Anlisis cualitativo y

cuantitativo
en cromatografa

INTEGRANTES DEL EQUIPO

Chi Aban Jesica Giselle

Donde Sima Claudia Alejandra
Ramos Varguez Alejandra
Tamayo Cabrera Noem

ANLISIS QUMICO

En cromatografa, as
como
en
otras
tcnicas
de
separacin, se utiliza
el anlisis qumico
para
detectar
y
cuantificar sustancias
presentes (analitos),
en un sistema.

ANLISIS CUALITATIVO

Sirve para identificar

qu elementos, iones
o compuestos hay en
una muestra

Tanto ste, como el

cuantitativo,
se
pueden realizar por
reacciones qumicas,
es decir en base a la
reactividad del analito
frente a un reactivo.
La deteccin puede
ser visual o por medio
de un instrumento
que mida la seal.

Es aplicable en HPLC
, pues permite medir
la altura y el rea del
pico y compararla con
la obtenida para una
muestra patrn.

ANLISIS CUANTITATIVO
Permiten determinar cunto hay de uno o
ms constituyentes de una muestra.

Es aplicable en cromatografa pues la posicin

en que aparecen los picos, permite determinar
el tiempo de retencin, el cual ser
caracterstico de cada sustancia.

Estos anlisis requieren ms esfuerzo (tiempo e

insumos) y un trabajo ms calificado que los
cualitativos. Un anlisis cuantitativo implica un
mayor costo y, por lo tanto, la decisin de que
anlisis hacer, depende del valor de la informacin
cuantitativa.

PARA REALIZAR UN ANLISIS CUANTITATIVO, SE DEBEN

REALIZAR LOS SIGUIENTES PASOS PARA QUE EL ANLISIS SEA
CONFIABLE:
Muestreo
Tomar una muestra representativa del sistema que se analizar.
Si no se sabe si la muestra contiene al analito, puede hacerse un anlisis
cuantitativo previo.

Preparacin de la muestra
Es imprescindible medir el volumen o la masa de la muestra, pues los resultados
siempre se expresan con referencia a la misma.
En muchos casos, es necesario hacerle un tratamiento a la muestra.

Determinacin de la concentracin
La eleccin del mtodo ms adecuado depende de la naturaleza de la
muestra, de la cantidad de analito presente y de sus interacciones con
otros componentes, de la precisin que requiere el anlisis, del costo y del
tiempo del anlisis.

CUANTIFICACIN EN GC Y HPLC
La cromatografa de gases y la cromatografa lquida de alta
resolucin (HPLC) son dos tcnicas de separacin de analitos
que permiten identificar y cuantificar un gran nmero de
compuestos. Para la cuantificacin de compuestos, existen
diversas tcnicas como:
a)

La normalizacin de reas

b)

El mtodo de patrn externo

c)

El mtodo de patrn interno

A) LA NORMALIZACIN DE
REAS

Es un medio para
establecer
el
porcentaje de cada
componente en la
muestra. Se calcula
dividiendo el rea de
cada
componente
entre el rea total y
multiplicando por 100.

La concepto anterior
se resume en la
ecuacin:

Es independiente del
volumen de inyeccin de
muestra y debe cumplirse
que todos los picos
deben estar separados.
Esta ecuacin solo se
puede aplicar para una
serie
homloga
de
compuestos de punto de
ebullicin muy parecidos
y
con
similares
respuestas del detector.

 Inyectar el mismo volumen de cada una de las disoluciones

patrn en el cromatgrafo, as como del extracto de la muestra.
De esta forma tendremos los distintos cromatogramas de los
patrones (un cromatograma para cada disolucin patrn) y el
cromatograma de la muestra.

Preparar una serie de disoluciones de concentraciones

crecientes, del patrn correspondiente al compuesto a
cuantificar. El intervalo de concentraciones ha de ser similar a
la concentracin del analito en la muestra problema.

2.1.-

Cuando se quiere cuantificar un compuesto presente en una

muestra, empleando este mtodo, los pasos a seguir son:

B) MTODO DE PATRN
EXTERNO

C) MTODO DE PATRN
INTERNO
La

relacin de masas conocidas de un patrn de la muestra y de un

estndar deber ser preparadas e inyectadas al cromatgrafo para
luego determinar las relaciones de rea. Estas relaciones de reas
son graficadas en funcin de la relaciones de masa.
Del

cromatograma se obtienen las reas de analito y del estndar y

luego con la ecuacin de calibracin y conociendo la masa del
estndar se puede obtener la masa del analito en la muestra.
La

masa del analito puede calcularse mediante la primera ecuacin

y el % de ste presente en la muestra, mediante la segunda
ecuacin.

LOS REQUERIMIENTOS PARA UN

BUEN ESTNDAR INTERNO SON:

Debe ser resuelto de los otros picos

Debe eluir cercano al pico de inters
Debe usarse una concentracin similar al pico
de pico de inters.Debe ser de las mismas caractersticas
estructurales.

REFERENCIAS

Aldaba, S.; Aramenda, P.; Bonazzola, C.; Lacreu, L. Qumica

2, qumica en accin, Colihue: Argentina, 2004; pp. 276-279.
Garca, M.; Colom, M.; Jaramillo, J. Manual del auxiliar de
laboratorio, 2 ed.; MAD: Espaa, 2003; pp. 401.
Fernndez, S. I. Cuantificacin de compuestos por
cromatografa: Mtodo del Patrn Interno.Chem.Rev [En
lnea] 2003, 3.
Gua
de
cromatografa
http://www.ciens.ucv.ve:8080/generador/sites/LIApregrado/arc
hivos/Guia%20para%20cromatografia.pdf
(consultado mayo 2014).
Fernndez, S. I. Cuantificacin de compuestos por
cromatografa: Mtodo del Patrn Externo.Chem.Rev [En
lnea] 2003, 4.