montagem do core e
Empacotamento do
RNA

Traduo

Citoplasma
Transcrio

Reparo
Ncleo

Transporte vesicular
para a membrana da
Construo do clula
envoltrio no
reticulo
endoplasmtico

Resposta Sorolgica ao VHB

ELISA

Taxa de Deteco (100.000 habitantes) da Hepatite B

por Unidade Federada, Brasil. 1996 a 2000.

Fonte: MS/FUNASA/CENEPI - 2002

Preveno da Transmisso do VHB por

Transfuso
Triagem clnica ainda possui papel fundamental na preveno
(histria prvia de hepatite aps 10 anos de idade);
Observao de fatores de risco de fundamental importncia
durante a triagem clnica (usurios de drogas endovenosas);
Confinamento involuntrio, exposio
(tatuagem, piercing, acidentes com agulha);

parenteral

recente

Testes sorolgicos incluem anti-HBc, determinao do HbsAg e

alanina aminotransferase (ALT);
Em doadores brasileiros a prevalncia de HbsAg de 0,63% e a de antiHBc extremamente varivel indo de 4% no Sul e Sudeste, atingindo 10,7%
na Regio Norte.

Vrus da Hepatite C

Capsdeo
Protenas do
envelope E1

Protenas do
envelope E2
Envelope lipdico

cido nuclico (fita nica, positiva,10

kb)
Flavivrus, da famlia Flaviviridae e subgnero Hepacivirus

ESTRUTRUTURA GENMICA DO VHC

1
1.149
9.033

2.187

4.971

5.916

Protenas Estruturais - CORE (nucleocapsdeo) e ENVELOPE

(E1 e E2);
No-Estruturais - NS2 a NS5.

Vrus da Hepatite C e Transfuso Sangnea

- ~170 milhes de pessoas infectadas no mundo;
(International Consensus Conference on Hepatitis C, 2008);
- 3 Milhes no Brasil;
- Incidncia de 3-4 mil pessoas/ano (OMS);
- Representa uma epidemia silenciosa* (indivduo pode ir doar
sangue sendo assintomtico);

- Gastos Sistema de Sade.

HISTRIA NATURAL
Hepatite Aguda

Resoluo 15-30 %

Doena leve
/moderada

Hepatite crnica (70-85% em 7-10anos)

Cirrose (20-30% em 1520 anos)

Evoluo da cirrose

Morte

Hepatocarcinoma (10 % em 20-30anos)

FORMA CRNICA 60 % EM MULHERES
JOVENS E CRIANAS.

Sintomas e Resposta Sorolgica ao VHC

ELISA e VHC

Porcentagem de Casos

VHC e Transfuso Sangunea

Usurios de drogas injetveis

Exposio Sexual
Transfuso

Ano
Dados de hepatite no-A e no-B
Fonte: Centro de Controle de Doenas

Trabalhadores de Sade

Vrus da Hepatite G e Transfuso Sangnea

- Vrus RNA da famlia Flaviviridae descoberto h pouco tempo
(1995);

- Possui 25% de homologia com o VHC em nvel protico;

- Seu genoma possui 9,3 Kb, no apresentando regies
hipervariveis;

- Nos EUA entre 1 e 2% dos doadores apresentam sorologia

positiva, no Brasil a prevalncia chega a 12% em algumas
Regies.

Vrus da Hepatite G e Transfuso Sangnea

- Hemoflicos apresentam alta prevalncia de RNA do VHG, assim
como usurios de drogas endovenosas e pacientes renais crnicos
em hemodilise;
- O VHG eficientemente transmitido em transfuses de sangue (8
a 12% dos receptores de sangue so infectados com esse vrus**);
- A eficincia da transmisso do VHG por componentes sanguneos
sabidamente contaminados de 50%;
- Ainda so indefinidos
patogenicidade do VHG.

os

aspectos

relacionados

com

Vrus TT e Transfuso Sangnea

- Vrus DNA isolado de um paciente japons de iniciais TT

(hepatite no classificada A-G);
- Possui semelhanas* com a famlia Circuviridae (infectam
plantas e invertebrados);
- Este vrus transmitido por transfuso sangunea, mas sua
patogenicidade no bem definida.

Vrus TT

Citomegalovrus Humano (CMV)

- Vrus envelopado pertencente famlia Herpesviridae;

- Composto por DNA fita dupla linear com cerca de 229 Kb

(possui a regio Us- nica Pequena e UI-nica Longa;

- Seus genes se expressam em fases distintas aps a infeco

das clulas hospedeiras.

Organizao Estrutural do CMV Humano

Citomegalovrus Humano
- Circula na populao em geral de forma relativamente
contnua;
- Associados a condies sanitrias precrias, a maior parte
das pessoas adquire CMV ainda na infncia;
- No Brasil a positividade sorolgica dos doadores de sangue
chega a 99%;
- Rotas como contato sexual, aleitamento materno, contato
com urina e outras secrees corporais, transfuso
sanguneas e transplantes de rgos.

Citomegalovrus Humano
Retinite

CMV associado com Herpes

Preveno da Transmisso do CMV Humano

- Somente possvel com doadores soronegativos*;
- Como os leuccitos so tambm clulas hospedeiras a sua
remoo pode ser uma alternativa;
- Componentes sem leuccitos como plasma fresco congelado,
concentrado de hemcias desglicerolizados, crioprecipitado so
ideais para preveno;
- Os filtros de leuccitos de terceira e quarta gerao conseguem
reduo de 99,9 a 99,99% e so efetivos na preveno de
transmisso transfusional do CMV.

Transfuso Sangunea e HIV

- A sndrome da imunodeficincia adquirida (SIDA/AIDS) foi
reconhecida como uma entidade distinta em 1981;
- Jovens homossexuais do sexo masculino, apresentando
manifestaes de imunodeficincias onde destaca-se o sarcoma
de Kaposi;
- Outras populaes como usurios de drogas endovenosas,
hemoflicos, receptores de transfuses sanguneas, adultos da
frica Central, etc.;
- Em 1985, foi descrito um segundo retrovrus causador da AIDS
denominado HIV-2.

Transfuso Sangunea e HIV

- Por volta de 1987 cerca de 8% dos casos de AIDS notificados
eram contaminados por transfuses sanguneas (Ministrio da
Sade);
- Juntamente com os hemoflicos que apresentavam 60% de
soropositividade para o HIV-1;
- Foi necessrio uma mobilizao tcnico-cientfica no intuito de
tornar a transfuso um procedimento mais seguro para este
patgeno.

Ciclo Vital do HIV

partcula HIV

Ligao do HIV clula

hospederira

Novas partculas
virais

CCRS

Clula infectada

gp120
CD4

protease
partcula HIV sendo
liberada da clula

HIV RNA
Transcriptase reversa

Protenas do HIV
Genoma RNA

integrase
DNA retrotranscrito
DNA integrado dentro
do genoma celular

Figura 06 : Ciclo de replicao do HIV-1

HIV e Resposta do Hospedeiro

ELISA

Diagnstico do HIV
- No banco de sangue atualmente realiza-se ELISA que pode ter
as seguintes caractersticas:
- Segunda gerao: 45 dias aps infeco;
- Terceira gerao*: 23 dias;
- Antgeno p24*: 15 dias;
- 10 dias para RT-PCR (biologia molecular);
- Transmisso pode ocorrer quando doadores esto no perodo
chamado de janela imunolgica (infecciosa);
- No Brasil o risco de transmisso varia de acordo com a
localidade estando em 1 para 60.000 em So Paulo e 1 para
676.000 em Ribeiro Preto.

HTLV-I e II e Transmisso no Banco de Sangue

- Primeiro retrovrus humano isolado em 1980, sendo seguido por
um vrus homlogo isolado em 1980 chamado HTLV-II;

- Na verdade este patgeno estava associado a um tipo de

leucemia/linfoma de clulas T do adulto (ATL) descrito em 1977 por
Takatsuki e cols.;

- O pr-vrus possui 9.032 pares de bases no caso do HTLV-I e

8.952 no caso do HTLV-II.

Nucleocapsdeo
p15ppppppp
p19ppppp

pp
Capsdeo
p24ppppppp

Transcriptase reversa
p62/p32ppppppppppp

p
Transmembrana Gp
46ppppppp

Gp
46ppppppp

HTLV-I e II Diagnstico
- Mtodos sorolgicos incluem ELISA e o Western Blot;

- Da mesma forma que outras doenas infecciosas, a

preveno de transmisso pode ser feita pela triagem clnica
alm dos mtodos diagnsticos;

- Desleucotizao de hecomponentes visto que o HTLV-I/II

um vrus preferencialmente localizado no interior do linfcitos;

Parvovrus B19
- Membro da famlia Parvoviridae constitudo por uma fita
simples de DNA;
- Associado com o eritema infeccioso, com manifestaes
como eritrodermia e febre (comum em crianas);
- Indivduos imunossuprimidos (AIDS) e
hemoltica podem evoluir para crise aplstica;

com

anemia

- A prevalncia em doadores de sangue varia de um caso para

cada 20.000 a 40.000 doaes, com taxa de transmisso por
transfuses no conhecida.

Parvovrus B19

ELISA
Positiva

Negativa

Positiva

Negativa

Positiva

Negativa

ELISA

Possibilidade de muitos testes ao mesmo tempo

(grandes centros de Hemoterapia).

Novas Ferramentas em
Triagem de Doadores

Tcnicas em Biologia Molecular

- Amplificao do DNA/RNA por PCR/RT-PCR:
PCR-RFLP;
PCR-alelo-especifico (ASO-PCR);
PCR-multiplex;
- Amplificao-sequenciamento;
- PCR em Tempo Real (Real Time - PCR);
- Microarray Chips.

Reao em Cadeia da Polimerase

Ctrl -

Marcador de
pares de
base

PCR
Deteco

1a 1b 2

3a 4

Tamanho esperado
dos produtos da
PCR (pb).
336
141
125
87
75

Portarias - MS
Portaria n 262, de 5 de fevereiro de 2002
Tornar obrigatrio, no mbito da Hemorrede Nacional a incluso nos Servios
de Hemoterapia pblicos, filantrpicos e/ou privados contratados pelo SUS, e
privados, os testes de amplificao e deteco de cidos nuclicos - NAT, para
HIV e HCV, em todas as amostras de sangue de doadores.
Portaria n 79/GM Em 31 de janeiro de 2003
Art. 1 Determinar a implantao, no mbito da Hemorrede Nacional, nos
Servios de Hemoterapia pblicos, filantrpicos, privados contratados pelo
SUS, e exclusivamente privados, da realizao dos testes de amplificao e de
deteco de cidos nuclicos (NAT), para HIV e para HCV, nas amostras de
sangue de doadores.
....
Art. 12. Fixar o prazo 12 (doze) meses, a partir da publicao desta Portaria,
para que todo o sangue coletado para uso transfusional no Pas seja testado
pelo NAT, no Servio pblico, filantrpico, privado contratado pelo SUS e
privado exclusivo.
Art. 13. O no cumprimento desta Portaria a partir do prazo estipulado
constituir infrao sanitria, de acordo com a Lei 6.437, de 20.08.1977.
HUMBERTO COSTA

Segurana transfusional
- Doadores triados e testados;
- Causas de infeco viral ps-transfusional:
1. Perodo de janela;
2. Variantes virais;
3. Outros agentes.

Passos para segurana transfusional

Leucodepleo

Risco Residual e NAT

Risco residual estimado aps a implantao do NAT
Lelie et al., maio 2002

Risco residual
antes do NAT

Risco residual
aps o NAT

Enterovrus e Transfuso de Sangue

Risco Zero??
OK
Sorologia

Inativao
do
Patgeno

Risco Zero

Leucodepleo

Referncias Bibliogrficas
1 - Harmening, Denise e Callhoun Loni. Tcnicas modernas em Banco de Sangue e
Transfuso. Editora Revinter LTDA. Rio de Janeiro. 2 ed.
2 - Marco Antonio Zago & Roberto Passetto Falco & Ricardo Pasquini. Hematologia:
Fundamentos e Prtica. Editora Atheneu.
3 - Pedro Teixeira e Slvia Vale. Biossegurana: Uma abordagem multidisciplinar.
Editora Fiocruz. 2002.
4 - J. B. Welch, K.McGowan, B. Searle, J. Gillon, L. M. Jarvis & P. Simmonds. Detection of
enterovirus viraemia in blood donors. Vox Sanguinis
Volume 80 Issue 4 Page 211 - May 2001.
5 - P. Nico Lelie et al. Sensitivity of HCV RNA and HIV RNA blood screening assays.
Transfusion
Volume 42 Issue 5 Page 527 - May 2002.
6 www.cdc.gov.