1.

FOSFATASA ACIDA
2.AMILASA
3.5-NUCLEOTIDASA
*

CAPITULO 12

*
FOSFATASA ACIDA

Altas las cantidades de estas

enzimas en prstata, estmago,
hgado, msculo, bazo, eritrocitos
y plaquetas
Actividades elevadas de Fosfatasa
en algunas enfermedades.

ENFERMEDADES
ENFERMEDADES HEPTICAS
HEPTICAS
Hepatitis
Hepatitis
en
en algunos
algunos tipos
tipos de
de cncer
cncer
ictericia
ictericia obstructiva
obstructiva
ENFERMEDADES
ENFERMEDADES SEAS
SEAS
enfermedad
enfermedad de
de Paget
Paget
carcinoma
carcinoma seo
seo

ENFERMEDADES
ENFERMEDADES HEMATOLGICAS:
HEMATOLGICAS:
leucemia
leucemia mieloctica
mieloctica
trombocitopenia
trombocitopenia idioptica
idioptica

IMPORTANCIA:

Diagnostico de
adenocarcinoma prosttico.
La fraccin prosttica se usa
como test de ayuda para:
Diagnstico del carcinoma
prosttico metastatizado.
Monitoreo del tratamiento.

La amilasa es un enzima
que tiene la funcin de
digerir el glicgeno y el
almidn para formar
azcares simples, se
produce principalmente
en las glndulas salivares
y en el pncreas.
*

AMILASA

Cuando uno de estas

glndulas se inflama
derrama la amilasa a
la sangre y aparece
elevado su nivel en el
anlisis de la amilasa
srica.

MECANISMOS:

Es
Es una
una protena
protena producida
producida por
por el
el
hgado.
hgado.
EI
EI ectoenzima
ectoenzima (la
(la forma
forma unida
unida a
a
membrana)
membrana) se
se encuentra
encuentra anclado
anclado a
a la
la
membrana
membrana plasmtica
plasmtica por
por restos
restos
fosfatidil-inositol
glicosilados.
La
fosfatidil-inositol
glicosilados.
La
ecto-5'-nucleotidasa
es
una
ecto-5'-nucleotidasa
es
una
glicoproteina
glicoproteina constituida
constituida por
por dos
dos o
o
cuatro
cuatro subunidades
subunidades de
de 68
68 a
a 70
70
kdaltons.
kdaltons.

*5-NUCLEOTIDASA

Utilidad de la
determinacin simultnea
de fosfatasa alcalina y
5'nucleotidasa para
diferenciar la enfermedad
hepatobiliar de las
alteraciones
IMPORTANCIA:
* seas.

FOSFATASA
ACIDA

AMILASA

5NUCLEOTIDASA

prstata,
estmago, hgado,
msculo, bazo,
eritrocitos y
plaquetas

funcin de digerir
el glicgeno y el
almidn para
formar azcares
simples

es
es una
una protena
protena produproducida
cida por
por el
el hgado.
hgado.
membrana
membrana
plasmtica,
plasmtica, tambin
tambin
se
se puede
puede detectar
detectar en
en
mitoconmitocon- drias,
drias,
microsomas.
microsomas.

suero:
suero: 0-13
0-13 UI/L
UI/L (0.5
(0.5 4
4
UKA)
UKA)
Total
Total (ACP):
(ACP): <
<9
9 U/l
U/l (a
(a
37oC)
37oC)
Prosttica
Prosttica (PAP):
(PAP): <
< 3,5
3,5
U/l
U/l (a
(a 37oC)
37oC)

- Carcinoma
prosttico
- Leucemia
mieloide aguda

El
El rango
rango normal
normal es
es de
de
23
23 a
a 85
85 unidades
unidades por
por
litro
litro (U/L).
(U/L). Algunos
Algunos
laboratorios
laboratorios dan
dan un
un
rango
rango de
de 40
40 a
a 140
140
U/L.
U/L.

El valor normal
es de 2 a 17
unidades por
litro.

Pancreatitis aguda
Colecistitis
Dao al pncreas
Nefropata

Hepatitis
Isquemia
heptica
Tumor heptico

COLINESTERASA
Y

Acetilcolina
Compuesto de amonio cuaternario
que no puede travesar membranas.
Neurotransmisor de:
Nervios parasimpaticos y
somaticos.
Ganglios neurovegetativos o
viscerales.
Carece de importancia
terapeutica por ultiplicidad de
accin.
Rpida inactivacin
(colinesterasas).
Posee actividad muscarinica y
nicotinica.

*Mecanismo de accin
* La Acetilcolinesterasa Es Una Enzima Situada En Las Hendiduras

Sinpticas Y All Va A Hidrolizar A La Acetilcolina, Despus De Que sta

Haya Realizado Su Funcin Mediante La Unin A Sus Receptores,
Permitiendo As Que Las Sinapsis Colinrgicas Transmitan Los Impulsos
Nerviosos. La Reaccin Catalizada Es La Hidrlisis De La Acetilcolina
Hasta Colina Y Acetato

*IMPORTANCIA
El Estudio De La Colinesterasa Se Realiza En El Control
Preoperatorio Ya Que Durante La Anestesia Se Utiliza Succinilcolina,
Que Es Un Agente Paralizante.
Si La Colinesterasa No Funciona En Un Individuo La Succinilcolina No
Se Elimina Y Puede Haber Graves Complicaciones (Parlisis Muscular
Y Apnea) Para Revertir Su Efecto Tras La Anestesia.
Tambin Se Utiliza Para Evaluar La Exposicin Intensa A Insecticidas
Organofosfatos, Los Cuales Inactivan Las Colinesterasas, Y El Nivel
De Estas Enzimas Sirve Como Un Indicador De La Exposicin Y De Los
Riesgos De Su Toxicidad.
A Veces Puede Ser Un Indicador De Ciertas Enfermedades Hepticas.

*ALDOLASA HEPATICA Y
MUSCULAR

* La aldolasa es una enzima involucrada en la

descomposicin de la glucosa, la fructosa y la galactosa,

el cual es un proceso utilizado por las clulas para generar
energa en la forma de ATP.

*SIGNIFICADO CLINICO
* Se trata de una enzima muscular, tambin presente en hgado y

cerebro.
los niveles disminuyen frente a enfermedades miodegenerativas
crnicas con baja masa muscular.
* La aldolasa es una enzima que se encuentra en el corazn y el msculo
esqueltico, es importante en al conversin de glucogeno a acido
lctico. est principalmente en las clulas jvenes y tambin en sus
ncleos.
* Cuando hay una disminucion conlleva a cnceres epiteliales de
esfago, pncreas, pulmn, mama. intolerancia hereditaria a la
fructuosa.

PRODUCCION
DE ENZIMAS
MICROBIANAS

Establecer las ventajas de la

produccin enzimtica a partir
de microorganismos
Conocer los microorganismos
productores de enzimas ms
importantes y utilizados en la
industria

*OBJETIVOS

Importancia de la produccin
de enzimas a partir de
microorganismos
* La necesidad de acelerar los procesos con baja velocidad gener
la bsqueda de alternativas para agilizarlos, dando como
resultado la utilizacin de enzimas, principalmente obtenidas a
partir de microorganismos.
* Estas permiten la realizacin de un proceso ms sencillo, la
optimizacin del producto al generar, mayor calidad, mayor
utilidad en su aplicacin, mayor rentabilidad, y la obtencin de
un producto diferente

* El aislamiento de microorganismos, como recursos

renovables, para su uso en la produccin de enzimas es

muy usual en:
la industria
la salud
debido a los beneficios que stos ofrecen como
estabilidad, especificidad y la aplicacin general viable.
El uso de enzimas microbianas proporciona grandes
ventajas en actividades necesarias como en:
biorremediacin del agua
industria alimentaria
produccin de antibiticos

Requisitos de un microorganismo
industrial
El microorganismo debe:
1- Producir la sustancia de inters
2- Obtenerse en cultivo puro
3- Ser genticamente estable.
4- Poder desarrollarse en cultivos a gran escala.
5- Poder mantener el cultivo del MO durante perodos largos en
el
laboratorio y en la planta industrial.
6- Tener un tiempo de duplicacin bajo y fabricar el producto
deseado
en un perodo corto.
7- Ser susceptible de manipulacin gentica.

Condiciones que no debe tener un

microorganismo industrial
Los microorganismos industriales no deben:

1- ser peligrosos para el hombre, animales y plantas

de inters
econmico.

2- liberar toxinas, o si lo hacen deben poder ser

eliminadas
fcilmente.

APLICACIN DE LAS
ENZIMAS PRODUCIDAS
POR MICROORGANISMOS

*Aplicacin Clnica
Aplicaciones bioqumicas:
Determinar la composicin en nucletidos, como lo hicieron
Zingard y Uziel, usando la enzima fosfatasa alcalina
inmovilizada para el anlisis secuencial de RNAt , por
endonucleasas.
Reasociacin e hibridacin, usando una subunidad
inmovilizada de una enzima y las subunidades libres a estudiar.

Cromatografa de afinidad, para aislar inhibidores enzimticos

y pptidos marcados.

*Aplicacin industrial
La hidrlisis enzimtica de celulosa a glucosa, a travs de la celulasa,
obtenida del Trichoderma viride, que sirve como fuente de energa o
para transformarla en productos valiosos como el etanol.
En la industria lctea, en la hidrlisis de la lactosa en glucosa y
galactosa, para que pueda ser consumida por personas con intolerancia
a la lactosa; para evitar la prdida de nutrientes en el suero del queso,
stos problemas se pueden eliminar o reducir con la hidrlisis
enzimtica de la lactosa por medio de la enzima galactosidasa
inmovilizada, obtenida principalmente de Saccharomyces lactis y
Escherichia coli.
Aminocidos, para suplementar los alimentos, enzimas como la
aminocido acilasa ayudan a su apropiada produccin; la enzima
aspartasa del E. coli ayuda en el proceso de produccin de cido
asprtico.
Detergentes; dado que la proteasa derivada de Bacillus subtillis, tolera
un medio alcalino, se emplea para hidrolizar los residuos alimentarios
que contienen protenas y almidn.

* APLICACIN EN INDUSTRIA FARMACETICA

La industria farmacutica incorpor la utilizacin de microorganismos
en los dcada de 1940. En los ltimos aos est utilizando la
tecnologa del ADN recombinante e ingeniera gentica.
Los microorganismos se utilizan para la obtencin de una gran
nmero de sustancias, como por ejemplo:
-produccin de antibiticos
-Produccin de vacunas
-Produccin de hormonas (insulina, del crecimiento,
esteroides)
-Produccin de vitaminas, aminocidos, enzimas, factores de
coagulacin

Muchos

han sido fabricados con tcnicas de ingeniera gentica, como

la insulina y la hormona de crecimiento, uroquinasa (coagulacin),
vacunas (hepatitis B, rabia y sarampin), interfern, factores de
coagulacin (VIII y IX).

La mayor parte de las vitaminas que se

aaden a los alimentos o de los
preparados
multivitamnicos
son
sintetizados en laboratorio.
Slo dos se fabrican utilizando
microorganismo:
-La vitamina B12 por bacterias
(Pseudomonas,
Propionibacterium)
-Riboflavina por bacterias y hongos
(Ashya). PRODUCCIN DE VITAMINAS

* PRODUCCIN DE AMINOCIDOS

Algunos aminocidos se utilizan en la industria alimentaria como potenciadores

del sabor, antioxidante u otros tipo de aditivos, como por ejemplo:

1.cido glutmico, potenciador del sabor

2.Lisina, como complemento en alimentos

de origen vegetal, ya que es un

aminocido esencial.
3.cido asprtico y fenilalanina son componentes del edulcorante artificial
aspartame.

.Se

utilizan bacterias como Corynebacterium o Brevibacterium, o bien por

sntesis enzimtica en laboratorio utilizando las enzimas de las propias bacterias.

.La

produccin microbiolgica de los aminocidos puede hacerse por

fermentacin directa, en la cual un microorganismo produce el aminocido en un
proceso estndar de fermentacin, o mediante sntesis enzimtica, donde el
microorganismo es la fuente de una enzima y entonces se utiliza sta en el
proceso de produccin.

*ENZIMAS EN EL

CAMPO
FARMACEUTICO

*Las enzimas presentan muchsimas aplicaciones y su utilizacin

en el mbito industrial se lleva a cabo desde hace muchos
aos.

* BIOTECNOLOGIA

En
En el
el siguiente
siguiente esquema
esquema se
se
mencionan
mencionan algunas
algunas aplicaciones
aplicaciones
industriales
industriales de
de las
las enzimas:
enzimas:

Y ENZIMAS

La
La utilizacin
utilizacin de
de enzimas
enzimas ha
ha
demostrado
demostrado su
su eficacia
eficacia en
en
la
la sntesis
sntesis de
de frmacos
frmacos

Ello
Ello se
se debe
debe a
a que
que
representan
representan una
una
alternativa
alternativa ms
ms
eficiente
eficiente yy a
a la
la vez
vez ms
ms
ecolgica
ecolgica a
a la
la qumica
qumica
sinttica
sinttica tradicional
tradicional

*ENZIMAS EN EL

*Ya que los procesos que catalizan transcurren a travs de

reacciones en medios ms respetuosos con el medio ambiente y

bajo condiciones de pH y temperatura suaves con mayores
rendimientos.

CAMPO
FARMACEUTICO

.Etapas en el escalado industrial de un proceso biocatalizado por

enzimas

En
En general,
general, el
el escalado
escalado industrial
industrial de
de cualquier
cualquier proceso
proceso biocatalizador
biocatalizador
requiere
requiere actualmente
actualmente de
de unas
unas etapas
etapas previas
previas que
que incluyen:
incluyen:

(1)
(1) la
la seleccin
seleccin
de
de la
la enzima
enzima
ms
ms adecuada
adecuada

(2)
(2) su
su
produccin,
produccin,
aislamiento
aislamiento yy
purificacin
purificacin

(3)
(3) su
su caracterizacin
caracterizacin
para
para determinar
determinar las
las
condiciones
condiciones idneas
idneas
para
para la
la catlisis
catlisis
enzimtica,
enzimtica, yy
finalmente
finalmente

(4) su inmovilizacin con el fin de reducir los costes. Todas

estas etapas se suelen agrupar bajo el trmino ciclo
biocataltico

anlisis
anlisis de
de
antibiticos
antibiticos

deteccin
deteccin de
de
antgenos
antgenos o
o
anticuerpos
anticuerpos

Las tcnicas enzimticas tambin

se utilizan en: deteccin de drogas

deteccin
deteccin de
de
enzimas
enzimas

metabolitos
metabolitos en
en
los
los fluidos
fluidos
intracelulares.
intracelulares.

* APLICACIONES

DE ENZIMAS
COMO
PRODUCTOS
MDICOS Y
FARMACUTIC
OS

A diferencia de otros usos industriales

para las enzimas, las aplicaciones
mdicas y farmacuticas de las mismas
requieren
generalmente
pequeas
cantidades de enzimas muy purificadas.

Esto se debe a que si el destino de una

enzima o de un producto obtenido por
mtodos enzimticos es su
administracin a un paciente, resulta
evidente que el preparado debe contener
las menores cantidades posibles de
material extrao para evitar probables
efectos secundarios