PROGRAMA NACIONAL DE PRODUO E USO DE BIODIESEL

Rede Brasileira de Tecnologia do Biodiesel

Seminrio Temtico da Agricultura
14 e 15 de junho de 2005
Embrapa Amaznia Oriental, Belm PA

PROSPECO, COLETA E MANEJO DE

RECURSOS GENTICOS
DE PLANTAS OLEAGINOSAS
NO BIOMA AMAZNIA
Jos F. M. Valls
Embrapa Recursos Genticos e Biotecnologia

BIODIVERSIDADE

RECURSOS BIOLGICOS
RECURSOS
GENTICOS

Definies relevantes
[ Conveno da Diversidade Biolgica, 1992 ]
[ Brasil Decreto Legislativo n 2, de 8.II.1994 ]

RECURSOS GENTICOS:
Materiais genticos de valor real ou potencial

MATERIAL GENTICO:
Todo o material de origem vegetal, animal, microbiana ou outra,
que contenha unidades funcionais da hereditariedade

Aes desenvolvidas em recursos genticos vegetais

Enriquecimento da variabilidade
Busca de fontes
Prospeco

Introduo

Coleta

Documentao

Inspeo

Quarentena

Coleta de germoplasma
No trabalho com Recursos Genticos, coleta-se germoplasma para :
(1) preservar ex situ segmentos da variabilidade til (em paralelo
conservao in situ - ou em vez de in situ, se h ameaa de eroso gentica)
(2) buscar materiais necessrios para programas de melhoramento
(coletas com esta finalidade no so necessariamente restritas ao pas)
(3) ampliar e completar a representatividade da diversidade gentica
disponvel de espcies autctones com uso potencial (direto ou atravs
de pr-melhoramento) insuficientemente representadas em bancos ativos
de germoplasma
A realizao de atividades de coleta, no mbito dos Recursos Genticos,
presume a definio inicial de:
Quem vai conservar? Como? Onde? At quando? Em que estruturas?
Com que garantia de manuteno da integridade gentica?

Prospeco e coleta de germoplasma

Embora eventualmente encarada como atividade aventuresca de cientistas
ansiosos por encontrarem novidades glorificantes, a coleta de germoplasma
uma das linhas de pesquisa que mais se beneficia do uso disciplinado de
mtodos cientficos sistemticos, planejamento preciso, com amplo perodo
de preparo e intensa consulta a fontes (literatura, herbrios, especialistas).
Aes de prospeco, requeridas onde o nvel de conhecimento cientfico
insuficiente e a locomoo difcil, precisam ser apoiadas pelos modernos
Sistemas de Informao Geogrfica. Ainda assim, dependem de profundos
conhecimentos sobre a taxonomia, distribuio geogrfica, ecologia e modo
de reproduo das espcies-alvo, por parte dos componentes da equipe.
No objetivo da coleta de germoplasma de germoplasms arrancar as
plantas da natureza e sim coloc-las disposio da pesquisa agrcola.
A prospeco e coleta tratam de cobrir lacunas que estejam restringindo
o uso sustentvel da biodiversidade em benefcio da humanidade.

Aes desenvolvidas em recursos genticos vegetais

Conservao
[A curto e mdio prazo (nos bancos ativos)]
A longo prazo:
Conservao in situ na natureza
Conservao in situ sob cultivo (on farm)
Coleo de base por sementes
Coleo de base in vitro
Banco de cultivares

Bancos ativos de germoplasma na Renargen

Leguminosas, oleaginosas e fibrosas:

[PC3]

Soja Feijo Caupi Amendoim Arachis Girassol

Algodo Gergelim Mamona Sisal Rami Curau
Espcies florestais e palmeiras:

[PC7]

Espcies florestais nativas Conferas florestais

Espcies folhosas introduzidas Palmeiras
Plantas industriais, medicinais, aromticas
e ornamentais:

[PC8]

Cana de acar Guaran Seringueira Erva-mate Nim

Pimenta longa Espinheira-santa Plantas ornamentais
Plantas medicinais e aromticas da regio Centro
Oeste e da Amaznia Oriental
Plantas medicinais da Amaznia Ocidental e do Acre

Aes desenvolvidas em recursos genticos vegetais

Caracterizao:
[nfase biolgica e diferencial]
Taxonmica Morfolgica Geogrfica Citogentica
Reprodutiva Gentica Fitopatolgica ...
Avaliao:
[nfase utilitria e comparativa]
Agronmica Fisiolgica Fitoqumica Nutricional ...
Curadorias: Sistemas Nacionais de Curadoria de
Germoplasma coordenam e monitoram atividades
com recursos genticos para a pesquisa e criam a
conscientizao nacional sobre a importncia do
enriquecimento e disponibilizao da variabilidade
e de sua conservao integral para o futuro

Utilizao dos recursos genticos no melhoramento

1. Escolha e domesticao de novas espcies
para incorporao matriz agropecuria
2. Seleo de novas linhagens ou de novas
raas de espcies de uso j tradicional
3. Seleo em prognies aps manipulao
reprodutiva
4. Incorporao de modificaes genticas
pela introgresso de genes de espcies
prximas por via reprodutiva
5. Incorporao de modificaes genticas
por transgenia

Recursos genticos vegetais em uso no Brasil

1. Cultivos exticos sem germoplasma nacional (caf, soja, citros,
cana de acar, eucaliptos, kiwi)
2. Cultivos americanos com cultivares locais derivadas de introduo
muito remota no Brasil (milho, feijo-fava)
3. Cultivos exticos com espcies associadas nativas do Brasil (arroz,
cevada, capim elefante)
4. Cultivos sul-americanos com a maioria dos parentes silvestres nativos
do pas (abacaxi, amendoim)
5. Cultivos de origem brasileira com a maioria dos parentes silvestres
ocorrentes no Brasil (mandioca, caju, seringueira)
6. Espcies silvestres brasileiras com potencial para incorporao matriz
agrcola mundial (Bromus auleticus, Adesmia latifolia e outras forrageiras e
fruteiras nativas, e muitas palmeiras)
7. Espcies silvestres exclusivas do Brasil, com potencial de cultivo em
escala internacional (Arachis pintoi e outras espcies forrageiras, palmeiras
oleaginosas, fruteiras, plantas florestais, medicinais e ornamentais)

Famlias de interesse oleaginoso conhecido, com o

nmero de espcies estudadas quanto produo
de leo e nmero de espcies no Brasil:
Anacardiaceae
Apiaceae
Arecaceae
Asteraceae
Boraginaceae
Brassicaceae
Chrysobalanaceae
Cucurbitaceae
Euphorbiaceae
Fabaceae

11 / 68
20 / 98
32 / 300
28 / 1900
10 / 93
105 / 92
5 / 180
29 / 200
145 / 1100
85 / 1550

Flacourtiaceae
Lecythidaceae
Linaceae
Lythraceae
Malvaceae
Onagraceae
Proteaceae
Sapotaceae
Sterculiaceae
Vitaceae

1 / 925
6 / 105
53 / 36
108 / 143
59 / 200
41 / 43
3 / 32
18 / 103
26 / 115
0 / 46

Adaptado de:
SILVA, S.I. Potencial oleaginoso da flora brasileira: Estado atual do conhecimento.
ARAJO et al. (eds). Biodiversidade, conservao e uso sustentvel da flora do Brasil.
Recife: SBB/UFRPE, 2002. p.234-237.

Etapas e conhecimentos para integrao do

germoplasma vegetal ao melhoramento e uso
Biotecnologia
Economia
Melhoramento
de plantas
Fitossanidade
Estatstica
Citogentica
Fisiologia
Fitotecnia
Fitogeografia
Botnica
Ecologia

Introgresso
Adoo
Avaliao
Caracterizao
Multiplicao
Aquisio

Nmero
decrescente
de acessos

RECURSOS GENTICOS VEGETAIS NO BRASIL.

Aspectos histricos
Agricultura indgena (acompanhada por intenso extrativismo)
Introduo de cultivos exticos. Espcies variadas. Fontes diversas.
Hoje: Forte concentrao na introduo de materiais muito selecionados.
Cultivares consagradas em outros ambientes/linhagens para melhoramento .
Introduo de espcies nunca testadas no pas,
Reintroduo de espcies e cultivares descartadas no passado
Colees vivas de plantas autctones (efmeras)
Indivduos ou prognies restritas conservadas em jardins botnicos
Parcelas de variabilidade mantidas em raas locais e cultivares antigas.
Porm, a variabilidade reunida ex situ no passado no foi bem conservada.

Anos 60: Poucas colees remanescentes (IAC, SARGS, ...)

Anos 70: Criao da Embrapa e do Cenargen + BAGs no SCPA
Anos 80: Criao do Programa Nacional de Recursos Genticos.
Cenargen como Unidade Coordenadora
Anos 90: Alteraes no Programa Nacional - Responsabilidades
mais dispersas, no mais sob coordenao do Cenargen
Anos 2000: Extino dos programas nacionais - Recursos Genticos
enquadrados em Rede (Renargen - Projetos componentes compartilhados).
Resultados histricos: Reduo das perdas de variabilidade, alm de
maior eficincia no processo de enriquecimento (introduo e coleta)
Resultado final: Ampliao da variabilidade disponvel para a pesquisa
Em paralelo: Reduo drstica da vegetao nativa, afetando plantas
de uso extrativista, onde se situam muitas espcies produtoras de leo.
Paradoxalmente, so poucos os programas nacionais de melhoramento
que utilizam uma parcela significativa da variabilidade aglutinada no pas.

Causas do uso incipiente da variabilidade disponvel (Van Sloten, 1987)

a) A falta de interesse de parte dos melhoristas, que geralmente j
possuem colees de trabalho substanciais;
b) O desejo da maioria dos melhoristas de trabalhar com materiais
avanados e no com as raas locais, cultivares antigas e espcies
silvestres conservadas em bancos de germoplasma;
c) A falta de informao sobre os materiais dos bancos de germoplasma,
ou mesmo a considerao de que, tal informao, quando disponvel,
inadequada ou insuficiente para o melhorista.
Na situao brasileira, deve-se acrescentar
d) A inexistncia de programas de melhoramento para grande parte das
culturas com germoplasma disponvel no pas.
e) A ausncia de tais programas para plantas de uso extrativista.
A eficincia dos bancos de genes no cumprimento de seu papel
nacional depende largamente da fora dos programas nacionais
de melhoramento gentico (Frankel, 1987).

Muitos melhoristas tm sido capazes de manter e, para

algumas culturas,at mesmo ampliar consistentemente
o potencial de rendimento, ao longo de muitos anos, a
partir das colees que j possuem.
(Evans 1983, Frankel & Brown, 1984).

A grande causa da falta de interesse pelo uso de

acessos de espcies silvestres ou formas ferais
de espcies cultivadas, a falta de conhecimento
generalizada sobre a contribuio potencial das
formas no cultivadas.

A falta de informao sobre os materiais disponveis nos

bancos de germoplasma pode ser superada:
a) pela organizao da informao j disponvel;
b) pela tomada disciplinada de observaes de maior interesse
dos usurios
c) pela divulgao adequada dessa informao.
Van Sloten (1987)
A situao mundial da informao sobre recursos genticos,
relativa a um nmero global de acessos, estimado por Holden
(1984) em mais de dois milhes, sumarizada na Tabela 1.

TABELA 1. Estimativa global da extenso da documentao de acessos

reunidos em bancos de germoplasma (Peeters & Williams, 1984).
___________________________________________________________
Acessos sem dados de passaporte
65%
Acessos sem dados de caracterizao
80%
Acessos sem dados de avaliao
95%
Acessos com dados extensivos de avaliao
1%
___________________________________________________________
Mais recentemente, o chamado Wye Report (Imperial College, 2002)
estimou o total de acessos contidos nos cerca de 1.470 bancos de
germoplasma distribudos mundialmente em torno de 5,4 milhes,
ressalvando, entretanto, que, devido grande quantidade de duplicatas,
o nmero de acessos distintos mantm-se abaixo de dois milhes.
Farmcia cujos medicamentos esto, na maior parte, sem rtulo (Sprage)

Vantagens da caracterizao e avaliao

a) Permitem a identificao dos acessos duplicados, simplificando os
trabalhos subseqentes, j no banco de germoplasma;
b) Permitem o estabelecimento de colees nucleares ( core collections),
que, por definio, abrangem, com o mnimo de redundncia a diversidade
gentica reunida em uma espcie cultivada e nas espcies silvestres a ela
relacionadas (Frankel & Brown, 1984; Hodgkin et al., 1995; Johnson &
Hodgkin, 1999; Hintum et al., 2000);
c) Permitem a identificao dos modos de reproduo predominantes nos
acessos, bem como da ocorrncia ou no de variabilidade intrnseca em
acessos individuais.
Sobre a possibilidade de postergar as atividades de caracterizao:
...Prover o conservar para o futuro adequado e responsvel,
mas servir s necessidades atuais igualmente necessrio,
especialmente porque o presente quem est pagando a conta
(Frankel, 1984)

A identificao dos modos de reproduo predominantes nos acessos

essencial para seu uso em programas de melhoramento (Streetman, 1963)
e permite o direcionamento dos trabalhos de multiplicao em bancos de
germoplasma, havendo metodologias distintas, adaptveis a plantas que
variam desde a propagao assexuada (Hawkes, 1970) at a reproduo
sexual e algama (Burton, 1979; Burton & Davies, 1984). O conhecimento
do modo de reproduo de acessos mantidos em bancos tambm til para
definio de estratgias de coleta de acessos adicionais da espcie em pauta.
Mas, o modo de reproduo apresentado por plantas incorporadas a bancos
de germoplasma no necessariamente o nico ocorrente na natureza.
Eragrostis curvula - gramnea forrageira africana (Capim choro)
Streetman, 1963
Vorster & Liebenberg, 1977

Apomixia obrigatria
Sexuais raros, porm mais freqentes
em ambientes transicionais

O Tringulo reprodutivo
Apomticas
6x=AABBCC
4x=AAAA, AAAA

2x=CC
2x=AA

4x=AABB
2x=BB

Algamas

Autgamas
[Adaptado de Fryxell, 1957]

Etapas do processo de caracterizao e avaliao:

(1) Correta identificao botnica
Obs: Esta informao pode ser difcil de obter, pois a taxonomia das plantas
cultivadas tem estado, tradicionalmente, em uma situao confusa.
Snowden (1936) subdividiu a diversidade do sorgo cultivado em 712 taxa
(espcies, variedades e formas), todos hoje reconhecidos como membros
de uma simples espcie biolgica (Harlan & de Wet, 1972; Harlan, 1984).
O nome cientfico de uma espcie a chave para toda a literatura disponvel
a seu respeito (Van Steenis, 1957) [ o primeiro descritor de qualquer acesso]
H muitos exemplos em que a denominao incorreta ou o uso de sinnimos
acarretaram atrasos na absoro de informaes j disponveis (West, 1968).
Conceitualmente, a caracterizao e a avaliao so extenses, nos nveis
infra-especficos, do sistema de classificao taxonmica (Lleras, 1985).
A aplicao comparativa de descritores s se justifica dentro da espcie.

Etapas do processo de caracterizao e avaliao:

(2) Elaborao do cadastro de acessos disponveis por espcie
Nesta etapa, baseada no preenchimento dos chamados descritores de
passaporte, comea a eventual identificao de duplicaes entre os
acessos reunidos, muitas vezes reincidentemente introduzidos no pas,
e freqentemente protegidos contra as tentativas de identificao correta,
sob o escudo de uma srie de denominaes locais, muitas delas criadas,
com ntido desprezo pelas denominaes anteriores, durante o freqente
intercmbio inter-institucional.
Esta etapa deve ser apoiada pelo processamento eletrnico de dados,
que facilita a emisso de listagens e gil intercmbio de informaes,
permitindo deteco automtica de nomes duplicados. Porm, exige,
em contrapartida, um cuidado nunca excessivo com a grafia correta das
denominaes, sem o que, as vantagens da computao so anuladas.

Etapas do processo de caracterizao e avaliao:

(3) Caracterizao
Consiste, idealmente, na anotao de caracteres de alta herdabilidade,
facilmente visveis ou mensurveis e que se expressam coerentemente em
todos os ambientes (Burton & Davies, 1984; Williams, 1984; Van Sloten, 1987).
Aspectos morfolgicos e fenolgicos, observados de forma sistemtica nos
acessos, atravs do confronto com listas de caractersticas descritivas ou
"descritores". Diferentes estados so previstos para cada descritor, com base
na experincia prvia dos pesquisadores com a cultura. Em muito poucas,
os estados so vinculados aos alelos que os determinam, mostrando, ento,
sua condio de marcadores genticos morfolgicos (IBPGR, 1982).
As listas, por si s, nada acrescentam ao conhecimento cientfico sobre as
culturas, apenas aglutinam informaes sobre diferenas j constatadas nas
espcies. Seu valor s surge pela aplicao s colees de germoplasma e
pelo uso consistente nos vrios bancos de germoplasma do mesmo cultivo.

Pode ser surpreendente para o pesquisador encarregado da aplicao dos

descritores, a constatao de que parte deles no tm valor algum para a
identificao de duplicatas ou para a discriminao segura dos acessos,
mas o fenmeno comum.
Onyilagha (1986) citou vrios exemplos de constataes da incapacidade
discriminatria de caracteres utilizados para classificar cultivares ou acessos
de espcies de Dioscorea. Em seus estudos, baseados no emprego de 40
caracteres morfolgicos, apenas 15 serviram para discriminar acessos.
Outros exemplos citados mencionam 16 caracteres considerados adequados
entre 75 utilizados ou, ainda, 28 entre 100 etc.
De modo geral, os descritores mais adequados para discernimento entre
espcies de um gnero tendem a ser os menos adequados para diferenciar
acessos ou cultivares de uma nica espcie do mesmo.
Em comparaes intra-especficas, tais descritores costumam
ser neutros e seu uso, portanto, nada traz de positivo.

Algumas das listas de descritores mundialmente disponveis, na maioria

preparadas por grupos de trabalho comissionados pelo antigo lnternational
Board for Plant Genetic Resources (IBPGR), hoje International Plant Genetic
Resources Institute (IPGRI), exigem a tomada de um nmero muito grande
de observaes, constituindo-se, sua aplicao ao germoplasma, em uma
tarefa consumidora de muito tempo, item este extremamente valioso para a
escassa comunidade cientfica envolvida com recursos genticos.
Frankel & Brown (1984) criticaram a extenso e o detalhamento de tais listas,
afirmando no verem ganhos cientficos ou prticos equivalentes pesada
carga imposta aos curadores e melhoristas. A seu ver, a tomada de dados
morfolgicos e fenolgicos deve restringir-se queles descritores requeridos
para identificao de duplicatas e para a montagem de colees nucleares.
Atualmente, parece oportuno refletir-se, se o uso crescente de marcadores
moleculares aleatrios, de altssimo custo, e quase sempre dissociados de
descritores de outra ordem, no representa um desperdcio paralelo, sob
outro conjunto de circunstncias operacionais.

Etapas do processo de caracterizao e avaliao:

(4) Avaliao preliminar
Conceito sempre se refere a um "nmero limitado de caracteres adicionais"
considerados desejveis por consenso dos usurios do germoplasma da
cultura em pauta (Burton & Davies, 1984; Williams, 1984; Ford-Lloyd &
Jackson, 1986; Van Sloten, 1987). Ex: Potencial de produo de leo.
Tal "nmero limitado" no o que aparece, em geral, em listas de descritores
preparadas para produtos coletivos (fruteiras tropicais, plantas forrageiras,
plantas florestais) (Kretschmer, 1979; IBPGR, 1980; Tyler et al., 1985).
O resultado comum do uso de descritores para tais produtos, especialmente
se realizado sem delineamentos adequados, o agrupamento dos acessos
por espcie e a inutilidade do exerccio para discriminao entre acessos.
Os maiores ganhos so alcanados quando os usurios imediatos e
outros especialistas colaboram nesta etapa. [Isto ocorre em vrios BAGs]

Etapas do processo de caracterizao e avaliao:

5) Avaliao aprofundada ou complementar
Metodologia extremamente varivel
Nmero de acessos obrigatoriamente reduzido
Repeties necessrias (incluindo multilocacionais e plurianuais)
Necessidade de reduzir possibilidades de escape
Exemplos: Resistncia ao frio em Hemarthria altissima (Oakes, 1979)
Produo de Trifolium repens associada compatibilidade
com gramneas (Rhodes, 1987)
Testes de resistncia a patgenos em folhas destacadas
(Subrahmanyan et al., 1982, 1983; Fvero, 2004)
Aspectos que mais exigem testes multilocacionais:
(1) Resistncia a doenas e pragas
(2) Reaes a estresses abiticos
(3) Fatores ligados produtividade e rendimento

Exatamente os
aspectos de
maior interesse
dos melhoristas

Novos aportes cientficos s atividades de caracterizao :

Caracterizao citogentica:
Contagem de cromossomos
Anlise do comportamento meitico
Anlise do saco embrionrio
Acompanhamento do desenvolvimento do tubo polnico
Clareamento de ovrios
Citogentica molecular (FISH e GISH)
Marcadores bioqumicos e moleculares:
Eletroforese, sorologia, cromatografia, composio em cidos graxos*
Eletroforese de protenas, principalmente enzimas
Marcadores de DNA: RAPD, RFLP, AFLP, SSR ...
* Cromatografia gasosa intensificada no Brasil aps a dcada de 70
(Silva, 2002)
Consideradas metodologias caras, podem produzir grande economia.
Maior sucesso resulta sempre da integrao de abordagens

Fitopatologia,
Fisiologia

ECOLOGIA

ESPECIALISTAS
EM RECURSOS
GENTICOS

BANCOS
ATIVOS
DE

ECONOMIA

MELHORISTAS
E OUTROS
USURIOS

GERMOPLASMA
TAXONOMIA

Gentica,
Citogentica

FITOTECNIA
INDSTRIA