INSTITUTO POLITCNICO NACIONAL

GONZLES MARTNEZ CRISTIAN

Y
MARTINEZ ALBERTO LAURA ITZIL
GRUPO: 3FV1 SECCION: #3

PRACTICA : CARACTERIZACION ESPECTROFOTOMETRICA DEL ADN E

IDENTIFICACION DE BASES NITROGENADAS POR CROMATOGRAFIA EN
PLACA FINA.
Introduccin
IV. Cromatograma.
Una de las principales fuentes de informacin sobre
Real
Interpretado
los procesos moleculares es el archivo de
informacin de la clula, su ADN. El ADN lleva a
cabo la funcin de almacenamiento y transmisin de
informacin biolgica, en l se encuentran
especificadas las secuencias de aminocidos de
todas las protenas y las secuencias de nucletidos
de todas las molculas de RNA.
Un segmento de ADN que contenga informacin
necesaria para la sntesis de un producto biolgico
funcional (protena o RNA) recibe el nombre de gen.
Una clula contiene miles de genes por lo cual las
Discusin
molculas de ADN suelen ser muy grandes.
Concentracin de cidos nucleicos mediante
Tanto el ADN como el RNA contienen dos bases
relacin matemtica y NOMOGRAMA.
purnicas principales: adenina (A) y guanina (G),
Se obtuvieron valores diferentes entre ambos
tambien contienen dos bases pirimidnicas
mtodos, la diferencia es cercana a 3 milsimas, esto
principales: citosina (C) en ADN y ARN, mientras la
se debe a que la exactitud con que se obtienen las
segunda base en ADN es timina (T) y en RNA uracilo
concentraciones por medio de una formula
(U).
matemtica ya determinada difiere a la obtenida
Objetivos
experimentalmente, ya que en esta ultima existe
Determinar la concentracin y el grado de pureza
mayor grado de incertidumbre (variacin) debido a los
de
la
muestra
de
ADN
por
mtodos
errores relativos que se pueden presentar.
espectrofotomtricos.
Grado de pureza. El resultado obtenido de la relacin
Identificar por cromatografa en capa fina las bases
no se encuentra dentro de la vecindad que define a
nitrogenadas presentes en hidrolizados de ADN y
una muestra altamente pura y esta cercano al limite
RNA.
de una muestra de baja pureza. Este grado de pureza
Resultados
bajo se debe a la presencia de protenas que si
I. Concentracin de cidos nucleicos mediante la
relacionamos con el NOMOGRAMA podemos
siguiente relacin matemtica:
verificar, dndonos cuenta que incluso hay una mayor
cantidad de protenas que de c. nucleicos y que a su
Abs a 260 nm=1
[cidos nucleicos]= 0.05 mg/ml
vez podemos comprobar por la baja concentracin de
Absorbancia obtenida de la muestra a 260nm: 0.249
c. nucleicos obtenidos.
1
0.05
Cromatograma. Las bases nitrogenadas comunes
0.249
X
entre el ADN y ARN que nos revelo la cromatografa
son A,G y C, mientras en las que difieren son T y U, la
X: [cidos nucleicos de la muestra]= 0.01245 mg/ml
T se ubica nicamente en el ADN y el U en el RNA.
II. Concentracin de protenas y cidos nucleicos
de la muestra por medio del NOMOGRAMA:
[protenas mg/ml]= 0.05
[cidos nucleicos mg/ml]= 0.009
III. Grado de pureza de la muestra: Si la relacin
siguiente se cumple, entonces se considera que la
muestra tiene alta pureza.

1.8 < I Abs260nmI/IAbs280nm I < 2

Si la relacin anterior es <1.5 se considera que la
muestra presenta baja pureza.
Relacin obtenida:

Abs260nmI/IAbs280nm=0.249/0.162=

Conclusiones:
La concentracin de c. Nucleicos esta relacionada
a la [ADN] y depender a su vez de la pureza de la
muestra as como del mtodo espectrofotomtrico
usado en la determinacin.
La diferencia entre el ADN y RNA radica en una de
sus bases pirimidnicas, siendo la T especifica para el
ADN y el U para el RNA.
Bibliografa
Lehninger. Principios de bioqumica.
Editorial OMEGA. 4 edicin. Bercelona.
288,289,306,307 pp